巨噬細胞遷移抑制因子（MIF）能夠與CD74結(jié)合并激活絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）通路，從而抑制細胞凋亡，促進腫瘤生長、侵襲和血管生成。MIF在腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中的重要作用，意味著MIF很有可能成為新的抗腫瘤藥物靶點。

除了能夠與CD74結(jié)合并誘導信號轉(zhuǎn)導，MIF還有互變異構(gòu)酶活性，且互變異構(gòu)酶活性位點位于與CD74結(jié)合的氨基酸殘基附近。因此，作者推測MIF互變異構(gòu)酶活性抑制劑可能能夠干擾MIF/CD74結(jié)合并阻礙MIF誘導的信號轉(zhuǎn)導。IOS-1是首個MIF互變異構(gòu)酶活性抑制劑，且研究表明其確實能夠抑制MIF的細胞因子活性，這一結(jié)果證實了作者的猜想。但由于藥效不足、理化性能差、化學反應活性差等原因，目前已知的抑制劑（如ISO-1，4-IPP和SCD-19）均沒有進入臨床開發(fā)階段，因此需要更好的新型抑制劑來促進基礎研究和藥物開發(fā)。

以往測定MIF互變異構(gòu)酶活性主要是通過免疫熒光催化4-HPP酮羰基和烯醇式之間互變異構(gòu)，通過紫外吸收光譜中的相應變化來監(jiān)測酶活性的變化。但是烯醇反應物在水環(huán)境中不穩(wěn)定，并且這個反應的檢測波長（306nm）特異性不高，因此，本文作者設計用熒光指示劑置換（FID）分析方法來測定MIF的異構(gòu)化酶活性。

研究表明7-羥基香豆素和MIF酶活性位點有很高的親和力，且伴隨熒光猝滅。因此作者合成了多種7-羥基香豆素的衍生物，以4-HPP為底物測定這些衍生物對MIF的抑制作用，并對這些衍生物的構(gòu)效關(guān)系進行研究，然后在此基礎上合成出了更加優(yōu)化的熒光探針（化合物7）。

后續(xù)實驗表明：相比傳統(tǒng)的免疫熒光法，以化合物7為熒光探針進行的FID分析更靈敏、精確，且能夠在中性的PBS緩沖液中進行。這一結(jié)果證實化合物7是一種優(yōu)良的MIF酶活性抑制劑和檢測指示劑。除此以外，作者還發(fā)現(xiàn)由于化合物7和MIF的酶活性位點有非常高的親和力，導致對附近的氨基酸殘基產(chǎn)生影響，從而干擾MIF和CD74的結(jié)合，進而抑制癌細胞的增殖。

總結(jié)：作者以7-羥基香豆素為基本骨架，合成出了多種熒光探針，開發(fā)了新的分析方法來更好地測定MIF異構(gòu)化酶活性。這些7-羥基香豆素衍生物中，化合物7和MIF酶活性位點親和力高，抑制活性最強，且能夠阻礙MIF/CD74結(jié)合，抑制A549細胞的增殖。這些結(jié)果為推進面向MIF的研究提供了非常有價值的方法和研究思路。