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沙門、志賀菌屬瓊脂培養(yǎng)基(SS)的應(yīng)用

2021/6/1 10:17:11

背景[1-3]

沙門、志賀菌屬瓊脂培養(yǎng)基(SS)用于沙門氏菌,志賀氏菌的選擇性分離培養(yǎng)。沙門、志賀菌屬瓊脂培養(yǎng)基(SS)為肉粉色均一粉末,加入水中混懸均勻,滅菌后融化狀態(tài)為半透明棕紅色液體。接種沙門氏菌、乙型副傷寒沙門氏菌、志賀氏菌、大腸埃希氏菌,菌落特征典型,生長良好;抑制金黃色葡萄球菌、單增李斯特氏菌生長。

沙門、志賀菌屬瓊脂培養(yǎng)基(SS)

成分(g/L):牛肉粉:5.0g;示月胨:5.0g;乳糖:10.0g;3號膽鹽:8.5g;

枸櫞酸鈉:8.5g;硫代硫酸鈉:8.5g;枸櫞酸鐵:1.0g;

中性紅:0.025g;煌綠:0.00033g;瓊脂:17.0g;

PH值:6.9-7.1。

用法:稱取本品63.53克,溶解于1000ml蒸餾水中,加熱煮至沸,不必高壓蒸汽滅菌,冷至45-50℃倒成平板。

沙門菌屬體型大多為(0.7~1.5)μm×(2.0~5.0)μm,其無芽胞,是無莢膜的革蘭陰性直桿菌,除雞沙門菌外都有周身鞭毛,能運(yùn)動,多數(shù)有菌毛。營養(yǎng)要求不高,在普通瓊脂培養(yǎng)上即能生長,在液體培養(yǎng)基中呈均勻混濁。在SS瓊脂和麥康凱瓊脂培養(yǎng)基上35℃~37℃24h可形成直徑約2~4mm的透明或半透明菌落,對膽鹽耐受。產(chǎn)H2S者在SS瓊脂上形成黑色中心。

志賀菌屬大小為0.5-0.7μmx2-3μm,無莢膜,無鞭毛,不形成芽胞,某些菌株有菌毛。在選擇培養(yǎng)基上形成較小的半透明無色菌落。培養(yǎng)特性是需氧或兼性厭氧,液體培養(yǎng)基中呈渾濁生長,在普通瓊脂平板和SS培養(yǎng)基上形成直徑2mm左右的中等大小、半透明的光滑型菌落,宋內(nèi)志賀菌可形成扁平、粗糙的菌落。

應(yīng)用[4][5]

用于雞源沙門氏菌多重耐藥的分子特征研究

研究雞源沙門菌的藥物敏感性特征、耐藥基因檢測及其流行性特征,以及1株耐四環(huán)素類抗生素的tetM基因的上下游環(huán)境。通過細(xì)菌分離鑒定、藥敏試驗、耐藥基因檢測,研究雞源沙門菌多重耐藥性;

通過ERIC-PCR研究產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(extended-spectrumβ-lactamase,ESBLs)和AmpC酶的雞源沙門菌之間的進(jìn)化關(guān)系;通過接合試驗、質(zhì)粒提取、質(zhì)粒不相容群分析、Overlapping PCR分析tetM基因的上下游環(huán)境。

1、采集疑似沙門菌感染的病死雞的肝臟樣品860份,參考食品衛(wèi)生衛(wèi)生學(xué)檢驗沙門菌檢驗(GB/T4789.4-2010)標(biāo)準(zhǔn),具體通過SS瓊脂、科瑪嘉沙門菌顯色培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)菌初篩,再通過16S rRNA和特有侵襲基因(invA)擴(kuò)增、測序進(jìn)行鑒定,最終分離出156株雞源沙門菌。

2、根據(jù)CLSI推薦的標(biāo)準(zhǔn),采用微量肉湯稀釋法對156株雞源沙門菌分離株進(jìn)行了13種常用抗菌藥物的藥物敏感性試驗,結(jié)果顯示,分離株對阿莫西林、土霉素、磺胺、多西環(huán)素的耐藥率最高,分別為100%、99%、97%和87%;其次為氟苯尼考、恩諾沙星、慶大霉素,耐藥率分別為57%、49%、49%;對頭孢噻呋、頭孢喹肟、喹乙醇、痢菌凈較為敏感,耐藥率為27%、26%、22%、15%;對阿米卡星和黏菌素最敏感,敏感率為97%、99%;并且分離株全部為多重耐藥株,最低對3種抗菌藥物耐藥,最高對11種抗菌藥物耐藥,87%沙門菌對5種及其以上抗菌藥物耐藥,說明沙門菌多重耐藥株較多。

參考文獻(xiàn)

[1]Dissemination of IncFII plasmids carrying rmtB and qepA in Escherichia coli from pigs,farm workers and the environment[J].Y.Deng,Z.Zeng,S.Chen,L.He,Y.Liu,C.Wu,Z.Chen,Q.Yao,J.Hou,T.Yang,J.-H.Liu.Clinical Microbiology and Infection.2011(11)

[2]Epidemiology of extended spectrum beta-lactamase E.coli(CTX-M-15)on a commercial dairy farm[J].Eamon Watson,Sonja Jeckel,Lucy Snow,Rebecca Stubbs,Chris Teale,Heather Wearing,Robert Horton,Monique Toszeghy,Oliver Tearne,Joey Ellis-Iversen,Nick Coldham.Veterinary Microbiology.2011(3)

[3]IS Ecp1 element in association with bla CTX-M genes of E.coli that produce extended-spectrumβ-lactamase among the elderly in community settings[J].Su Fei Tian,Yun Zhuo Chu,Bai yi Chen,Hua Nian,Hong Shang.Enfermedades Infecciosas y Microbiologia Clinica.2011(10)

[4]Rapid identification of Salmonella enterica serovars,Typhimurium,Choleraesuis,Infantis,Hadar,Enteritidis,Dublin and Gallinarum,by multiplex PCR[J].Masato Akiba,Masahiro Kusumoto,Taketoshi Iwata.Journal of Microbiological Methods.2011(1)

[5]陳敏.雞源沙門氏菌多重耐藥的分子特征[D].河南農(nóng)業(yè)大學(xué),2018.

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