背景[1-3]
Anti-alpha Tubulin抗體是以大腸桿菌內(nèi)重組表達(dá)的人源Alpha-Tubulin蛋白（C末端1-323氨基酸殘基）為抗原的多克隆抗體，可以特異性結(jié)合Anti-alpha Tubulin。Anti-alpha Tubulin主要用于ICC/IF,Dotblot,ELISA,IHC-P,IHC-Fr,Immunomicroscopy,WB等alpha Tubulin檢測(cè)實(shí)驗(yàn)。
抗原與抗體能夠特異性結(jié)合是基于抗原決定簇（表位）和抗體超變區(qū)分子間的結(jié)構(gòu)互補(bǔ)性與親和性。這種特性是由抗原、抗體分子空間構(gòu)型所決定的。除兩者分子構(gòu)型高度互補(bǔ)外，抗原表位和抗體超變區(qū)必須密切接觸，才有足夠的結(jié)合力。
抗原抗體反應(yīng)可分為兩個(gè)階段：階段為抗原與抗體發(fā)生特異性結(jié)合的階段，此階段反應(yīng)快，僅需幾秒至幾分鐘，但不出現(xiàn)可見(jiàn)反應(yīng)；
第二階段為可見(jiàn)反應(yīng)階段，這一階段抗原抗體復(fù)合物在適當(dāng)溫度、pH、電解質(zhì)和補(bǔ)體影響下，出現(xiàn)沉淀、凝集、細(xì)胞溶解、補(bǔ)體結(jié)合介導(dǎo)的肉眼可見(jiàn)的反應(yīng)，此階段反應(yīng)慢，往往需要數(shù)分鐘至數(shù)小時(shí)。在血清學(xué)反應(yīng)中，以上兩階段往往不能?chē)?yán)格分開(kāi)，往往受反應(yīng)條件（如溫度、pH、電解質(zhì)、抗原抗體比例等）的影響。
Tubulin即微管蛋白，是細(xì)胞的一種骨架蛋白。Tubulin分為α、β、γ、δ、ε等多種tubulin，其中Alpha Tubulin和Beta Tubulin可以形成異源二聚體，是形成微管的最主要的兩種Tubulin。Alpha tubulin和Beta tubulin分子量分別為55kDa和50kDa，其實(shí)際檢測(cè)條帶均在55kDa左右。作為內(nèi)參，Beta tubulin的蛋白水平通常不會(huì)發(fā)生改變，因此被廣泛用于Western Bloting時(shí)上樣量是否一致的參照，也常被用于免疫染色觀察細(xì)胞的微管結(jié)構(gòu)。
應(yīng)用[4][5]
用于TopoⅡα和β微管蛋白Ⅲ的表達(dá)與乳腺癌新輔助化療療效的初步研究
探索乳腺癌組織中TopoⅡα和β微管蛋白Ⅲ基本表達(dá)規(guī)律,分析其表達(dá)與新輔助化療療效的關(guān)系,探討TopoⅡα和β微管蛋白Ⅲ是否分別與蒽環(huán)類(lèi)和紫杉類(lèi)藥物耐藥相關(guān),評(píng)價(jià)二者的檢測(cè)是否可以作為制定乳腺癌個(gè)體化化療方案的預(yù)測(cè)指標(biāo)。
方法選取64例女性原發(fā)性乳腺癌患者,隨機(jī)接受蒽環(huán)類(lèi)+環(huán)磷酰胺或紫杉類(lèi)+環(huán)磷酰胺或蒽環(huán)類(lèi)+紫杉類(lèi)+環(huán)磷酰胺的新輔助化療3-4周期后評(píng)價(jià)化療療效。采用免疫組化的方法,檢測(cè)化療前空心針穿刺組織標(biāo)本中癌細(xì)胞TopoⅡα和β微管蛋白Ⅲ的表達(dá),了解它們的表達(dá)與新輔助化療療效的關(guān)系,探討二者是否分別與蒽環(huán)類(lèi)和紫杉類(lèi)藥物耐藥相關(guān)。SPSS17.0系統(tǒng)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
結(jié)果1.在本研究人群中,TopoⅡα陽(yáng)性表達(dá)率為59.38%。β微管蛋白Ⅲ陽(yáng)性表達(dá)率為64.06%。
2. TopoⅡα的表達(dá)與臨床分期、新輔助化療后術(shù)后腋窩淋巴結(jié)的數(shù)目、ER、PgR、HER2和Ki67之間無(wú)相關(guān)性。β微管蛋白Ⅲ的表達(dá)與新輔助化療后術(shù)后腋窩淋巴結(jié)的數(shù)目、ER、HER2和Ki67之間無(wú)相關(guān)性,與臨床分期表達(dá)呈正相關(guān),與孕激素受體的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。
3.蒽環(huán)類(lèi)化療藥物的化療療效與TopoⅡα的表達(dá)情況相關(guān)。TopoⅡα表達(dá)為陽(yáng)性的患者在使用蒽環(huán)類(lèi)藥物化療時(shí)能獲得更好的化療療效。在HER2過(guò)表達(dá)的患者中,HER2和TopoⅡα共表達(dá)者接受蒽環(huán)類(lèi)藥物化療的療效更好。4.紫杉類(lèi)化療藥物的化療療效與p微管蛋白Ⅲ的表達(dá)間未發(fā)現(xiàn)相關(guān)性。
參考文獻(xiàn)
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[5]戴旭.TopoⅡα和β微管蛋白Ⅲ的表達(dá)與乳腺癌新輔助化療療效的初步研究[D].中南大學(xué),2012.