磷脂是一種從植物或動(dòng)物中通過(guò)物理加工方法提取出來(lái)的磷脂混合物一般用卵磷脂來(lái)統(tǒng)稱這種混合物。其主要成分是卵磷脂（磷脂酞膽堿）、腦磷脂（磷脂酞乙醇胺）、肌醇磷脂（磷脂酞肌醇）、磷脂酸及絲氨酸磷脂（磷脂酞絲氨酸）。

磷脂酰乙醇胺的應(yīng)用

磷脂酰乙醇胺(Phosphatidyl ethanolamine, PE)，又稱為腦磷脂，是構(gòu)成生物膜的重要磷脂之一，主要存在于腦、神經(jīng)、微生物和大豆中，在信號(hào)傳導(dǎo)和維持生命功能等方面發(fā)揮重要作用。因此，磷脂酰乙醇胺的測(cè)定對(duì)于研究生物膜的生物活性及功能具有重要意義。腦磷脂其分子結(jié)構(gòu)和卵磷脂相似只是以氨基乙醇代替了膽堿，具有α、b兩種異構(gòu)體。腦磷脂水解后可得到甘油、脂肪酸、磷酸和乙醇胺。腦磷脂以動(dòng)物腦組織中含量最多約占腦千物質(zhì)總量的4-6%。

用作醫(yī)藥品的卵磷脂必須具有較高的純度,才能保證給藥的安全性.特別是作為靜脈注射用脂肪乳化劑的卵磷脂以及用于治療心血管疾病, 神經(jīng)系統(tǒng)疾病的卵磷脂針劑產(chǎn)品純度要求更高(腦磷脂含量應(yīng)低于5%),否則將產(chǎn)生不良反應(yīng)。因此，分離卵磷脂和腦磷脂具有重要的研究意義。

磷脂酰乙醇胺的分離

目前分離兩種磷脂的方法包括溶劑萃取法、柱層析法、膜分離法等。其中，柱層析法是目前實(shí)驗(yàn)室及工業(yè)常用的方法。一般是采用吸附柱層析和離子交換柱層析法。為了達(dá)到分離效果?必須對(duì)柱層析條件如柱的幾何形狀、填充方法、填充物顆粒大小、溫度、樣品用量、流速、洗脫液的組成等因素加以選擇和控制。選用的吸附劑一般為硅膠、氧化鋁、二氧化硅等。洗脫液常選用氯仿、低級(jí)醇等種溶劑的混和物?也可采用梯度洗脫^[1]。

實(shí)驗(yàn)室柱層析法分離操作如下^[2]：

稱取45 g已活化好的柱層析用硅膠，加入適量氯仿浸泡過(guò)夜.用玻棒攪拌硅膠使之懸浮于氯仿中，成為糊狀漿料.然后將漿料沿著層析柱壁慢慢地傾倒入層析柱中，邊加邊攪拌，一次加完，同時(shí)將層析柱下面的旋塞打開(kāi)，以利于硅膠沉降。此時(shí)應(yīng)注意不要有氣泡產(chǎn)生，傾倒至離柱頂5 cm處時(shí)，停止加料，并關(guān)掉旋塞，靜置一夜，讓硅膠完全沉降。

稱取適量卵磷脂粗品溶于氯仿中，打開(kāi)旋塞，用2～3倍柱體積的氯仿液流過(guò)層析柱以保證平衡，調(diào)整好滴速。當(dāng)氯仿液面恰好到達(dá)硅膠床層頂面時(shí)，立即關(guān)上旋塞。用一支注射器沿柱壁將樣品溶液慢慢鋪在床層頂面，以減少對(duì)床層的擾動(dòng)。

打開(kāi)旋塞,慢慢排出下部流出液,使樣品進(jìn)入頂面,再用氯仿小心地洗滌上部柱壁,直到柱層上面有(1～2)cm的溶液.連接柱的進(jìn)口，用一定濃度的甲醇/氯仿混合液進(jìn)行梯度洗脫，梯度差為甲醇/氯仿體積比為(1∶2)～(2∶1)。用自動(dòng)部分收集器收集流出液，用紫外檢測(cè)儀監(jiān)測(cè)。分別合并含腦磷脂和卵磷脂的洗脫液進(jìn)行濃縮、干燥，稱重。

參考文獻(xiàn)

[1]李衛(wèi),邵友元,黃光斗.柱層析法分離卵磷脂和腦磷脂[J].湖北工學(xué)院學(xué)報(bào),2001,(02):63-65.

[2]柳葉. 氧化鋁柱層析分離純化磷脂的工藝優(yōu)化[D].浙江大學(xué),2006.