"HCC1008 Cell|人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

解凍細(xì)胞常見(jiàn)實(shí)驗(yàn)問(wèn)題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)會(huì)出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長(zhǎng)緩慢等問(wèn)題，究竟是什么原因?qū)е拢覀冊(cè)撛趺催M(jìn)行解決？以下是國(guó)內(nèi)外細(xì)胞培養(yǎng)專家針對(duì)解凍細(xì)胞實(shí)驗(yàn)問(wèn)題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過(guò)程中細(xì)胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡，因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠GAO，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細(xì)胞/毫升；２)解凍過(guò)程中的問(wèn)題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時(shí)間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開(kāi)始培養(yǎng)；３)對(duì)冷凍液過(guò)敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時(shí)后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時(shí)間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時(shí)細(xì)胞需要幾周時(shí)間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時(shí)細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長(zhǎng)階段中的位置。冷凍的Zui佳條件在對(duì)數(shù)期；４)被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時(shí)培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍Zui近冷凍的細(xì)胞。細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時(shí)間越長(zhǎng)，存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時(shí)間和方法。在冷凍時(shí)細(xì)胞應(yīng)處于對(duì)數(shù)期。

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

RM-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ChaGo K-1細(xì)胞、HOP-92細(xì)胞、159PT細(xì)胞

SW-1116細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CL1細(xì)胞、NCIH2066細(xì)胞、CF Pac1細(xì)胞

NPC-TW-039細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDAMB231細(xì)胞、NCI.H23細(xì)胞、HCC1833細(xì)胞

Okayama University Medical School-23細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OC-316細(xì)胞、C 6細(xì)胞、L6565細(xì)胞

HUVEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Rat Fetal Lung-6細(xì)胞、C-4 I細(xì)胞、T241細(xì)胞

細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源

HCC1008 Cell|人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)分布不均勻，通常操作步驟：做細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，細(xì)胞鋪板大概是我們Zui常見(jiàn)的一個(gè)實(shí)驗(yàn)。但有時(shí)候鋪得不是很均勻：要么中間密周圍稀，要么周圍密中間禿。下面為大家分享幾點(diǎn)經(jīng)驗(yàn)。盡量消化細(xì)胞分散成單細(xì)胞懸液。對(duì)于易于消化的細(xì)胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶潤(rùn)洗一遍（25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板），棄掉胰酶，37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右，鏡下觀察是否細(xì)胞消化較為分散。如果不夠，延長(zhǎng)消化時(shí)間。96孔板一般以100微升每孔接種，直接用100微升移液器吸取細(xì)胞懸液，沿孔壁（稍離開(kāi)一點(diǎn)孔底即可，不要離底太GAO）直接接入，移液器不需完全打到Zui大，輕輕按下即可，每鋪完一行換一次槍頭同時(shí)輕輕混勻細(xì)胞懸液。都加完后蓋上蓋子，左手輕輕扶住板的左邊，右手輕輕敲擊板的右邊緣，注意把握力度（我一般輕巧敲三下），太強(qiáng)或次數(shù)太多會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞集中成堆，將板順時(shí)針旋轉(zhuǎn)（逆時(shí)針效果不HAO），依次敲擊剩余三個(gè)邊，靜置約5分鐘，放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板，可采用將每個(gè)孔加入少量無(wú)血清培養(yǎng)基，晃動(dòng)浸潤(rùn)整個(gè)孔底，然后用移液槍吸至第二孔，同樣方法浸潤(rùn)孔底，其它孔依此類推，這樣整個(gè)孔底都是濕潤(rùn)的，細(xì)胞懸液會(huì)平鋪在整個(gè)孔底，注意加完細(xì)胞懸液后要放工作臺(tái)靜置一下。這個(gè)方法就是有點(diǎn)慢，但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式，但力度沒(méi)有96孔板HAO掌握，效果沒(méi)有96孔板HAO。培養(yǎng)瓶里面加HAO細(xì)胞以后(比如傳代HAO/分HAO細(xì)胞以后)，先順時(shí)針搖晃3次，馬上逆時(shí)針搖晃3次。然后延X(jué)軸Y軸分別水平搖動(dòng)3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復(fù)延X(jué)軸Y軸分別水平搖動(dòng)3次。

NCI-SNU-886細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SJSA-1細(xì)胞、MGC-803細(xì)胞、R 2 C細(xì)胞

EFM192C細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C3H/10T1/2-clone8細(xì)胞、LS411N細(xì)胞、H3255_DA細(xì)胞

NPC-TW-039細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDAMB231細(xì)胞、OV433細(xì)胞、LWnt3A細(xì)胞

Shadyside Hospital Pittsburgh-77細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H9c2 (2-1)細(xì)胞、R1800[RA]細(xì)胞、M059K細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：來(lái)源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫(kù)

NCI-SNU-886細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SJSA-1細(xì)胞、MGC-803細(xì)胞、R 2 C細(xì)胞

EFM192C細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C3H/10T1/2-clone8細(xì)胞、LS411N細(xì)胞、H3255_DA細(xì)胞

NPC-TW-039細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDAMB231細(xì)胞、OV433細(xì)胞、LWnt3A細(xì)胞

Shadyside Hospital Pittsburgh-77細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H9c2 (2-1)細(xì)胞、R1800[RA]細(xì)胞、M059K細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來(lái)自嚙齒類或來(lái)自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無(wú)限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動(dòng)物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來(lái)，并擁有了更GAO的生長(zhǎng)率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過(guò)程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長(zhǎng)，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(huì)(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動(dòng)子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

HCC0015細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COV434細(xì)胞、IBMF-7細(xì)胞、IMCD-3細(xì)胞

IPEC-J2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NT2細(xì)胞、Det. 562細(xì)胞、ACC-M細(xì)胞

HT-29/CX-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：231-luc細(xì)胞、PC-3/M細(xì)胞、HL60細(xì)胞

MCF-7B細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Jurkat E6.1細(xì)胞、TFK-1細(xì)胞、NCIH1703細(xì)胞

D-341細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NHA細(xì)胞、COLO684細(xì)胞、BE2-M17細(xì)胞

NGEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Duke University 145細(xì)胞、TCam-2細(xì)胞、SF-763細(xì)胞

22Rv1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDA.MB.231細(xì)胞、GM04680細(xì)胞、UT-7細(xì)胞

TPC1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TE-4細(xì)胞、Mono Mac 1細(xì)胞、U-373MG細(xì)胞

GLC-82細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C2C12細(xì)胞、NCI-H292細(xì)胞、1E8-H細(xì)胞

H7721細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OCI-Ly 18細(xì)胞、NCIH2073細(xì)胞、PY8119細(xì)胞

HCC1008 Cell|人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞

HG2855細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P116細(xì)胞、H-735細(xì)胞、MLE-12細(xì)胞

Vero 76 clone E-6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK HEP 01細(xì)胞、JEKO細(xì)胞、SKNSH細(xì)胞

P19細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KYSE140細(xì)胞、LN-18細(xì)胞、L 363細(xì)胞

GA-10 (Clone 4)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：JM細(xì)胞、CEM細(xì)胞、KMY1022細(xì)胞

SK-RC 52細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BLO11細(xì)胞、McCoy細(xì)胞、Vertebral Cancer of the Prostate細(xì)胞

NCI-H2347細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KATO III細(xì)胞、32D/cl3細(xì)胞、KAT-5細(xì)胞

NCI-H2347細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KATO III細(xì)胞、32D/cl3細(xì)胞、KAT-5細(xì)胞

EFO27細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH2171細(xì)胞、H1417細(xì)胞、Balb/c 3T3細(xì)胞

SF 126細(xì)胞類似產(chǎn)品：：B16/BL6細(xì)胞、BSC-1細(xì)胞、SUM102細(xì)胞

GM03569D細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MSTO-211H細(xì)胞、MDA MB 175 VII細(xì)胞、HL-60 clone15細(xì)胞

JM細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H929細(xì)胞、Pro-5WgaRI3C細(xì)胞、GM03190A細(xì)胞

NCIH1581細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-125細(xì)胞、EB-2細(xì)胞、Soleus clone 8細(xì)胞

U373細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ASPC1細(xì)胞、BIC1細(xì)胞、Y-79細(xì)胞

Giant Cell Tumor細(xì)胞類似產(chǎn)品：：L- cell細(xì)胞、NCI-H69細(xì)胞、E.L.4細(xì)胞

IR983F細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NK-92細(xì)胞、32D clone 3細(xì)胞、EL-4細(xì)胞

WiDr細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HPAF細(xì)胞、TOV-112細(xì)胞、L cell細(xì)胞

JeKo 1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HPAF-2細(xì)胞、TE-8細(xì)胞、hOMF細(xì)胞

OC 316細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SF-539 BT細(xì)胞、Nittby-Salford 1細(xì)胞、MNNG-HOS (Cl#5)細(xì)胞

MNNG-HOS (Cl#5)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P31-FUJ細(xì)胞、HCGC細(xì)胞、Hi-5細(xì)胞

RPMI7666細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MFD-1細(xì)胞、EFM192C細(xì)胞、Panc_05_04細(xì)胞

P3X63 Ag8.653細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Factor Dependent Cell-Paterson 1細(xì)胞、HHL-5細(xì)胞、MDA231-LM2-4175細(xì)胞

HBVP細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH1793細(xì)胞、Panc-8_13細(xì)胞、Reuber H35細(xì)胞

CEM C7細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NPC-TW 039細(xì)胞、A2008細(xì)胞、BeWo細(xì)胞

H1573細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HUT 125細(xì)胞、OSK-1細(xì)胞、NK-10A細(xì)胞

KTC-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RPMI 8226細(xì)胞、UMC11細(xì)胞、A 375細(xì)胞

293FT細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Panc327細(xì)胞、BC3 H1細(xì)胞、C4-2 B細(xì)胞

IEC 18細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H865細(xì)胞、alpha-TC1-6細(xì)胞、CL-40細(xì)胞

Panc02.03細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H2198細(xì)胞、U118MG細(xì)胞、UWB1-289細(xì)胞

BNL 1MEA.7R.1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CHO K1細(xì)胞、SF17細(xì)胞、NCTC 1469細(xì)胞

HCC1008 Cell|人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞

HFL-I細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Tregs細(xì)胞、HT1376細(xì)胞、H-295細(xì)胞

U266 B1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH727細(xì)胞、NHA細(xì)胞、H920細(xì)胞

HR1K細(xì)胞類似產(chǎn)品：：JB6 Cl 30-7b細(xì)胞、TM-4細(xì)胞、IB-RS2細(xì)胞

JB6 clone 30, subclone 7b細(xì)胞類似產(chǎn)品：：JB6 Cl 30細(xì)胞、RS4;11細(xì)胞、RC92A細(xì)胞

293GP細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BT.549細(xì)胞、H-23細(xì)胞、R3/1細(xì)胞

UWB1289細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A 2780 CP細(xì)胞、Panc_05_04細(xì)胞、NCIH2081細(xì)胞

HHFK細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEMCSS細(xì)胞、MDA-MB-134細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-10A細(xì)胞

MM1-S細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NR8383細(xì)胞、L-M (TK-)細(xì)胞、UMRC2細(xì)胞

MM1-S細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NR8383細(xì)胞、L-M (TK-)細(xì)胞、UMRC2細(xì)胞

M-14細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW626細(xì)胞、NIH 3T6細(xì)胞、BNL-CL.2細(xì)胞

TMD-8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：293-FT細(xì)胞、SKNBE-2細(xì)胞、CEM-0細(xì)胞

OLN-93細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SRA 01/04細(xì)胞、C3H/10T1/2細(xì)胞、NS1/1-Ag4.1細(xì)胞

NCI-SNU-449細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-330細(xì)胞、D-341Med細(xì)胞、EOC20細(xì)胞

T-HSC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNU-119細(xì)胞、Leghorn Male Hepatoma cell line細(xì)胞、ROS17/2.8細(xì)胞

BC-023細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PL5細(xì)胞、COLO320HSR細(xì)胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis細(xì)胞

YTMLC-90細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ONS76細(xì)胞、CEM.C1細(xì)胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1細(xì)胞

NCI-H774細(xì)胞類似產(chǎn)品：：UMUC14細(xì)胞、BE2_C細(xì)胞、CCC-HEL-1細(xì)胞

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