背景及概述^[1]

核酸外切酶是指水解酶類中幾種亞類酶的總稱(EC3.1.11.13.14.15.16)。它們催化單個核苷酸殘基的水解，只水解DNA或RNA鏈的末端核苷酸。該酶在核酸的分解代謝、維持和修復中起重要作用，可用于多核苷酸的序列測定。核酸外切酶是一種要求有一個游離末端才能降解DNA或RNA的酶。5′-核酸外切酶需要有一個游離的5′端，從5′→3′的方向逐個降解核酸分子；3′-核酸外切酶則需要一個3′游離端，并按相反方向逐個降解核酸分子；而外切核酸酶Ⅲ(ExoⅢ)則是大腸埃希氏菌(Escherichiacoli)的一個多功能酶，使用最多的酶活性是3′→5′-核酸外切酶的活性，可在dsDNA中造成一個ssDNA區(qū)，故可用于Sanger的DNA序列分析法中。核酸外切酶只能從一個游離末端開始水解DNA或RNA分子的一類核酸酶。

核酸外切酶T(ExoT)又稱核糖核酸酶T(RNaseT)，沿3→5方向特異性作用于單鏈RNA或DNA的3突出末端。核酸外切酶T作用于3突出末端，產(chǎn)生RNA或DNA分子的平末端。核酸外切酶T具體有下列特點：1.特異地作用于單鏈DNA或RNA2.使DNA或RNA的3突出端變?yōu)槠烬R末端3.無核酸內(nèi)切酶和外切酶污染。核酸外切酶T反應(yīng)條件：1XBuffer4[50mM醋酸鉀，20mMTris-Ac，10mM醋酸鎂，1mMDTT(pH7.9@25℃)]。25℃溫育。核酸外切酶T對RNA和DNA具有不同的活性。對于RNA，在標準反應(yīng)條件下，通過凝膠電泳檢測，1單位核酸外切酶T可以完全消化1.0pmol的rA20。

主要參考資料

[1] 微生物學詞典

[2] 獸醫(yī)大辭典