背景技術(shù)

葉酸不能在人體合成，只能通過(guò)食物或膳食補(bǔ)充劑攝取。葉酸的有關(guān)物質(zhì)主要是合成過(guò)程中殘留的原料、未反應(yīng)完的中間體、反應(yīng)副產(chǎn)物及降解雜質(zhì)，其分析方法也多有報(bào)道。葉酸在空氣中相對(duì)穩(wěn)定，紫外光照后易降解，在中性和堿性條件下穩(wěn)定，在熱的酸性溶液中不穩(wěn)定。故合成的葉酸產(chǎn)品純度不高，而雜質(zhì)的存在可能會(huì)引起毒副作用。葉酸雜質(zhì)C作為葉酸的雜質(zhì)存在，在化學(xué)性質(zhì)上與葉酸相似，但可能具有不同的生物活性和毒性。

為了保證藥物的安全有效，需要對(duì)藥物中的有關(guān)雜質(zhì)進(jìn)行研究、檢測(cè)和監(jiān)控?，F(xiàn)有技術(shù)中，《中國(guó)藥典》2020版、《美國(guó)藥典》43版和《英國(guó)藥典》2020版等藥典標(biāo)準(zhǔn)均記載有葉酸及其雜質(zhì)采用高效液相色譜法進(jìn)行分析測(cè)定。但是根據(jù)目前現(xiàn)有藥典標(biāo)準(zhǔn)記載的方法進(jìn)行檢測(cè)分析，存在主成分與雜質(zhì)分離度不高，尤其是葉酸雜質(zhì)C和葉酸雜質(zhì)E與葉酸主成分無(wú)法基線分離的問(wèn)題，甚至在最終檢測(cè)結(jié)果中，部分雜質(zhì)并未出峰，無(wú)法進(jìn)行含量測(cè)定。綜上所述，可以看出由于現(xiàn)有技術(shù)中的葉酸檢測(cè)方法專屬性不高，導(dǎo)致葉酸產(chǎn)品很難進(jìn)行雜質(zhì)定量監(jiān)測(cè)分析。

檢測(cè)方法

稱取葉酸原料藥適量置于容量瓶中，精密稱定，加適量28.6g/L碳酸鈉溶液是樣品 完全溶解，分別加入葉酸雜質(zhì)A、葉酸雜質(zhì)B、葉酸雜質(zhì)C、葉酸雜質(zhì)D、葉酸雜質(zhì)E、葉酸雜質(zhì)G及葉酸雜質(zhì)H各雜質(zhì)對(duì)照品，再用流動(dòng)相定量稀釋至主成分濃度約1mg/ml，各雜質(zhì)濃度約5μg/ml的混合溶液；取上述主成分及各雜質(zhì)對(duì)照品混合溶液5μl進(jìn)樣分析，檢測(cè)結(jié)果如下圖所示。

進(jìn)樣分析色譜條件如下所示：色譜柱：chromcore120 C8 5um 4.6*250mm；流動(dòng)相：甲醇?0.1mol/L乙酸銨溶液(采用醋酸溶液調(diào)節(jié)至pH6.5)，甲醇?0.1mol/L乙酸銨溶液的比例為12:88；檢測(cè)波長(zhǎng)：280nm；柱溫：25℃；流速：0.4ml/min。從附圖中可以看出，采用本實(shí)施例檢測(cè)方法進(jìn)行分析，葉酸主成分與葉酸雜質(zhì)C的分離度為2.3，葉酸主成分與葉酸雜質(zhì)E分離度為2.2，葉酸雜質(zhì)C和葉酸雜質(zhì)E于葉酸主成分間分離度良好，同時(shí)其他各組分分離度均大于1.5，相鄰峰之間分離度高，該檢測(cè)分析方法專屬性高。

參考文獻(xiàn)

[1]江蘇開(kāi)元藥業(yè)有限公司. 一種葉酸及其八種雜質(zhì)的檢測(cè)方法:CN202110252623.8[P]. 2022-09-13.