背景[1-3]
小鼠腎小管平滑肌細胞試劑盒適用于分離培養(yǎng)小鼠腎小管平滑肌細胞。體系提供了的組織分離條件，分離單個細胞的效率是已出版文獻中所報道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細胞在培養(yǎng)基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以程度地降低所培養(yǎng)的腎小管平滑肌原代細胞中成纖維細胞的含量。
腎小管的生理功能有三方面，物質的重吸收和排泌功能,如鈉、鉀、氯、鈣等電解質,蛋白質、氨基酸、葡萄糖的吸收和排泌;尿液的濃縮稀釋;泌氫和尿液酸化。其中，小鼠腎小管平滑肌細胞呈長梭形，無橫紋，細胞核一個，呈長橢圓形或桿狀。小鼠腎小管平滑肌細胞傳3-5代仍可以保持原代細胞的分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節(jié)特定基因的遺傳功能。
小鼠腎小管平滑肌細胞
雖然腎小管平滑肌組織機械韌性很強，但利用本公司試劑盒中提供的腎小管平滑肌組織分離體系來分離，EDTA/EGTA處理過的薄的腎小管平滑肌組織片能使得腎小管平滑肌細胞的一些功能特性發(fā)生改變，從而將腎小管平滑肌細胞分離開來。
應用[4][5]
用于胰島素抵抗的慢性腎臟病模型脂肪組織細胞因子譜分析研究
利用細胞因子抗體芯片技術對糖尿病和慢性腎臟病誘導的胰島素抵抗（Insulin Resistance,IR）的小鼠模型的脂肪組織進行檢測,分析并比較兩種模型的差異細胞因子,闡述其中的炎癥因子及內皮損傷相關因子在疾病中的作用,以期揭示慢性腎臟病患者胰島素抵抗的發(fā)病機制。
方法:1.分別建立慢性腎臟病小鼠模型和糖尿病腎病小鼠模型。通過5/6腎切除手術建立慢性腎臟病小鼠模型,建模12周后根據IPGTT和ITT實驗,把模型小鼠分為慢性腎臟病不伴胰島素抵抗組（CKD-NIR組）和慢性腎臟病伴胰島素抵抗組（CKDIR組）,檢測各項生化指標及腎病病理,構建慢性腎臟病模型。同時普通飲食喂養(yǎng)db/db小鼠和及對照組db/c小鼠,7個月后取材,留取尿液和血液便于生化指標檢測,留取各組小鼠腎臟用于高碘酸-希夫反應（Periodic Acid-Schiff stain,PAS）染色后觀察動物病理變化情況,判定模型是否成功建立。
2. 取上述慢性腎臟病和糖尿病腎病模型的附睪脂肪組織,利用細胞因子抗體芯片進行檢測。將所測樣本之間代謝物濃度的差異倍數（Fold Change,FC）>1.2且P值<0.05的細胞因子定義為差異表達因子,將差異因子進行GO分析,KEGG Pathway分析,分別探究每種模型中差異因子的作用,并比較兩種模型差異因子的異同。
3. 建立糖尿病腎病模型:與db/c組相比,db/db組小鼠的病理表現為腎小管間質纖維化、腎小球肥大、系膜基質細胞增多、基底膜增厚和足細胞足突部分融合,同時還伴有血清胰島素和HOMA-IR升高。2.與CKD-NIR組小鼠相比,在CKDIR組小鼠脂肪組織中發(fā)現30種差異表達蛋白,主要涉及負調節(jié)激素分泌,正調控T細胞趨化,正調控白細胞趨化,白細胞粘附或滾動,負調控平滑肌細胞遷移,刺激肝細胞生長因子等生物過程,參與細胞因子間互作,JAK-STAT信號通路,炎癥性腸病,美洲錐蟲病,肺結核等信號通路。
參考文獻
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[2]A renal-cerebral-peripheral sympathetic reflex mediates insulin resistance in chronic kidney disease[J].Wei Cao,Meng Shi,Liling Wu,Zhichen Yang,Xiaobing Yang,Hongfa Liu,Xin Xu,Youhua Liu,Fan Fan Hou,Christopher S.Wilcox.EBioMedicine.2018
[3]Interleukin-5 suppresses Vascular Endothelial Growth Factor-induced angiogenesis through STAT5 signaling[J].Felicitas Bucher,Jungho Lee,Sanghee Shin,Minseok M.Kim,Yong-Seok Oh,Sanghoon Ha,Hongkai Zhang,Kyungmoo Yea.Cytokine.2018
[4]NADPH oxidase 2（NOX2）:A key target of oxidative stress-mediated platelet activation and thrombosis[J].Eduardo Fuentes,Jonathan M.Gibbins,Lisa M.Holbrook,Iván Palomo.Trends in Cardiovascular Medicine.2018
[5]陳碧霞.胰島素抵抗的慢性腎臟病模型脂肪組織細胞因子譜分析[D].廣東藥科大學,2020.