背景[1-3]
ANTI-IL-12抗體是一類可以特異性結(jié)合ANTI-IGE的多克隆抗體，主要用于檢測ANTI-IGE的Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等多種免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)。
檢測原理：雙抗體夾心法測定標(biāo)本中ANTI-IGE水平。用純化的ANTI-IGE抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入ANTI-IGE，再與HRP標(biāo)記的ANTI-IGE抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的ANTI-IGE呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中ANTI-IGE濃度。
白細(xì)胞介素-12是趨化因子家族的一種細(xì)胞因子，目前共發(fā)現(xiàn)了38個(gè)白細(xì)胞介素，分別命名為IL-1---IL38.功能復(fù)雜，成網(wǎng)絡(luò)，復(fù)雜重疊。
白細(xì)胞介素(interleukin,IL)12,由抗原提呈細(xì)胞和B細(xì)胞產(chǎn)生，是一種異源二聚體形式的前炎癥細(xì)胞因子，并以這種形式分泌到細(xì)胞外。IL-12能誘導(dǎo)IFN-γ產(chǎn)生，在體內(nèi)免疫應(yīng)答中（特別是在細(xì)菌或寄生蟲感染中）它也是IFN-γ產(chǎn)生所必需。
來自活化淋巴細(xì)胞，由IL-12A(p35)和IL-12B(p40)亞基組成，二者分別與IL-6Rα鏈和IL-6同源。是NK細(xì)胞激活因子，能促進(jìn)CD4+Th0細(xì)胞分化為Th1細(xì)胞，協(xié)同亞劑量IL-2，可誘導(dǎo)LAK細(xì)胞活性。
細(xì)胞來源：IL-12主要由b細(xì)胞和巨噬細(xì)胞產(chǎn)生；其分子是一種異型二聚體，40kd（p40）和35kd(p35)的2個(gè)亞基通過二硫鍵相連接。IL-12主要作用于t細(xì)胞和nk細(xì)胞，曾被命名為毒性淋巴細(xì)胞成熟因子（CLMF）和NK細(xì)胞刺激因子（NKSF）。
應(yīng)用[4][5]
用于康復(fù)新聯(lián)合5-ASA對潰瘍性結(jié)腸炎大鼠結(jié)腸黏膜IFN-γ、IL-4、IL-12表達(dá)的影響研究
觀察康復(fù)新對大鼠結(jié)腸黏膜組織中IFN-γ、IL-4及IL-12表達(dá)的影響，探討康復(fù)新、5-ASA及兩者聯(lián)合用藥對治療大鼠UC的療效。
方法：按照隨機(jī)原則，將50只SD大鼠隨機(jī)抽取10只作為正常對照組，余40只大鼠采用2,4,6-三硝基苯磺酸（2,4,6-TNBS)造模法制備UC大鼠模型，4只大鼠于造模過程中死亡，剩余的36只大鼠再次按照隨機(jī)原則分為4組，分別為模型組，5-ASA組，康復(fù)新組，康復(fù)新與5-ASA聯(lián)合用藥組，給予2,4,6-TNBS造成模后，正常對照組以及模型組大鼠分別給予生理鹽水進(jìn)行(1ml/200g體重)灌腸；5-ASA組：5-ASA以(1ml/200g體重)的量進(jìn)行灌腸；
康復(fù)新組：以康復(fù)新液(1ml/200g體重)進(jìn)行灌腸；康復(fù)新+5-ASA組：以5-ASA(1ml/200g體重)的量灌腸（上午8時(shí)）和以康復(fù)新(1ml/200g體重)的量灌腸（下午4時(shí)），每天給予灌腸1次，共7天。每天記錄大鼠的一般情況，包括腹瀉、便血及體重改變等情況，用藥21天后，各組大鼠用2%戊巴比妥0.2ml/100g體重腹腔注射麻醉，腹正中切口，取血和結(jié)腸黏膜組織備用。
采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測大鼠血清中IFN-γ、IL-4、IL-12的水平、采用免疫組織化學(xué)法檢測大鼠結(jié)腸黏膜中IFN-γ、IL-4、IL-12的表達(dá)、實(shí)時(shí)熒光定量PCR（RT-PCR)檢測結(jié)腸黏膜中IFN-γ、IL-4、IL-12mRNA的表達(dá)。
結(jié)果:與模型組相比，康復(fù)新、5-ASA、聯(lián)合治療組大鼠血清中IL-12、IFN-γ的表達(dá)降低(P<0.01)，IL-4的表達(dá)升高(P<0.01)；與康復(fù)新組和5-ASA組相比，聯(lián)合治療組大鼠血清中IL-12和IFN-γ的水平表達(dá)明顯下降(P<0.01)，而IL-4的表達(dá)水平明顯升高(P<0.01)?？祻?fù)新組與5-ASA組比較無顯著差異(P>0.05)。
參考文獻(xiàn)
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[5]郭艷娥.康復(fù)新聯(lián)合5-ASA對潰瘍性結(jié)腸炎大鼠結(jié)腸黏膜IFN-γ、IL-4、IL-12表達(dá)的影響[D].山西醫(yī)科大學(xué),2014.