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中性紅的染色原理與應(yīng)用

2022/5/23 10:50:19

中性紅(Neutral red),是一種活細胞及測定酸堿度的一種指示劑。分子式:C15H17ClN4,分子量:288.7753,深綠色結(jié)晶粉末。易溶于水和醇,水溶液呈紅色,醇溶液為黃色。

中性紅染色原理

中性紅是一種弱堿性 pH 指示劑,變色范圍 pH6.4~8.0之間(由紅變黃)。也是一個弱陽離子的分子。其溶液用于染細胞中的液泡(主要是植物細胞),可鑒定細胞死活.活細胞被染成紅色,而死細胞不變色。與臺盼藍相反。它也可以用于動物細胞活細胞活性的檢測。做病毒相關(guān)實驗的人都知道,在做病毒的空斑實驗時,最后需要用到中性紅染色,數(shù)那種不是紅紅的、空白的小孔作為空斑。

應(yīng)用范圍

中性紅實驗檢測細胞活性或毒力檢測應(yīng)用范圍是非常廣的。下面是我列舉的12種可以用到它的方面。大家可以評估一下自己是否可以用到。

Viral cytopathogenicity and treatment effectiveness

Estimation of cytotoxic T-lymphocyte populations

Ab-dependent complement cell damage (Filman)

Tumoral cell growth and chemotherapy effectiveness

Toxicity of physical agents either alone or in combination with

chemicals, and, in particular, phototoxicity

Determination of toxins in biological and environmental samples and in

biotechnological products

Ranking chemicals according to their toxic potencies or hazard

Identification of organ- and cell-specific toxicity

Comparison of species toxicity

Establishment of chemical structure–toxicity relationships

Elucidation of antagonistic/synergistic interactions between chemicals

Toxicity prevention and treatment effectiveness

The investigation of metabolism-mediated cytotoxicity (detoxication

and toxification process)

The study of temperature-dependent toxicity

各個組織中性紅染色的圖片(來源于網(wǎng)絡(luò))

各個組織中性紅染色的圖片

排均為正常的細胞,第二排是SY5Y細胞在不同濃度zinc chloride處理下的細胞樣子及中性紅分布情況。

活細胞中染色原理

我們可以看出在正常的細胞中,會出現(xiàn)胞漿大部分呈淡粉色,其中有藍色的泡狀東西,還有深紅色的類似于鐵銹狀的東西,為什么呢?

首先,中性紅是一個弱陽離子的分子(也就是高中的有機化學(xué),為什么弱堿性的分子是一個弱陽離子的分子),可以通過被動運輸?shù)姆肿訑U散方式穿過細胞膜,進入到細胞中然后在溶酶體中聚集。

其次,因為是一種被動運輸方式,那中性紅的吸收必須依賴于細胞產(chǎn)生ATP維持pH梯度的能力。在生理pH值下,染料呈現(xiàn)接近于零的凈電荷,使其能夠穿透細胞膜。

再次,那它為什么會在溶酶體中聚集呢?溶酶體是一個酸性的液泡狀結(jié)構(gòu),基質(zhì)中包含很多陰離子(高中有機化學(xué))。中性紅會通過非靜電模式與溶酶體基質(zhì)中的陰離子相結(jié)合,因此染料帶電并保留在溶酶體內(nèi)。

來源:果子學(xué)生信

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中性紅的制備 2020/04/26