概述[1-2]
核糖核酸酶(RNA酶)是一類水解RNA的酶，廣泛存在于所有動植物和微生物中。核糖核酸酶(RNA酶)抑制劑(RNase inhibitor ， RI)呈馬蹄鐵形， 分子量50 kD ， 是存在于哺乳動物胞漿中的酸性糖蛋白，與進(jìn)入細(xì)胞的異源RNase 結(jié)合， 阻止其攻擊和破壞細(xì)胞中的RNA 。在正常細(xì)胞中，抑制劑與RNaseA 以1∶1 比例緊密結(jié)合成復(fù)合物，抑制90 %以上的RNaseA 活性， 抑制劑與核糖核酸酶(RNA酶)A 的結(jié)合能調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)的RNA 代謝，對細(xì)胞的生理功能造成很多影響；抑制劑還能與血管生長因子緊密結(jié)合，具有阻斷腫瘤細(xì)胞對血管生長因子的粘附和強(qiáng)烈抑制血管生長因子活性的作用；RNase 抑制因子能使RNA 降解速度減慢， 延長其半衰期，故RNase及其抑制因子的活性與衰老密切相關(guān)。
應(yīng)用[3-6]
CN201610525863報道了一種microRNA的快速檢測方法，屬于生物檢測技術(shù)領(lǐng)域，該microRNA的快速檢測方法根據(jù)待測靶標(biāo)microRNA的序列設(shè)計出與其完全互補(bǔ)的單鏈DNA序列，而后在單鏈DNA序列兩端分別修飾熒光基團(tuán)和熒光淬滅基團(tuán)，從而獲得與待測靶標(biāo)microRNA相對應(yīng)的Taqman探針，而后將患者血清、RNase-free水、DSN酶、Taqman探針和RNA酶抑制劑按照一定的比例在特定的條件下進(jìn)行反應(yīng)，在激光的激發(fā)作用下，檢測出反應(yīng)液的熒光強(qiáng)度，即得到待測靶標(biāo)microRNA的檢測結(jié)果，該檢測方法大大縮短了四個心肌損傷標(biāo)志物的檢測時間，在保證檢測質(zhì)量的基礎(chǔ)上，提高了檢測效率。
CN201610710713報道了一種單個細(xì)胞RNA的提取方法，是利用無限梯度稀釋接種培養(yǎng)單細(xì)胞；顯微鏡下觀察，加入RNA酶抑制劑和胰蛋白酶消化細(xì)胞，將其在液氮速凍后高溫處理；再立即置于液氮速凍，速凍后加入蛋白酶K和RNA酶抑制劑，置于53℃的PCR儀中1h；最后對提取的RNA反轉(zhuǎn)錄后進(jìn)行PCR檢測。本發(fā)明的起始樣本量低，適用于單個細(xì)胞或少量細(xì)胞，安全無毒、操作簡單快速、提取高效、提取的RNA質(zhì)量高，可用于后續(xù)如RT-PCR等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
CN201610877375報道了一種用于從細(xì)胞中提取核酸的方法和試劑。本發(fā)明提供的核酸提取試劑包含以下成分：表面活性劑，RNA酶抑制劑，還原劑，螯合劑和緩沖成分。核酸提取方法是向細(xì)胞中加入適量的核酸提取試劑裂解細(xì)胞，加熱失活RNA酶，在冰上冷卻后即可用于基因表達(dá)水平檢測、基因克隆或測序等操作，也可保存于-20℃或-80℃以待后續(xù)的實(shí)驗(yàn)使用。此方法操作簡單，結(jié)果穩(wěn)定可靠，耗時僅需20分鐘左右，使用的試劑安全低毒，大大優(yōu)于傳統(tǒng)的核酸提取方法。
CN201110096219提供了一種預(yù)測膿毒癥患者病死率的試劑盒，該試劑盒包括反轉(zhuǎn)錄系統(tǒng)和擴(kuò)增系統(tǒng)。反轉(zhuǎn)錄系統(tǒng)由反轉(zhuǎn)錄酶、反轉(zhuǎn)錄體系緩沖液、RNA酶抑制劑、hsa-miR-16莖環(huán)結(jié)構(gòu)引物和消化后的RNA提取液組成。擴(kuò)增系統(tǒng)由含Taq酶的miRNA表達(dá)定量檢測混合液、hsa-miR-16擴(kuò)增引物與hsa-miR-16熒光標(biāo)記探針和U6snRNA擴(kuò)增引物與U6snRNA熒光標(biāo)記探針組成。本發(fā)明還提供了一種利用上述試劑盒預(yù)測膿毒癥患者病死率的方法。本發(fā)明的方法檢測定量準(zhǔn)確，簡便、快速且經(jīng)濟(jì)實(shí)用?？蛇M(jìn)一步同其他分子指標(biāo)與評分系統(tǒng)相結(jié)合，為膿毒癥患者預(yù)后預(yù)測提供綜合性分子標(biāo)記試劑盒，方便于臨床應(yīng)用。
主要參考資料
[1] 衛(wèi)生學(xué)大辭典
[2] 核糖核酸酶(RNA酶)研究進(jìn)展
[3]CN201610525863.X一種microRNA的快速檢測方法
[4]CN201610710713.6一種單個細(xì)胞RNA的提取方法
[5]CN201610877375.5一種用于從細(xì)胞中提取核酸的方法和試劑
[6]CN201110096219.2一種用于預(yù)測膿毒癥患者病死率的試劑盒及其用途