"HEK293S Cell|人胚腎細胞

細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細胞和分化征。傳代細胞形成細胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗。【操作步驟】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質回縮、細胞間隙增大后，應立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握HAO細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導致細胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當消化液濃度過GAO時，消化時間應縮短，過低時細胞消化時間相對延長。

細胞生長：貼壁

IEC18細胞類似產(chǎn)品：：MB231細胞、SU-DHL1細胞、QBC-939細胞

HEK-293A細胞類似產(chǎn)品：：ECV-304細胞、HPDEC細胞、TK-1細胞

MIHA細胞類似產(chǎn)品：：HCS-2/8細胞、AML-EOL-1細胞、NCIH1693細胞

SF-539 BT細胞類似產(chǎn)品：：SCL1細胞、IMCD3細胞、HEI-193細胞

MDCC-MSB1細胞類似產(chǎn)品：：RS4:11細胞、HCC44細胞、SGC7901/DDP細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

HEK293S Cell|人胚腎細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

懸浮細胞不容易轉染：懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉染，其和貼壁細胞轉染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質體類的轉染試劑，脂質體轉染是基于電荷吸引原理，先形成脂質體-DNA復合物，散布在細胞周圍，然后通過細胞的內(nèi)吞作用，將目的基因導入細胞內(nèi)，而脂質體復合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞GAO出很多倍，所以，脂質體轉染時懸浮細胞的轉染效率要明顯低于貼壁細胞。其次，脂質體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細胞的轉染更為困難了。另外，懸浮細胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細胞轉染造成了一定的困難。為了提GAO懸浮細胞的轉染效率，可以使用非脂質體的轉染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉染方法，針對懸浮細胞等難轉染細胞還是挺不錯的，電擊對細胞有一定的損傷，ZuiHAO選用具有細胞膜修復功能的電轉染試劑，可以將電擊對細胞的傷害降到Zui低，懸浮細胞不易轉染，選對試劑及良HAO的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關鍵。

TE4細胞類似產(chǎn)品：：RKO_AS45細胞、SNB-19細胞、BrCL18細胞

Hs-688A-T細胞類似產(chǎn)品：：LNCaP.FGC細胞、ANA1細胞、HTR-8/SV-neo細胞

J774.A1細胞類似產(chǎn)品：：DMS114細胞、UMR 106細胞、RGC-6細胞

PTK 1細胞類似產(chǎn)品：：Medical Research Council cell strain-9細胞、SKRC-42細胞、SHI-1細胞

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

TE4細胞類似產(chǎn)品：：RKO_AS45細胞、SNB-19細胞、BrCL18細胞

Hs-688A-T細胞類似產(chǎn)品：：LNCaP.FGC細胞、ANA1細胞、HTR-8/SV-neo細胞

J774.A1細胞類似產(chǎn)品：：DMS114細胞、UMR 106細胞、RGC-6細胞

PTK 1細胞類似產(chǎn)品：：Medical Research Council cell strain-9細胞、SKRC-42細胞、SHI-1細胞

細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分

細胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細胞系。嚙齒類動物細胞在分離時核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細胞在這個階段死亡了，但少數(shù)細胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細胞系。目前認為永生化是一個多步驟的過程，包括一系列細胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個方向進行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導永生化。這個基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結合。這樣不僅使細胞增殖的壽命得以延長，同時也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進一步突變的機會(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動子的端粒酶基因進行轉染，足以形成永生化細胞。這些基因中已被廣泛應用的有：EBV用于淋巴母細胞樣細胞；SV40 LT用于黏附細胞，如成纖維細胞(Mayne et al., 1996)、 角質形成細胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質干細胞和其他一些細胞。

HT55細胞類似產(chǎn)品：：SUM 159PT細胞、UM-UC-14細胞、ML-2細胞

WPMY-1細胞類似產(chǎn)品：：8226細胞、K7M2-WT細胞、VM Cub 1細胞

MILE SVEN1細胞類似產(chǎn)品：：3T3-A31細胞、HuH7細胞、IFRS1細胞

OVCA8細胞類似產(chǎn)品：：GM03320細胞、RCC-10細胞、hA549細胞

CD 18細胞類似產(chǎn)品：：KU1919細胞、Earle's L cells細胞、HR-8348細胞

MDA-MB 231細胞類似產(chǎn)品：：HCT 116細胞、UM-UC-1細胞、HCC1806細胞

OVCAR10細胞類似產(chǎn)品：：U 937細胞、LS-180細胞、SAOS 2細胞

ARPE-19細胞類似產(chǎn)品：：CoCL3細胞、TMK-1細胞、MDA 1386細胞

GM07404A細胞類似產(chǎn)品：：SNU407細胞、HTori-3細胞、CTLL(2)細胞

Neuro2a細胞類似產(chǎn)品：：DKMG細胞、IPAM-WT細胞、H-1651細胞

HEK293S Cell|人胚腎細胞

DBTRG-05MG細胞類似產(chǎn)品：：EBTr細胞、HB611細胞、NCI-SNU-216細胞

RPMI 1788細胞類似產(chǎn)品：：Ca Ski細胞、BIU-87/Adr細胞、GM637A細胞

NTERA-2/D1細胞類似產(chǎn)品：：RM-1細胞、H-520細胞、MAVER-1細胞

MDA-MB 468細胞類似產(chǎn)品：：U373細胞、SKMEL5細胞、ARPE19細胞

NRK 49F細胞類似產(chǎn)品：：MCA205細胞、YAC-1細胞、T-CAM2細胞

624-mel細胞類似產(chǎn)品：：HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞、aNK細胞、NUGC-2細胞

624-mel細胞類似產(chǎn)品：：HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞、aNK細胞、NUGC-2細胞

GA-10-Clone-4細胞類似產(chǎn)品：：MGH-U3細胞、NCIH2135細胞、SKLMS-1細胞

32D:cl3細胞類似產(chǎn)品：：Farage OL細胞、LS174細胞、HepG2/C3A細胞

B-95-8細胞類似產(chǎn)品：：L-cell細胞、CAMA細胞、KTC-1細胞

624細胞類似產(chǎn)品：：MCMEC細胞、D10.G4.1細胞、CMT 64細胞

AN3 CA細胞類似產(chǎn)品：：BV-2細胞、Ishikawa細胞、COLO 679細胞

Hs940.T細胞類似產(chǎn)品：：293 HEK細胞、UMNSAH-DF 1細胞、IGROV細胞

XuanWei Lung Cancer-05細胞類似產(chǎn)品：：GM 2132細胞、MFE 280細胞、R D細胞

HS-294T細胞類似產(chǎn)品：：HF-91細胞、Hep 2細胞、LIXC002細胞

U2932細胞類似產(chǎn)品：：RL95細胞、Rat-1細胞、HUT-226細胞

MA-104細胞類似產(chǎn)品：：Rin-M-5F細胞、RT4-D6P2T細胞、UMR106細胞

PA-1細胞類似產(chǎn)品：：Becker細胞、NUGC-2細胞、NCIH1819細胞

MIHA細胞類似產(chǎn)品：：HCS-2/8細胞、NPC-039細胞、PaTu8988s細胞

RD 2細胞類似產(chǎn)品：：SACCLM細胞、PANC-10-05細胞、COLO-HSR細胞

LS 180細胞類似產(chǎn)品：：HT-1080細胞、MODE-K細胞、H-661細胞

EU-2細胞類似產(chǎn)品：：TE-11細胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細胞、NCI-H1404細胞

BV2細胞類似產(chǎn)品：：KYSE 520細胞、HCC-2108細胞、SKG3A細胞

MDCK (NBL-2)細胞類似產(chǎn)品：：KMS-26細胞、As-PC1細胞、NCI-H69C細胞

BC-025細胞類似產(chǎn)品：：Ramos G6.C10細胞、Human Microglia Clone 3細胞、NCI-H748細胞

NOR10細胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-387細胞、SL-29細胞、UM-UC14細胞

NCI-H810細胞類似產(chǎn)品：：ACHN細胞、JB6 Cl 30-7b細胞、H2228細胞

EB-1細胞類似產(chǎn)品：：SUP-M2細胞、CTLA4 Ig-24細胞、SUD6細胞

U-373MG ATCC細胞類似產(chǎn)品：：IPLB-Sf21-AE細胞、A2780-CP細胞、HK-2 [Human kidney]細胞

HEK293S Cell|人胚腎細胞

UACC 812細胞類似產(chǎn)品：：RL-952細胞、VMM5細胞、Tu212細胞

Tn-5B1-4細胞類似產(chǎn)品：：OSC-19細胞、MNNG-HOS細胞、HL-60 Clone 15細胞

LICCF細胞類似產(chǎn)品：：Emory University-3細胞、DB細胞、EJ1細胞

H1975細胞類似產(chǎn)品：：GM0637細胞、Spodoptera frugiperda clone 9細胞、Human Epidermoid carcinoma #2細胞

HS-445細胞類似產(chǎn)品：：PC.3細胞、HLE-SRA-01/04細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞

GM00637F細胞類似產(chǎn)品：：TMD-8細胞、H766T細胞、X63-Ag8細胞

SK UT 1細胞類似產(chǎn)品：：SNU216細胞、HD11細胞、MN60細胞

GP-293細胞類似產(chǎn)品：：Mo7e細胞、NCI-522細胞、LCMS細胞

Anip973細胞類似產(chǎn)品：：WI-38細胞、COLO-320-DM細胞、MDCKII細胞

HSF細胞類似產(chǎn)品：：C3H10T1/2 clone8細胞、MGECs細胞、NCIH2106細胞

KAT-5細胞類似產(chǎn)品：：NCIH2030細胞、NCIH1993細胞、CMT93細胞

MDAMB-231細胞類似產(chǎn)品：：KTCTL140細胞、SUM 149PT細胞、PC3-M細胞

CHO K1細胞類似產(chǎn)品：：CAL 78細胞、NCIH1623細胞、NCI-H82細胞

STTG1細胞類似產(chǎn)品：：QGY 7701細胞、LNCaP-Clone-FGC細胞、SKRC20細胞

J 774A.1細胞類似產(chǎn)品：：Panc4.03細胞、SKCol1細胞、KBM-5細胞

DOK細胞類似產(chǎn)品：：GM12878細胞、Nthy ori 3.1細胞、NB-19細胞

M14細胞類似產(chǎn)品：：SK MEL-28細胞、T1-73細胞、Douglas Foster-1細胞

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