背景[1-3]
APC anti-human CD19是一類以anti-human CD19為抗原的APC多克隆抗體，可以特異性結(jié)合human CD19，主要用于檢測(cè)CD19的Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等多種免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)。
CD19檢測(cè)以免疫組織化學(xué)方法為主，利用抗原抗體發(fā)生特異性結(jié)合的特點(diǎn)，通過(guò)特異性標(biāo)記抗體與CD19抗原結(jié)合，進(jìn)行孵育并通過(guò)染色鏡檢、儀器計(jì)數(shù)等方式對(duì)標(biāo)記進(jìn)行識(shí)別，從而達(dá)到定性或定量檢測(cè)的目的。流式細(xì)胞術(shù)可檢測(cè)全體B細(xì)胞及毛細(xì)胞白血病細(xì)胞上的CD19，免疫組織染色法可檢測(cè)全體B細(xì)胞及濾泡樹(shù)狀細(xì)胞上的CD19。其他方法有免疫熒光染色、免疫金銀染色等。
CD19是分子量為95kDa的糖蛋白，表達(dá)于前B細(xì)胞和成熟的B細(xì)胞膜表面，與B細(xì)胞的活化調(diào)節(jié)和發(fā)育調(diào)節(jié)相關(guān)，在T細(xì)胞和正常的粒細(xì)胞上無(wú)表達(dá)。此抗體主要標(biāo)記正常B細(xì)胞和腫瘤性B細(xì)胞。
CD19是參與B細(xì)胞活化與增殖的重要膜抗原之一，是所有B細(xì)胞共有的表面標(biāo)志，B細(xì)胞活化后不消失，是最重要的B細(xì)胞標(biāo)記因子，同時(shí)CD19也是B細(xì)胞表面的傳達(dá)信號(hào)復(fù)合體的構(gòu)成部分，CD19的細(xì)胞外部分同其他膜抗原結(jié)合進(jìn)行信號(hào)傳導(dǎo)。
CD19陽(yáng)性細(xì)胞升高見(jiàn)于B淋巴細(xì)胞系統(tǒng)的惡性腫瘤，如CD19在95%急性前B淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞和94%急性成熟B淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞表達(dá)，也見(jiàn)于慢性淋巴細(xì)胞性白血病和Burkitt淋巴瘤等；CD19陽(yáng)性細(xì)胞降低見(jiàn)于體液免疫缺陷病，如無(wú)丙種球蛋白血癥、長(zhǎng)期使用免疫抑制劑者等。
故CD19檢測(cè)可對(duì)上述疾病進(jìn)行明確的病因診斷，并為鑒別診斷提供依據(jù)。此外由于CD19廣泛存在于B淋巴細(xì)胞系統(tǒng)惡性腫瘤細(xì)胞表面，故可在白血病及淋巴瘤的免疫療法中作為細(xì)胞表面的靶點(diǎn)。
應(yīng)用[4][5]
用于CD19~+CD24~(hi)CD38~(hi)Breg在PBC患者外周血中表達(dá)及對(duì)Th1細(xì)胞分化影響的研究
觀察CD19+CD24hiCD38hiBreg在PBC患者外周血中的表達(dá)情況。分析該群細(xì)胞與疾病的相關(guān)性,并初步探討PBC外周血中CD19+CD24hiCD38hiBreg對(duì)輔助性T細(xì)胞1(T helper cell 1,Thl)、輔助性T細(xì)胞17(T helper cell 17,Th17)細(xì)胞分化的影響,為PBC免疫機(jī)制的研究及未來(lái)治療策略的開(kāi)發(fā)提供新的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
方法：1.采集PBC患者組與健康對(duì)照組(HC)的EDTA抗凝血,密度梯度離心法提取外周血單個(gè)核細(xì)胞(Peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),流式細(xì)胞儀檢測(cè)CD19+B細(xì)胞以及CD19+CD24hiCD38hiBreg在CD19+細(xì)胞的表達(dá)頻率。比較上述兩者在PBC患者與正常人中的變化情況。
2. 采集PBC患者組血清,用Modular PPT生化分析儀檢測(cè)患者的ADA、ALT、AST、GGT、ALP、TBIL、DBIL、IBIL、TBA等肝功相關(guān)指標(biāo),分析其與CD19+CD24hiCD38hiBreg的相關(guān)性。
3. 流式細(xì)胞儀檢測(cè)HC組中Thl、Th17細(xì)胞的頻率,分別與HC組的CD19+CD24hiCD38hiBreg進(jìn)行相關(guān)性分析,初步分析HC組中Thl、Th17細(xì)胞的頻率與CD19+CD24hiCD38hiBreg的潛在關(guān)系。
4.流式細(xì)胞儀檢測(cè)PBC組中Thl、Th17細(xì)胞的頻率,分別與PBC組的CD19+CD24hiCD38hiBreg進(jìn)行相關(guān)性分析,初步分析PBC組中Th1、Th17細(xì)胞的頻率與CD19+CD24hiCD38hiBreg的潛在關(guān)系。
參考文獻(xiàn)
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