背景

木犀草素是一種很具有代表性的天然黃酮，在植物界分布較廣，主要存在于金銀花、菊花中，以糖苷的形式分布于芹菜、紫蘇葉及花生的外殼、忍冬等。木犀草素從乙醇離析出的為含一個結晶水的金黃色針狀體，微溶于熱水，難溶于冷水。水溶液呈悅目的淡黃色，可溶于10%氫氧化鈉水溶液，呈深黃色，木犀草素在正常條件下穩(wěn)定。木犀草素具有多種藥理活性，如消炎、抗過敏、降尿酸、抗腫瘤、抗菌、抗病毒等，臨床主要用于止咳、祛痰、消炎、降尿酸、治療心血管疾病、治療“肌萎縮性脊髓側索硬化癥”，SARS，肝炎等。但目前未見木犀草素用于防治神經炎癥相關疾病的報道。

發(fā)明內容

有鑒于此，本發(fā)明提供了一種木犀草素的應用，該木犀草素可以顯著抑制神經炎癥的活性。

神經炎癥主要表現(xiàn)為小膠質細胞激活，小膠質細胞內炎癥因子大量釋放，TLR4信號通路的激活，同時伴隨記憶損傷和認知功能障礙。

本發(fā)明提供了木犀草素在制備抑制小膠質細胞激活藥物中的應用。

優(yōu)選地，所述藥物用于抑制所述小膠質細胞中炎癥因子IL-1β、IL-6和TNF-α的表達。

優(yōu)選地，所述藥物用于抑制所述小膠質細胞中NO信號分子的產生。

本發(fā)明采用NO試劑盒檢測木犀草素對LPS誘導的小鼠小膠質細胞NO的釋放的影響。結果表明木犀草素可顯著抑制小膠質細胞的激活和小膠質細胞中NO的釋放。

本發(fā)明還提供了木犀草素在制備阻斷TLR4信號通路藥物中的應用。

本發(fā)明中，優(yōu)選阻斷TLR4信號通路下游的Myd88蛋白、NF-Kb蛋白和/或MAPK蛋白的表達，因而木犀草素可以阻斷Toll樣受體4(TLR4)信號通路。

本發(fā)明還提供了木犀草素在制備抑制神經炎癥藥物中的應用。

優(yōu)選地，所述神經炎癥為脂多糖誘導的神經小膠質細胞炎癥。

本發(fā)明還提供了木犀草素在制備預防或治療神經退行性疾病藥物中的應用。

優(yōu)選地，所述神經退行性疾病選自：老年癡呆、帕金森或多發(fā)性硬化癥。

優(yōu)選地，所述藥物還包括藥學上可接受的輔料。

優(yōu)選地，所述藥物的劑型為片劑、膠囊劑、顆粒劑、丸劑、懸浮劑、分散劑、糖漿劑或注射劑。

從以上技術方案可以看出，本發(fā)明具有以下優(yōu)點：

本發(fā)明提供了木犀草素的應用，由實驗結果可知，木犀草素可以抑制LPS誘導的小膠質細胞的激活，顯著抑制小膠質細胞內NO信號分子的產生，小膠質細胞和TLR4信號通路下游炎癥因子IL-1β、IL-6和TNF-α的表達。因此，木犀草素可以顯著抑制神經炎癥活性，可用于制備預防或治療神經退行性疾病藥物，具有臨床應用價值和開發(fā)前景。

圖1為本發(fā)明實施例1不同濃度的木犀草素對細胞活力的影響圖；

圖2為本發(fā)明實施例2不同濃度的木犀草素抑制LPS誘導小膠質細胞內NO的抑制率。

具體實施方式

為使得本發(fā)明的發(fā)明目的、特征、優(yōu)點能夠更加的明顯和易懂，下面將對本發(fā)明實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述，顯然，下面所描述的實施例僅僅是本發(fā)明一部分實施例，而非全部的實施例?；诒景l(fā)明中的實施例，本領域普通技術人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動前提下所獲得的所有其它實施例，都屬于本發(fā)明保護的范圍。

本發(fā)明實施例BV-2細胞購買于國家實驗細胞資源共享平臺，木犀草素購買于四川省維克奇生物科技有限公司，NO試劑盒購于碧云天試劑公司，LPS購于Sigma-Aldrich。

本實施例采用MTT法考察不同濃度的木犀草素對小鼠小膠質細胞的活力的影響。

(1)小鼠小膠質細胞系BV-2的培養(yǎng)

細胞培養(yǎng)液以DMEM為基礎，加入10％FBS、1％雙抗(青霉素和鏈霉素)配置。小鼠小膠質細胞系BV-2培養(yǎng)在5％CO2，37℃的細胞培養(yǎng)箱中，定期在顯微鏡下觀察細胞生長情況，當細胞貼壁面積約占培養(yǎng)瓶的70％-80％時，用胰酶消化細胞并傳代，之后繼續(xù)培養(yǎng)。

(2)細胞活力測定

實驗原理：活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結晶甲臜(Formazan)并沉積在細胞中，而死細胞無此功能。二甲基亞砜(DMSO)能溶解細胞中的甲臜，用酶聯(lián)免疫檢測儀在540或720nm波長處測定其光吸收值，可間接反映活細胞數(shù)量。

檢測方法：取對數(shù)生長期的BV2細胞，將細胞接種于96孔板內，細胞密度為5000/well，接種量為100ul/well，置于培養(yǎng)箱內。24小時后，取出96孔板，棄去上清液，按實驗組分組，分別換成無血清的DMEM培養(yǎng)液配置的不同濃度木犀草素(25μM、50μM、100μM、200μM)來孵育細胞，同時設置對照孔(對照組未加入木犀草素)和調零孔(TL)，每組設置6個復孔，置于培養(yǎng)箱中孵育24h。24小時后取出96孔板，棄去上清液，避光加mtt溶液(濃度0.5mg/ml)，每孔100ul，然后在放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)4小時。4h后，終止培養(yǎng)，小心吸走孔內培養(yǎng)液，每孔加入150ul DMSO，把板子前后左右搖晃數(shù)次，用酶標儀測試在570nm的波長處光吸收值，并計算細胞活力。

如圖1所示，木犀草素(MXC)在濃度為100μM及以下時，對細胞活力無影響，因此可選擇100μM及以下藥物濃度，進行藥效驗證。