背景[1-7]
Recombinant Rhesus Macaque IFN-γ(重組獼猴干擾素-γ)將猴IFN-γ基因與大腸桿菌重組,再誘導(dǎo)重組大腸桿菌表達(dá)目的蛋白。實驗主要用于猴IFN-γ相關(guān)研究的免疫組化和WB等實驗。 在人類中,IFNγ蛋白由IFNG基因編碼。干擾素γ(IFNγ)是二聚化的可溶性細(xì)胞因子,是II型干擾素的唯一成員。IFNγ或II型干擾素是一種細(xì)胞因子,對于抵抗病毒,某些細(xì)菌和原生動物感染的先天性和適應(yīng)性免疫是至關(guān)重要的。
IFNγ是巨噬細(xì)胞和II類主要組織相容性復(fù)合物(MHC)分子表達(dá)的誘導(dǎo)物的重要激活劑。異常的IFNγ表達(dá)與許多自身炎癥和自身免疫疾病有關(guān)。IFNγ在免疫系統(tǒng)中的重要性部分源于其直接抑制病毒復(fù)制的能力,最重要的是其免疫刺激和免疫調(diào)節(jié)作用。IFNγ主要由自然殺傷(NK)和自然殺傷T(NKT)細(xì)胞產(chǎn)生,作為先天免疫反應(yīng)的一部分,并由CD4 Th1和CD8細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞(CTL)效應(yīng)T細(xì)胞一旦發(fā)生抗原特異性免疫。
IFNγ也是由非細(xì)胞毒性的先天淋巴細(xì)胞(ILC)產(chǎn)生的,這是一種免疫細(xì)胞家族,最早在2010年初發(fā)現(xiàn)。IFNγ單體由六個α-螺旋的核心和C-末端區(qū)域中的延伸的未折疊序列組成。
IFN-γ通過兩個單體的反平行互鎖形成生物活性二聚體。在卡通模型中,一個單體顯示為紅色,另一個單體顯示為藍(lán)色。IFNγ的細(xì)胞應(yīng)答通過其與由干擾素γ受體1(IFNGR1)和干擾素γ受體2(IFNGR2)組成的異二聚體受體的相互作用而被激活。IFNγ與受體的結(jié)合激活JAK-STAT途徑。IFNγ還與細(xì)胞表面的糖胺聚糖硫酸乙酰肝素(HS)結(jié)合。
然而,與許多其他硫酸乙酰肝素結(jié)合蛋白相反,其中結(jié)合促進生物活性,IFNγ與HS的結(jié)合抑制其生物活性。IFNγ具有抗病毒,免疫調(diào)節(jié)和抗腫瘤特性。它改變多達(dá)30種基因的轉(zhuǎn)錄,產(chǎn)生各種生理和細(xì)胞反應(yīng)。干擾素-γ(human interferon-γ,hIFN-γ)是一種常見的天然糖蛋白,屬于干擾素(Interferon,IFN)家族的一員,具有多種生物活性。
根據(jù)蛋白來源和結(jié)構(gòu)不同可將IFN家族分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型,而hIFN-γ屬于Ⅱ型IFN,其主要通過作用于巨噬細(xì)胞及T細(xì)胞來調(diào)節(jié)機體免疫來達(dá)到抗病毒的效果,而體外研究發(fā)現(xiàn)IFN-γ可抑制體外培養(yǎng)癌細(xì)胞的增殖并誘導(dǎo)其凋亡,同時對多種移植瘤模型亦有效,表明其有較好的抗腫瘤潛能。其中的影響是:
1.促進NK細(xì)胞活動
2.增加巨噬細(xì)胞的抗原呈遞和溶酶體活性。
3.激活誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)
4.誘導(dǎo)活化的血漿B細(xì)胞產(chǎn)生IgG2a和IgG3
5.通過誘導(dǎo)抗原加工基因,包括免疫蛋白酶體的亞基(MECL1,LMP2,LMP7),以及正常細(xì)胞增加I類MHC分子以及抗原呈遞細(xì)胞上的II類MHC的表達(dá)是特異性的。TAP和ERAAP可能還可能直接上調(diào)MHC重鏈和B2-微球蛋白本身。
6.促進白細(xì)胞遷移所需的粘附和結(jié)合
7.誘導(dǎo)內(nèi)在防御因子的表達(dá)-例如,對于逆轉(zhuǎn)錄病毒,相關(guān)基因包括TRIM5alpha,APOBEC和Tetherin,直接代表抗病毒作用
應(yīng)用[8][9]
干擾素-γ1b被用于治療慢性肉芽腫病和骨硬化病以及癌癥免疫療法中的治療:
當(dāng)對患有膀胱癌和黑素瘤癌癥的患者施用干擾素γ時,觀察到存活率提高。最有希望的結(jié)果是在卵巢癌的2期和3期患者中實現(xiàn)的。的體外IFN-γ在癌細(xì)胞研究較廣泛,結(jié)果表明IFN-γ導(dǎo)致生長抑制或細(xì)胞死亡,通常通過誘導(dǎo)的抗增殖活性的細(xì)胞凋亡,但有時通過自噬。此外,據(jù)報道哺乳動物糖基化與在大腸桿菌中表達(dá)的非糖基化形式相比,在HEK293中表達(dá)的重組人干擾素γ的改善其治療功效。
參考文獻
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