背景^[1-7]

Cdk4 Rabbit Monoclonal Antibody（CDK4兔單克隆抗體）是用CDK4對兔進(jìn)行系統(tǒng)免疫再取出脾臟細(xì)胞賽選出只分泌單一CDK4蛋白的B淋巴細(xì)胞，再將此B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行雜交。最后制得分泌單一CDK4蛋白和無限增值的雜交細(xì)胞。Cdk4是一種酶，在人中由編碼CDK4基因。CDK4是細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶家族的成員。

該基因編碼的蛋白質(zhì)是Ser/Thr蛋白激酶家族的成員。該蛋白質(zhì)與釀酒酵母cdc28和粟酒裂殖酵母cdc2的基因產(chǎn)物高度相似。它是蛋白激酶復(fù)合物的催化亞基，對細(xì)胞周期G1期進(jìn)展很重要。這種激酶的活性僅限于G1-S期，其通過調(diào)節(jié)亞基d型細(xì)胞周期蛋白和CDK抑制劑控制P16 INK4A。該激酶顯示負(fù)責(zé)視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤基因產(chǎn)物（Rb）的磷酸化。

細(xì)胞周期蛋白D-CDK4（DC）復(fù)合物的Ser/Thr-激酶組分，其磷酸化和抑制視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤（RB）蛋白家族成員，包括RB1，并在G1/S轉(zhuǎn)換期間調(diào)節(jié)細(xì)胞周期。RB1的磷酸化允許轉(zhuǎn)錄因子E2F與RB/E2F復(fù)合物的解離以及隨后的E2F靶基因的轉(zhuǎn)錄，其負(fù)責(zé)通過G1期的進(jìn)展。在G1期早期磷酸化RB1。細(xì)胞周期蛋白D-CDK4復(fù)合物是各種促有絲分裂和抗致病信號的主要整合子。

還使SMAD3磷酸化以細(xì)胞周期依賴的方式并抑制其轉(zhuǎn)錄活性。三元復(fù)合物的組分，細(xì)胞周期蛋白D/CDK4/CDKN1B，核轉(zhuǎn)位和細(xì)胞周期蛋白D-CDK4復(fù)合物的活性所需。細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶（CDK）是與細(xì)胞周期蛋白相互作用并調(diào)節(jié)細(xì)胞分裂的激酶。有證據(jù)表明，Cdk4/6對Rb的C末端區(qū)域的磷酸化啟動(dòng)C末端區(qū)域和中央口袋之間的連續(xù)分子內(nèi)相互作用。初始相互作用從口袋中取代組蛋白脫乙?；?，阻斷Rb的活性轉(zhuǎn)錄抑制。這些分子內(nèi)相互作用為Cdk4/6和Cdk2對Rb的連續(xù)磷酸化提供了分子基礎(chǔ)。

Cdk4/6在G1早期被激活，阻斷Rb的活性抑制。在原代表皮細(xì)胞中，已發(fā)現(xiàn)致癌Ras瞬時(shí)降低細(xì)胞周期依賴性激酶（CDK）4表達(dá)，與G1期細(xì)胞周期停滯有關(guān)。CDK4共表達(dá)避免了Ras生長抑制并誘導(dǎo)類似鱗狀細(xì)胞癌的侵襲性人類腫瘤。腫瘤發(fā)生依賴于CDK4激酶功能，需要細(xì)胞周期蛋白D1但不足以進(jìn)行該過程。這些數(shù)據(jù)確定了CDK4調(diào)控中致癌Ras的新作用，并強(qiáng)調(diào)了CDK4抑制在預(yù)防不受控制的生長中的功能重要性。

應(yīng)用^[8][9]

CDK4兔單克隆抗體可用于Cdk4及其基因突變對于癌癥發(fā)生的研究：

腺癌組織周期蛋白D1、CDK4的蛋白表達(dá)定位、表達(dá)水平,及與P2 1蛋白表達(dá)、與臨床病理指標(biāo)的關(guān)系及其預(yù)后意義。方法:①應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色方法,檢測10 6例乳腺癌組織石蠟切片上的周期蛋白D1、CDK4的蛋白定位和蛋白表達(dá),比較其與P2 1的蛋白表達(dá),與臨床病理學(xué)指標(biāo),如病理類型、組織學(xué)分型、組織學(xué)分級、淋巴結(jié)狀態(tài)、雌激素受體狀態(tài)、TNM分期等之間的關(guān)系;②對周期蛋白D1、CDK4、P2 1及臨床病理指標(biāo)如腫瘤的組織學(xué)分級、淋巴結(jié)狀態(tài)、TNM分期、ER狀態(tài)等,應(yīng)用Kaplan Meier法Log rank檢驗(yàn)進(jìn)行單因素生存分析,應(yīng)用Cox比例風(fēng)險(xiǎn)模型進(jìn)行多因素生存分析。

參考文獻(xiàn)

[1]Expression of cell cycle regulatory proteins cyclin D1,cyclin E,and their inhibitor p21 waf1 cip1 in gastric cancer.Muller W,Noguchi T,Wirtz H,et al.Journal of Paleopathology.1999

[2]Cancer cell cycle.Sherr CJ.Science.1996

[3]Cyclin of phases G1,S and G2 M are overexpressioned in aneuploid mammary carcinomas.Collecchi P,Santoni T,Gnesi E,et al.Cytometry.2000

[4]Overexpression of cyclin D1 in human pancreatic carcinoma is associated with poor prognosis.Gansauge S,Gansauge F,Ramadani M,et al.Cancer Research.1997

[5]Cyclin D1 overexpression is an indicator of poor prognosis in resectable non-small-cell lung cancer.Keum JS,Kong G,Yang SC,et al.British Journal of Cancer.1999

[6]Cyclin-D1 expression in node-positive(N+)and node-negative(N-)infiltrating human mammary carcinomas.Collecchi P,Passoi A,rocchetta M,et al.International Journal of Cancer.1999

[7]P21 waf1 cipl and MDM2 gene expression in human breast cancinoma patients as related to prognosis.Jiang M,Shao ZM,Yu LM,et al.International Journal of Cancer.1997

[8]Cyclins and oncogenesis.Motokura T,Arnold A.Biochemistry and Biophysics.1993

[9]陸勁松,沈鎮(zhèn)宙,吳炅,江明,沈坤煒,韓企夏,施達(dá)仁,張廷璆,邵志敏.細(xì)胞周期蛋白D1、CDK4在乳腺癌中的表達(dá)及其臨床意義[J].中國癌癥雜志,2001(02):9-12.