61970-00-1
中文名稱
熒光素酶
英文名稱
LUCIFERASE
CAS
61970-00-1
更新日期
2024/12/12 11:08:40
基本信息
中文別名
熒光素酶重組型酵素
重組熒光素酶
熒光素酶(螢火蟲)
熒光素酶單克隆抗體
熒光素酶 來源于螢火蟲
熒光素酶 *重組熒光素*
熒光素酶 來源于螢火蟲,凍干粉
熒光素酶,北美產(chǎn)螢火蟲(螢火蟲)
15-30×106光單位/毫克蛋白
英文別名
RFLucUltra-Glo
LUCIFERASE
EC 1.14.14.3
EC 1.13.12.7
Luciferase from
Einecs 263-359-4
Beetle luciferase
LUCIFERASE FIREFLY
FIREFLY LUCIFERASE
所屬類別
生物：常用酶安全數(shù)據(jù)
常見問題列表
概述
生物發(fā)光(Bioluminescence)是在自然界廣泛存在的、有生命的生物產(chǎn)生的一種發(fā)光現(xiàn)象.發(fā)光的生物種類很多，包括發(fā)光細(xì)菌、發(fā)光螢火蟲、發(fā)光魚、發(fā)光海星、發(fā)光甲蟲等.而能催化熒光素或脂肪醛氧化產(chǎn)生生物發(fā)光的一類酶即為熒光素酶(Luciferase).從20世紀(jì)50年代就已經(jīng)開始了對(duì)熒光素酶的研究.從1986年第一個(gè)成功地獲得表達(dá)螢火蟲熒光素酶基因(luc基因)的轉(zhuǎn)基因煙草以來，熒光素酶的應(yīng)用和發(fā)展進(jìn)入了一個(gè)嶄新的時(shí)代.應(yīng)用熒光素酶大大增加了生物發(fā)光免疫分析技術(shù)(BLIA)的靈敏度和應(yīng)用范圍，并且由于具有敏感性高，特異性好，反應(yīng)迅速，操作簡(jiǎn)單，應(yīng)用范圍廣等優(yōu)點(diǎn)，已成為醫(yī)學(xué)、生物學(xué)、環(huán)境科學(xué)等研究領(lǐng)域中一種新的手段。種類
自然界中具有發(fā)光能力的生物種類很多，常見的主要有：發(fā)光蘑菇(Luminousmushrooms)、發(fā)光蚯蚓(Luminousearthworms、發(fā)光細(xì)菌(Luminousbacteria)、發(fā)光水母(Luminousjellyfish)、發(fā)光甲蟲(Luminousbeetles，它們主要由螢火蟲(fireflies)，叩頭蟲(clickbeetles)和歐洲螢(glowworms)3大種類組成)。目前，除發(fā)光蘑菇和發(fā)光蚯蚓的發(fā)光機(jī)理尚不清楚外，其余生物的發(fā)光機(jī)理已研究得較為透徹，并使細(xì)菌熒光素酶(BacterialLuciferase簡(jiǎn)稱BL)和螢火蟲熒光素酶(FireflyLuciferase簡(jiǎn)稱FL)形成商品酶用于分析檢測(cè)。應(yīng)用
熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)也可以作為細(xì)菌熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)的一個(gè)替代，特別是對(duì)監(jiān)測(cè)環(huán)境應(yīng)激具有重要意義.由于應(yīng)用熒光素酶的成本低、應(yīng)用范圍廣，所以被廣泛應(yīng)用于檢測(cè)某些特殊細(xì)菌、厭氧微生物，監(jiān)控生長(zhǎng)緩慢的微生物，用于食品、飲料、自來水、化妝品、藥物檢測(cè)，河流水質(zhì)、大氣環(huán)境的監(jiān)測(cè)。制備
作為FL生產(chǎn)原料的螢火蟲，要依靠人工捕捉或養(yǎng)殖，受地域和季節(jié)性限制，且該生物生產(chǎn)周期長(zhǎng)、養(yǎng)殖成本高、提取的酶成分復(fù)雜，隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，人們轉(zhuǎn)向用基因工程的方法進(jìn)行生產(chǎn)。1985年，deWet，J.R.等首次克隆了P.Pyralis的FL基因，并在大腸桿菌(Escherichiacoli)中表達(dá)，從中得到具有活性的FL。1986
年，他們測(cè)定了FL基因的cDNA序列。隨后，各種發(fā)光甲蟲的FL基因相繼克隆成功，并能在原核和真核表達(dá)系統(tǒng)中表達(dá)。取自P.Pyralis長(zhǎng)約1.8kb的cDNA基因在E.coli表達(dá)的產(chǎn)物是分子量為62kD，含550個(gè)氨基酸的多肽鏈，與自然提取得到的FL相比，具有同樣的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)特性和發(fā)射波長(zhǎng)，在相同的反應(yīng)條件下酶的穩(wěn)定性亦無差異。螢火蟲熒光素酶基因通過克隆在E.coli表達(dá)，轉(zhuǎn)化體在37℃、LB培養(yǎng)基中生長(zhǎng)到對(duì)數(shù)后期收集菌體，用滲透壓法、凍融法提取細(xì)菌胞質(zhì)組分，經(jīng)均質(zhì)、離心，用凝膠排阻、離子交換色譜提取純酶，冷凍干燥保存。BL可從培養(yǎng)發(fā)光細(xì)菌直接提取得到，其制備方法與FL類似。從V.harveyi中提取的酶活可達(dá)1.8×1011LU/mg，為獲得特殊用途的BL，亦可通過誘變或基因克隆得到。各種發(fā)光細(xì)菌的基因克隆均有許多報(bào)道。生物活性
Luciferase, firefly 是一種發(fā)光酶，負(fù)責(zé)螢火蟲和磕頭蟲的生物發(fā)光。體外研究
Firefly luciferase is the light-emitting enzyme responsible for the bioluminescence of fireflies and click beetles. The enzyme catalyses the oxidation of firefly luciferin, requiring oxygen and ATP. Because of the requirement of ATP, firefly luciferases have been used extensively in biotechnology.