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RNA酶抑制劑的分類

2021/2/8 13:33:45

RNA酶抑制劑 (Ribonuclease Inhibitor),即RNases抑制劑,是一種大腸桿菌重組表達(dá)的人胎盤核糖核酸酶抑制劑

(human placental RNA酶抑制劑),可以通過非競爭性方式按1:1比例和RNase A、RNase B、RNase C和人胎盤核糖核酸酶(human placental RNase)結(jié)合,并抑制這些酶的活性,從而保護(hù)RNA不被這些酶降解。

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RNA酶抑制劑對RNase A、RNase B、RNase C和人胎盤核糖核酸酶的抑制能力極強(qiáng),其Ki值低至約為4×10-14M。通常抗體和抗原的親和常數(shù)僅為10-6-10-9M。并且RNA酶抑制劑和這些RNA酶的結(jié)合是非??焖俚?,幾乎在加入的瞬間就會和這

些RNA酶形成復(fù)合物從而抑制其酶活性。

RNA酶抑制劑不能抑制RNase I、T1、T2、H、U1、U2、CL3、RNase from Aspergillus、S1 Nuclease、Taq DNA

polymerase、M-MLV reverse transcriptase和SP6、T7、T3 RNA polymerase的的酶活性。

RNA酶抑制劑在pH 5-8范圍內(nèi)保持其RNA酶抑制活性,在pH 7-8時抑制活性最高。RNA酶抑制劑維持其活力需要至少在溶液中含有1mM DTT。

常用的RNA酶抑制劑有哪些

1.焦碳酸二乙酯(DEPC):是一種強(qiáng)烈但不徹底RNA酶抑制劑,他通過和RNA酶的活性基因團(tuán)組氨酸的咪唑環(huán)結(jié)合使蛋白質(zhì)變性,從而抑制酶的活性。

2.異硫氰酸胍:目前認(rèn)為是最有效的RNA酶抑制劑,它在裂解組織的同時也使RNA酶失活,它既可破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)使核酸從核蛋白中解離出來,又對RNA酶有強(qiáng)烈的變性作用。是Trizol的主要組成試劑。

3.氧釩核糖核苷復(fù)合物(Ribonucleoside Vanadyl Complexes, RVC):是一種常用的核糖核酸酶(ribonucleases, RNase)抑制劑,即RNA酶抑制劑,濃度為200mM,廣泛用于各種RNA樣品的分離純化和檢測過程中以抑制RNA降解。

4.RNA酶的蛋白質(zhì)抑制劑(RNasin):從大鼠肝或人胚盤中提取得來的酸性糖蛋白.Rnasin是RNA酶的一種非競爭性抑制劑,可以和多種RNA酶結(jié)合,使其失活。

5.其他:SDS、尿素、硅藻土等對RNA酶也有一定的抑制作用。

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