背景[1-3]
玫瑰紅瓊脂培養(yǎng)基可以用于藥品和生物制品中霉菌和酵母菌的計(jì)數(shù)、分離和培養(yǎng)用。成分(g/L)蛋白胨5.0；；葡萄糖10.0；；磷酸二氫鉀1.0；硫酸鎂0.5；玫瑰紅鈉0.0133；瓊脂14.0；pH6.0±0.2 25℃。
霉菌是真菌的一種，其特點(diǎn)是菌絲體較發(fā)達(dá)，無(wú)較大的子實(shí)體。同其他真菌一樣，也有細(xì)胞壁，寄生或腐生方式生存。霉菌有的使食品轉(zhuǎn)變?yōu)橛卸疚镔|(zhì)，有的可能在食品中產(chǎn)生毒素，即霉菌毒素。自從發(fā)現(xiàn)黃曲霉毒素以來(lái)，霉菌與霉菌毒素對(duì)食品的污染日益引起重視。對(duì)人體健康造成的危害極大，主要表現(xiàn)為慢性中毒、致癌、致畸、致突變作用。
玫瑰紅瓊脂培養(yǎng)基
酵母是單細(xì)胞微生物。它屬于高等微生物的真菌類。有細(xì)胞核、細(xì)胞膜、細(xì)胞壁、線粒體、相同的酶和代謝途徑。酵母無(wú)害，容易生長(zhǎng)，空氣中、土壤中、水中、動(dòng)物體內(nèi)都存在酵母。有氧氣或者無(wú)氧氣都能生存。
酵母是兼性厭氧生物，未發(fā)現(xiàn)專性厭氧的酵母，在缺乏氧氣時(shí)，發(fā)酵型的酵母通過(guò)將糖類轉(zhuǎn)化成為二氧化碳和乙醇（俗稱酒精）來(lái)獲取能量。
檢驗(yàn)原理：蛋白胨提供碳源和氮源；葡萄糖提供能源；磷酸二氫鉀為緩沖劑；硫酸鎂提供必須的微量元素；玫瑰紅鈉作為選擇性抑菌劑可抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)，并可減緩某些霉菌因生長(zhǎng)過(guò)快而導(dǎo)致菌落漫延生長(zhǎng)；瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。
用法：稱取本品31.5g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,121℃高壓滅菌15分鐘備用。
應(yīng)用[4][5]
用于蘋果炭疽葉枯病菌T-DNA插入突變體的致病和生物學(xué)特性研究
近年來(lái),由膠孢炭疽菌（C.gloeosporioides）引起的蘋果炭疽葉枯病成為我國(guó)蘋果生產(chǎn)中的重要病害。
從以ATMT方法構(gòu)建的該病原菌突變體庫(kù)中選擇了16個(gè)突變體菌株進(jìn)行了致病性和生物學(xué)研究,篩選鑒定出6個(gè)致病相關(guān)基因,明確了不同突變菌株的生長(zhǎng)和產(chǎn)孢條件。為該病原菌致病機(jī)制的進(jìn)一步研究和炭疽葉枯病治理提供了理論和材料基礎(chǔ)。
研究結(jié)果如下:通過(guò)蘋果果實(shí)有傷接種實(shí)驗(yàn),篩選出6個(gè)致病性變化的突變體,其中突變體A4204、M44、A3638及A1598完全喪失致病性,突變體A1919和A1643致病性減弱。突變體菌株A3638在所有培養(yǎng)基中生長(zhǎng)速度顯著下降,說(shuō)明該基因調(diào)控病菌的營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)。對(duì)突變體的產(chǎn)孢能力測(cè)定結(jié)果表明:相較于野生型菌株Stj16,突變體A4202產(chǎn)孢能力顯著增強(qiáng),而4個(gè)插入突變體M44、A2983、A3144和G1183的產(chǎn)孢量顯著降低,推測(cè)A4202基因可能對(duì)病菌產(chǎn)孢具負(fù)調(diào)控作用,而M44等四個(gè)基因具有正調(diào)控作用。
生物信息學(xué)分析和蛋白亞細(xì)胞定位研究結(jié)果表明,A4202可能通過(guò)調(diào)控細(xì)胞分裂而影響病菌產(chǎn)孢。生物學(xué)形狀觀測(cè)結(jié)果:1)菌株在玫瑰紅瓊脂培養(yǎng)基（RBA）上生長(zhǎng)速度下降,但產(chǎn)孢能力顯著升高;2)多數(shù)菌株的生長(zhǎng)適應(yīng)酸堿范圍為p H4.0～8.0,但是突變體菌株A4202在此范圍內(nèi)生長(zhǎng)較差,而突變菌株M44只有在p H8.0時(shí)才正常生長(zhǎng);3)多數(shù)突變體菌株在光暗交替培養(yǎng)條件下產(chǎn)孢量較大,但突變株菌株A1764在持續(xù)暗培養(yǎng)條件下產(chǎn)孢量相對(duì)較大。
上述生物學(xué)研究結(jié)果,為進(jìn)一步開展相關(guān)基因的機(jī)理研究提供了培養(yǎng)方法。菌株的最適生長(zhǎng)溫度測(cè)定結(jié)果表明:多數(shù)突變提菌株和野生型菌株Stj16的生長(zhǎng)溫度均為25?C～30?C,相較于其他溫度環(huán)境,Stj16在30C時(shí)產(chǎn)孢量最高,進(jìn)一步解釋了該病菌在田間的發(fā)病條件和規(guī)律,即在夏季高溫高濕條件下極易爆發(fā)為害。