"HAC-84 Cell|人肺癌細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

細(xì)胞接收操作說明：請仔細(xì)閱讀本操作說明及相應(yīng)的細(xì)胞說明書。本公司細(xì)胞發(fā)貨有四種形式：T２５培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細(xì)胞使用，懸浮細(xì)胞也可以)、離心管(懸浮細(xì)胞使用多，當(dāng)然，有些公司也會用這種離心管形式發(fā)貼壁細(xì)胞，但是，長期經(jīng)驗來說，貼壁細(xì)胞容易發(fā)生形態(tài)變化，估計是細(xì)胞培養(yǎng)空間狹小，血清不足導(dǎo)致(Zui主要是怕運輸延誤導(dǎo)致這些情況發(fā)生)，個人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細(xì)胞)及干冰(凍存細(xì)胞用，主要是冬天天氣冷，溫度低于４℃的地方，都要考慮凍存細(xì)胞)。T２５培養(yǎng)瓶：是用T２５細(xì)胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細(xì)胞后，拆開包裝T２５培養(yǎng)瓶的自封袋，不拆封口膜，表面噴７５%酒精消毒后顯微鏡觀察細(xì)胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時細(xì)胞照片)。將細(xì)胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細(xì)胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝HAO備用，如細(xì)胞密度GAO于８０%，可以直接消化傳代，相反則加入５-６ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。離心管：是用１５ml離心管發(fā)貨的形式，只用于懸浮細(xì)胞發(fā)貨。收到細(xì)胞后消毒處理及將細(xì)胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細(xì)胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝HAO備用(如果實驗室沒有T２５培養(yǎng)瓶，可以暫時T７５培養(yǎng)瓶，加入１０-１５ml培養(yǎng)基，建議１０ml培養(yǎng)基，也可以使用T１７５培養(yǎng)瓶，加入５０-６０ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)瓶越大，需要的培養(yǎng)基越多。當(dāng)然如果剛接收到細(xì)胞密度不夠的話，ZuiHAO不用大瓶子，先用小瓶子養(yǎng)起來再換大的，不然會長得很慢，嚴(yán)重的，會導(dǎo)致細(xì)胞死亡等危險)，平衡完成后，離心(１０００rpm，３min)收集細(xì)胞，棄上清，用新的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。干冰：是用本公司凍存液凍存細(xì)胞后，直接用干冰將凍存的細(xì)胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細(xì)胞后按照細(xì)胞復(fù)蘇的步驟操作即可。

細(xì)胞生長：貼壁

NCI-HUT-596細(xì)胞類似產(chǎn)品：：675T細(xì)胞、A 253細(xì)胞、CWR22Rv1細(xì)胞

NB-4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-HUT-125細(xì)胞、LP-1細(xì)胞、NRK49F細(xì)胞

SBC-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC4006細(xì)胞、SW527細(xì)胞、ME1細(xì)胞

ATN-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Kit 225細(xì)胞、MHH-CALL-2細(xì)胞、CAL12T細(xì)胞

CL-11細(xì)胞類似產(chǎn)品：：FHL-124細(xì)胞、CEM T4細(xì)胞、NTERA-2 cl.D1細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

HAC-84 Cell|人肺癌細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長角度來說，針對細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長不HAO》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過低，細(xì)胞生長緩慢；3)細(xì)胞傳代時間過晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細(xì)胞死亡；時間過短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

Mac-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U87細(xì)胞、SNU761細(xì)胞、3396細(xì)胞

Murine Leydig Tumor Cell line-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GH3細(xì)胞、DrG細(xì)胞、Hs 819.T細(xì)胞

A-375.S2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LN-229細(xì)胞、H35細(xì)胞、HCT 15細(xì)胞

Hela-Ap-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LC-2/ad細(xì)胞、HSKMC細(xì)胞、MKN1細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫

Mac-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U87細(xì)胞、SNU761細(xì)胞、3396細(xì)胞

Murine Leydig Tumor Cell line-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GH3細(xì)胞、DrG細(xì)胞、Hs 819.T細(xì)胞

A-375.S2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LN-229細(xì)胞、H35細(xì)胞、HCT 15細(xì)胞

Hela-Ap-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LC-2/ad細(xì)胞、HSKMC細(xì)胞、MKN1細(xì)胞

細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動物細(xì)胞在分離時核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個多步驟的過程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長，同時也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

B16 subline B78細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKMEL-2細(xì)胞、DMS-273細(xì)胞、CALU1細(xì)胞

HCT-FET細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KYSE 50細(xì)胞、H3255細(xì)胞、HCT-8細(xì)胞

H2.35細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LNT-229細(xì)胞、CCD1112Sk細(xì)胞、Karpas 299細(xì)胞

CMT 93細(xì)胞類似產(chǎn)品：：FaDu細(xì)胞、Hs445細(xì)胞、P3/NS-1細(xì)胞

NCI-SNU-182細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HIC細(xì)胞、WEHI-231細(xì)胞、PNT1/A細(xì)胞

High5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C2BBe 1細(xì)胞、Kit225 K6細(xì)胞、BrCL15細(xì)胞

H.Ep. #2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1792細(xì)胞、Hs 739.T細(xì)胞、COV-362細(xì)胞

HUVEC-C[HUVEC]細(xì)胞類似產(chǎn)品：：N1S1細(xì)胞、M-07e細(xì)胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細(xì)胞

LAC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SGC 7901細(xì)胞、CFSC-8B細(xì)胞、Panc 5.04細(xì)胞

OAW 42細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RMG-I細(xì)胞、ME-180細(xì)胞、RPMI no 8226細(xì)胞

HAC-84 Cell|人肺癌細(xì)胞

DHL-6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MLMA細(xì)胞、H719細(xì)胞、A549/DDP細(xì)胞

Panc10.05細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MUGCHOR1細(xì)胞、MLE-12細(xì)胞、Japanese Tissue Culture-28細(xì)胞

2PK-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OC-3-VGH細(xì)胞、MLA 144細(xì)胞、A 2780 CP細(xì)胞

He La細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C81-61細(xì)胞、EST50細(xì)胞、M210B4細(xì)胞

NCIH345細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COLO 738細(xì)胞、MT4細(xì)胞、Jurkat clone A3細(xì)胞

Simpson細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RERFLCMS細(xì)胞、TE-9細(xì)胞、UMRC-2細(xì)胞

NCI/ADRRES細(xì)胞類似產(chǎn)品：：118 MG細(xì)胞、WiDr/S細(xì)胞、ACCM細(xì)胞

Hs 839.T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H661細(xì)胞、HEK 293細(xì)胞、HEK293-A細(xì)胞

LED-WiDr細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SVOG細(xì)胞、H1404細(xì)胞、ARO-81細(xì)胞

Hs1.Tes細(xì)胞類似產(chǎn)品：：hCMEC/D3細(xì)胞、UT7細(xì)胞、RPTEC/TERT 1細(xì)胞

Caco2BBe細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Tn-5B1-4細(xì)胞、OVCAR4細(xì)胞、LS174T細(xì)胞

NCI-H69C細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK.MEL.28細(xì)胞、KNS42細(xì)胞、HEK;293細(xì)胞

BEL7402細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細(xì)胞、2PK3細(xì)胞、Potorous tridactylus Kidney 2細(xì)胞

VSMC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hce8693細(xì)胞、Calu3細(xì)胞、IGROV 1細(xì)胞

NB-4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-HUT-125細(xì)胞、HCC-1438細(xì)胞、HT clone H9細(xì)胞

H-196細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC941122細(xì)胞、NCIH510細(xì)胞、X63Ag8-653細(xì)胞

H2052細(xì)胞類似產(chǎn)品：：K-562細(xì)胞、P560細(xì)胞、L cells (TK-)細(xì)胞

HOC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-2073細(xì)胞、293S細(xì)胞、H1648細(xì)胞

DMS273細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CF PAC-1細(xì)胞、CC-LP-I細(xì)胞、P-815細(xì)胞

M210B4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BT-20細(xì)胞、NCIH358細(xì)胞、H-920細(xì)胞

L-Wnt-3A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MC3T3-E細(xì)胞、A-172細(xì)胞、RPMI-1788細(xì)胞

Immortal Pig Intestinal-2I細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CHO Lec1細(xì)胞、LM TK negative細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-27細(xì)胞

NCI-SNU-16細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IHH細(xì)胞、NTERA-2細(xì)胞、T98細(xì)胞

OVCA432_Bast細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-A549細(xì)胞、130-T細(xì)胞、SW-1271細(xì)胞

Leydig細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CTSC-3細(xì)胞、BPH-1細(xì)胞、MC3T3-L1細(xì)胞

NCIH1930細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs888Lu細(xì)胞、LLC1細(xì)胞、NCI-H676細(xì)胞

SIRC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：YD-15細(xì)胞、RPE-hTERT細(xì)胞、NIH 3T3細(xì)胞

NT2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：T1-73細(xì)胞、C 643細(xì)胞、NFHIOSE-80細(xì)胞

HPAC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：JVM-3細(xì)胞、H2198細(xì)胞、YES2細(xì)胞

HAC-84 Cell|人肺癌細(xì)胞

BEAS-2B細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PA-1細(xì)胞、143TK-細(xì)胞、HCC0078細(xì)胞

Cates-1B細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BHK 21細(xì)胞、AAV-293細(xì)胞、DC 2.4細(xì)胞

MA-782細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NKT細(xì)胞、AR41P細(xì)胞、UCLA SO M14細(xì)胞

C4-2 Bone metastatic細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-82細(xì)胞、SW-527細(xì)胞、NBL-7細(xì)胞

Mac-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U87細(xì)胞、SNU761細(xì)胞、3396細(xì)胞

KYSE-450細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MHHCALL2細(xì)胞、LA-N-1細(xì)胞、SW480細(xì)胞

PF382細(xì)胞類似產(chǎn)品：：FRTL-5 Cl 2細(xì)胞、RWPE1細(xì)胞、PC 61 5.3細(xì)胞

CAL 85-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細(xì)胞、HIBEpiC細(xì)胞、SCC-7細(xì)胞

COLO-320-HSR細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OVCA 433細(xì)胞、TERT-RPE1細(xì)胞、RPTEC/TERT1細(xì)胞

LS-513細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH1792細(xì)胞、OCIAML4細(xì)胞、brain-derived Endothelial cells.3細(xì)胞

X63-Ag8-653細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CemT4細(xì)胞、C-4-I細(xì)胞、NCIH1155細(xì)胞

HCCLM3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HAEC細(xì)胞、Panc_03_27細(xì)胞、EB-3細(xì)胞

IEC-18細(xì)胞類似產(chǎn)品：：McA-RH7777細(xì)胞、CTV1細(xì)胞、Kit 225細(xì)胞

H-1648細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OVCAR-3細(xì)胞、MLMEC細(xì)胞、CPA47細(xì)胞

SW-1990細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-2342細(xì)胞、NB19-RIKEN細(xì)胞、SKNEP細(xì)胞

MXI細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Earles's cells細(xì)胞、HET-1A細(xì)胞、HepG2-luc細(xì)胞

HCT/Taxo1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NTERA2-D1細(xì)胞、RKN細(xì)胞、NW-MEL-38細(xì)胞

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