"HCC1008 Cells(贈送Str鑒定報告)|人乳腺導管癌細胞

細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

養(yǎng)了幾年細胞，說一點自己培養(yǎng)細胞方面的看法：１)培養(yǎng)細胞前，可以看看細胞點說明書，包括細胞正常生長的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等；２)不同細胞生長周期不同，有的生長很快，比如說MDA-MB-２３１，傳代的時候取離心懸液的十分之一就已經足夠了，有的又是別慢，等的人心焦，BT４７４就是，傳代是一分二，復蘇起始的時候兩周多才能長滿，所以就要在培養(yǎng)細胞的過程中多多摸索了；３)對于嬌弱的細胞，就得細心呵護了，胰酶消化不能過久，吹得時候要輕柔，離心時候也要注意轉速和時間，每天都要去看一下細胞，肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細胞生長狀況；４)凍存細胞復蘇后第二天ZuiHAO更換一次培養(yǎng)基；５)培養(yǎng)箱隔一段時間徹底用酒精棉擦洗一次；６)養(yǎng)細胞Zui大的教訓：不能偷懶!細胞虐我千百遍，我待細胞如初戀。１)不管買的細胞、惠贈的細胞，剛拿到手趕緊做兩件事：檢測是否有支原體污染; 迅速擴增凍存；２)發(fā)現有污染迅速處理掉，別是當你養(yǎng)了很多種細胞時; 細菌污染，真菌污染很容易發(fā)現，支原體污染的話，細胞會長的慢，買個支原體檢測的kit定期檢測一下；３)傳代細胞日常的值日清潔是必須的，此外還要定期熏蒸；４)細胞的傳代一定要規(guī)律，保持相同的confluency和傳代時間間隔，不要隨心所欲或者拖延；５)注意個人衛(wèi)生。

細胞生長：貼壁

LY-R細胞類似產品：：EJ1細胞、A498細胞、Colon-26細胞

H2195細胞類似產品：：NCI-SNU-449細胞、COLO679細胞、NCI H716細胞

OCIAML2細胞類似產品：：DF1細胞、Hk-2細胞、GM00637I細胞

SW948細胞類似產品：：CL1-5細胞、Ramos 2G6.4C10細胞、Hs895T細胞

Colon-26細胞類似產品：：LN 382細胞、PM6細胞、COLO 357細胞

HCC1008 Cells(贈送Str鑒定報告)|人乳腺導管癌細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

傳代的操作步驟注意事項：1)操作前要洗手，進入超凈臺后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點燃酒精燈，操作在火焰附近進行，耐熱物品要經常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時間不能太長，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。3)操作動作要準確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動，增加污染機會。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細胞傳代的操作步驟：1)吸除培養(yǎng)瓶內舊培養(yǎng)液。2)向瓶內加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許，以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘，當發(fā)現細胞質回縮，細胞間隙增大后，立即終止消化。4)吸除消化液，向瓶內注入Hanks液數毫升，輕輕轉動培養(yǎng)瓶，把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細胞時，動作要輕，以免把已松動的細胞沖掉流失，如用胰蛋白酶液單獨消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液沖洗，直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。6)計數板計數后，把細胞懸液分成等份分裝入數個培養(yǎng)瓶中，置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細胞傳代的操作步驟：1)吸出細胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

TGBC11TKB細胞類似產品：：NCIH2085細胞、NCTC-3960細胞、OVCAR-433細胞

GM05384細胞類似產品：：RWPE1細胞、MCF10-A細胞、SW403細胞

LIXC-002細胞類似產品：：B4G12細胞、MRC9細胞、M059J細胞

NCIH929細胞類似產品：：U-251MG細胞、HuCCT-1細胞、MARC145細胞

R-1059-D細胞類似產品：：DanG細胞、C41細胞、RBL-1細胞

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

HCC1008 Cells(贈送Str鑒定報告)|人乳腺導管癌細胞

細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分

GM03571細胞類似產品：：Fetal Rhesus Kidney-4細胞、HCC-1395細胞、SU86.86細胞

GT39細胞類似產品：：NCI.H460細胞、RPMI8226細胞、HCC1588細胞

Pt K2細胞類似產品：：Mouse podocyte細胞、MHCC 97-H細胞、KM12細胞

MES-SA-Dx5細胞類似產品：：CAL-39細胞、3T3細胞、38C13細胞

HCC-1143細胞類似產品：：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞、VMCUB-1細胞、M-07e細胞

TR-146細胞類似產品：：MDA-231細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞、CHO細胞

細胞凍存的步驟：１)選擇處于對數生長期的細胞，在凍存前一天ZuiHAO換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為５×１０６～１×１０７/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇；３)將分裝上述細胞懸液于２ml凍存管中，每管０.２５ml。凍存管要將蓋子蓋緊，并標記HAO細胞名稱和凍存日期，同時作HAO登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數)；４)將裝HAO細胞的凍存管放到凍存盒中，-８０℃冰箱過夜。；如果有程序降溫器(放在-８０℃冰箱過夜，放入液氮罐)ZuiHAO;或者可以在４℃，２h;然后轉到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，ZuiHAO取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。

細胞凍存復蘇材料與方法步驟：常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時要注意以下幾點：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個月充氮一次。液氮溫度達-１９６℃，使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結構，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或制漏斗作引導，使液氮直達瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更HAO。若為初次使用，加液氮時更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣GAO壓消毒)，２mL安瓿(或專用細胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數生長期的細胞，在凍存前一天ZuiHAO換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細胞分裝于安瓿或專用冷凍塑料管中，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標記HAO細胞名稱和凍存日期，同時作HAO登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數)。(４)將裝HAO細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內;置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，Zui后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，ZuiHAO取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。

OCI-LY-19細胞類似產品：：CCD-18Co細胞、A-427細胞、NCIH2452細胞

WIL2-S細胞類似產品：：COLO 824細胞、TH1細胞、HRPEpiC細胞

KRC/Y細胞類似產品：：VMM5細胞、GT1-1細胞、P31/FUJ細胞

H747細胞類似產品：：SUD-4細胞、MDA MB 231細胞、SUM-52PE細胞

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C17細胞類似產品：：MDA-453細胞、SK-MEL-31細胞、Tn5B1-4細胞

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SK-RC 42細胞類似產品：：SW 13細胞、Hs 870.T細胞、USMC細胞

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HCC1008 Cells(贈送Str鑒定報告)|人乳腺導管癌細胞

Hs 821.T細胞類似產品：：RH-35細胞、SK Mel 24細胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞

MS 751細胞類似產品：：OVCA5細胞、BALB 3T3 clone A31細胞、NCI-H520細胞

253J-Bladder-V細胞類似產品：：LA 4細胞、KMST-6細胞、PAI細胞

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NCIH82細胞類似產品：：HT55細胞、NTera 2細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞

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HUT28細胞類似產品：：COLO 320 HSR細胞、KS-1 [Human glioblastoma]細胞、QSG7701細胞

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M210B4細胞類似產品：：BT-20細胞、NCIH358細胞、H-920細胞

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MDA468細胞類似產品：：QSG-7701細胞、FHs74Int細胞、HFSF細胞

293 F細胞類似產品：：Huh-7.5.1細胞、RS4-11細胞、U87細胞

EPC細胞類似產品：：M059J細胞、SPCA1細胞、HCC1419細胞

WILL2細胞類似產品：：H-128細胞、CORL279細胞、OVCAR-4細胞

SW-1088細胞類似產品：：CEMO-1細胞、C17細胞、PL45細胞

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