| 性狀 |
| 本品為白色或類白色結(jié)晶粉末，是從豬或牛胰中提取制得的。據(jù)精制方法不同，有兩種形態(tài)：不規(guī)則細(xì)粉顆粒(無定形)和扁斜形六面體。可溶于稀醇、稀丙酮、酸、堿中，不溶于90%以上乙醇及其他有機(jī)溶劑，在pH 2-4時(shí)更穩(wěn)定，在堿性介質(zhì)中易破壞，加熱易變性。遇蛋白酶、強(qiáng)酸、強(qiáng)堿均能破壞。等電點(diǎn)pH 5.3-5.4，易與鋅、鎘、鈷等2價(jià)金屬結(jié)合。藥用常制成鋅胰島素，與魚精蛋白能形成復(fù)合體，且作用時(shí)間較長(zhǎng)。 |
| 所屬類別 |
| 生物化學(xué)品: 多肽及蛋白質(zhì)類: 蛋白質(zhì)類 |
| 用途與作用 |
降血糖藥。用于胰島素依賴型糖尿病；非胰島素依賴型糖尿病有嚴(yán)重感染、外傷、大手術(shù)等嚴(yán)重應(yīng)激情況；糖尿病酮癥酸中毒；糖尿病合并妊娠；營(yíng)養(yǎng)不良、消瘦、肝硬變初期可同時(shí)靜滴葡萄糖和小劑量胰島素，以促進(jìn)組織利用葡萄糖。
不良反應(yīng)：低血糖反應(yīng)，為胰島素使用不當(dāng)所致。過敏反應(yīng)，局部過敏為注射部位出現(xiàn)紅斑、丘疹、硬結(jié)；全身反應(yīng)有蕁麻疹或伴有血管神經(jīng)性水腫、哮喘、呼吸困難、偶見低血壓、休克甚至死亡。胰島素抵抗。注射部位脂肪萎縮。注射部位脂肪增生。 |
| 合成工藝與制法 |
方法一、酸醇提取減壓濃縮法
提取、堿化、酸化 將凍胰刨碎，加入2.3-2.6倍量86%-88%乙醇和5%草酸，10-15℃攪拌提取3h，離心，濾渣再用1倍量68%-70%乙醇和0.4%草酸提取2h，分離后合并濾液。提取液在10-15℃攪拌，并用氨水調(diào)pH為8-8.4，壓濾除去蛋白質(zhì)，及時(shí)酸化pH3.6-3.8，降溫為5℃，靜置4h使酸性蛋白沉淀。
豬胰臟[乙醇(70%), 草酸]→[10-15℃]提取液[氨水]→[pH8-8.4]堿化液[硫酸，pH3.6-3.8]→[5℃]酸化液
濃縮、去脂、鹽析 將上清液置減壓濃縮鍋，下層用帆布過濾，棄沉淀，將上清液并入濾液，減壓回收乙醇，將余液濃縮至相對(duì)密度為1.04-1.06。濃縮液轉(zhuǎn)入去脂鍋，速熱至50℃，速降至5℃，靜置4h，分離下層清液，調(diào)pH2-2.5，20℃攪拌加入270g/L固體氯化鈉，保溫靜置，得鹽析物胰島素粗品。
酸化液[30℃以下]→濃縮液[速熱速冷]→去脂液[NaCl, pH2]→鹽析物
除酸性蛋白、鋅沉淀 鹽析物按干重計(jì)算，用7倍量蒸餾水溶解，再加3倍量冷丙酮，4mol/L氨水調(diào)pH4.2-4.3，補(bǔ)加丙酮，使液中水和丙酮的比例為7:3，充分?jǐn)嚢瑁?℃以下放置過夜。次日低溫分離，得除酸性蛋白的濾液。濾液中加入氨水(4mol/L)，調(diào)pH 6.2-6.4，加人體積分?jǐn)?shù)為3.6%的乙酸鋅(20%)溶液，再用上述氨水調(diào)pH 6，低溫過夜。過濾，收集沉淀，用冷丙酮洗滌。
鹽析物[水，丙酮，氨水]→[pH4.2-4.3]濾液[氨水，醋酸鋅]→[pH6]沉淀
除堿性蛋白、結(jié)晶 沉淀按每克加冷2%枸櫞酸50ml、65g/L乙酸鋅溶液2ml、丙酮16ml，用冰水稀至100ml，溶解冷至5℃以下，用氨水(濃度同前)調(diào)pH8，速過濾，濾液速用枸櫞酸(10%)液調(diào)pH6，補(bǔ)加丙酮，使丙酮含量達(dá)16%。慢速攪拌3-5h，結(jié)晶析出后，于5℃放置3-4天。離心，取沉淀，去除上層灰黃沉淀，用水洗，丙酮、乙醚脫水，離心將結(jié)晶干燥，得結(jié)晶胰島素。pH 4.2沉淀回收制劑。
沉淀[枸櫞酸，乙酸鋅，丙酮，氨水]→[pH8, 5℃以下，過濾]濾液[枸櫞酸，丙酮]→[pH6]結(jié)晶[干燥]→結(jié)晶胰島素
沉淀回收 取除酸性蛋白(pH 4.2-4.3)的沉淀，用冷蒸餾水(7倍量)攪勻，鹽酸(2mol/L)調(diào)pH2.5，加干品量的3倍丙酮，用氨水(2mol/L)調(diào)pH4.2-4.3，補(bǔ)丙酮至30%，冷藏過夜。5℃以下，過濾，用氨水(2mol/L)調(diào)pH 6.2，每100ml加乙酸鋅(20%)1.8 m1，用氨水(2mol/L)調(diào)pH 6，低溫過夜。過濾，沉淀按(4)結(jié)晶處理。
方法二、分級(jí)提取直接鋅鹽沉淀
提取 將凍胰用刨胰機(jī)刨碎，按100kg胰加入300L 82%乙醇的比例投料。在10-12℃下加入6mol/L硫酸調(diào)pH 2.8-3，攪拌提取0.5h，再加6mol/L鹽酸調(diào)pH 2，繼續(xù)攪拌2.5h。分離殘?jiān)偌尤?5%乙醇150 L，用上述鹽酸調(diào)pH 2，攪拌提取2h，分離，合并兩次提取液。
豬胰臟[乙醇，硫酸，HCl]→[pH2.8-3, 10-12℃]提取液
堿化、酸化 提取液冷至0-5℃，用濃氨水調(diào)pH 7.8，加硅藻土板框壓濾，即用V鹽酸：V硫酸：V水=4：1：4液酸化pH2.5，沉淀完全后虹吸清液，吊濾，清液加氯化鋅液(每100kg胰加3kg，pH2.5)，取清液吊濾，清液用濃氨水調(diào)pH 6.8，于5℃過夜。次日，虹吸除去清液，過濾收集沉淀(上述過程均在0-5℃)。
提取液[氨水，水，混合酸]→[pH7.8-8, pH2.5]濾液[氯化鋅，氨水]→[pH2.5-6.8]沉淀
鋅沉淀、脫脂、鹽析、分級(jí)沉淀 取沉淀溶于5倍量蒸餾水，用6mol/L鹽酸調(diào)pH 2.7，12-15℃放置。次日放出下層清脫脂液，上層脂肪再用5倍量蒸餾水洗滌，回收下層清液做下批鋅沉淀溶解用。脫脂液用6mol/L鹽酸調(diào)pH 2.5，25℃加入270g/L氯化鈉鹽析，得粗制品，溶于20倍量蒸餾水中，再用上述鹽酸調(diào)pH 2.5，加160g/L氯化鈉鹽析，過濾，收集鹽析物，將其溶于7倍量蒸餾水中，加3倍量丙酮，用4mol/L氨水調(diào)pH 4.5，冷至0-5℃過夜，除沉淀 (另回收)得清液。
沉淀[HCl, 12-15℃]→[pH2.7]脫脂液[HCl, NaCl]→[pH2.5]粗制品[HCl, NaCl]→[pH2.5]鹽析物[氨水，丙酮，水]→[pH4.5]清液
鋅沉淀、結(jié)晶、干燥 取清液用4mol/L氨水調(diào)pH 6，加20%醋酸鋅液 (按100 kg胰加30m1)，析出白色沉淀，過濾，收集沉淀。按下列配方結(jié)晶(以 100kg胰所得沉淀物計(jì)算)：2%枸櫞酸500 ml，20%醋酸鋅6.5ml，丙酮160 ml，蒸餾水稀釋至1000 ml。冷卻至0-5℃，用4mol/L氨水調(diào)pH 8，過濾，除去沉淀。用10%枸櫞酸調(diào)pH 6，攪拌結(jié)晶2天，虹吸除去清液，離心收集結(jié)晶，用蒸餾水、丙酮各洗2次，置于五氧化二磷真空干燥器中干燥，即得胰島素成品。
清液[醋酸鋅，氨水]→[pH6]沉淀[枸櫞酸，丙酮，醋酸鋅]→[0-5℃，pH6]結(jié)晶體[水，丙酮]→[P2O5]胰島素成品。 |
| 參考質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) |
| 原料藥 | 中國(guó)藥典2000年版732頁(yè) | | 指標(biāo)名稱 | 指標(biāo) | 指標(biāo)名稱 | 指標(biāo) | | 效價(jià)/為標(biāo)示量的91%-110%/干燥失重/% | ≤10.0 | | 吸光度A(276nm) | 0.48-0.55 | 鋅 | (mg | 1000U) | ≤0.4 | | 氮/% | 14.5-16.0 | | 注射劑 | 中國(guó)藥典2000年版732頁(yè) | | 指標(biāo)名稱 | 指標(biāo) | 指標(biāo)名稱 | 指標(biāo) | | 效價(jià)/91%-116% | 鋅/(mg/1000U)/≤0.4 | | pH值 | 6.6-8.0 | 細(xì)菌內(nèi)毒素(EU | 單位胰島素) | <0.8 |
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