"HAC-84 Cell:人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
639-V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA-TU-8988S細(xì)胞、CAL27細(xì)胞、NCI-H1435細(xì)胞
SK-N-BE2C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB468細(xì)胞、TE 32.T細(xì)胞、OVCAR-432細(xì)胞
COLO 320HSR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A 72細(xì)胞、OV90細(xì)胞、HHL-5細(xì)胞
MDA.MB.435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-cell with DC Morphology細(xì)胞、PCI-4.2細(xì)胞、Liver-02細(xì)胞
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
HAC-84 Cell:人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞傳代時(shí)消化的問題：可以這樣說，對(duì)于需要消化傳代的細(xì)胞，每一次的消化都是對(duì)這個(gè)細(xì)胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗(yàn)。很多同學(xué)都遇到過這個(gè)問題，自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長(zhǎng)的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞，狀態(tài)越來越差勁了。對(duì)于這個(gè)問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以，越長(zhǎng)越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細(xì)胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個(gè)問題就是，細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)是不一樣的，每一個(gè)細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細(xì)胞消化同樣的時(shí)間對(duì)細(xì)胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會(huì)有脾氣啊。我后來對(duì)消化的方法進(jìn)行了改良。爭(zhēng)取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細(xì)胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細(xì)胞對(duì)比觀察看誰長(zhǎng)的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對(duì)胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶?jī)?nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤(rùn)洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時(shí)置于顯微鏡下觀察，待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時(shí)候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對(duì)比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細(xì)胞間隙明顯，細(xì)胞獨(dú)立開來的時(shí)候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實(shí)際情況你自己把握）。這是第四步。其實(shí)還可以有第五步，對(duì)于特別難消化的細(xì)胞和對(duì)胰酶特別敏感的細(xì)胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細(xì)胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷降到最低，保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了，如果細(xì)胞是屬于那種很容易消化的細(xì)胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個(gè)是需要你在實(shí)驗(yàn)中能夠自己用心去體會(huì)的。建議你接受一個(gè)新細(xì)胞時(shí)把各步消化的細(xì)胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細(xì)胞對(duì)胰酶的要求。便于你后續(xù)實(shí)驗(yàn)的開展。將細(xì)胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷之外，還有一個(gè)更重要的作用就是，可以程度地把細(xì)胞吹打成單個(gè)單個(gè)的狀態(tài)，不成片不連體。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請(qǐng)嚴(yán)格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散；３)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細(xì)胞密度達(dá)到８０%以后重復(fù)１項(xiàng)操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長(zhǎng)不宜超過７２小時(shí))；２)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化，請(qǐng)將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請(qǐng)優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請(qǐng)及時(shí)做好照片記錄并聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
CHO/dhFr-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDBK細(xì)胞、NOK細(xì)胞、HT 115細(xì)胞
RGM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C1R細(xì)胞、HT-29細(xì)胞、SKMel-28細(xì)胞
H1954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Eca109細(xì)胞、HEK-293-FT細(xì)胞、EAC細(xì)胞
GM0637細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM149細(xì)胞、TOV112D細(xì)胞、Leukemic 1210細(xì)胞
MHH-CALL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIEC細(xì)胞、KYSE 270細(xì)胞、OCI/AML-3細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分
HAC-84 Cell:人肺癌細(xì)胞系
貼壁細(xì)胞消化傳代時(shí)通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時(shí)，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對(duì)細(xì)胞施加胰酶選擇，因?yàn)榭偸琴N壁不牢的細(xì)胞先脫落，對(duì)腫瘤細(xì)胞來說，這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡(jiǎn)單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對(duì)于較難消化的細(xì)胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對(duì)細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點(diǎn)，直接加酶消化應(yīng)該不會(huì)有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積１/１０v。消化到有細(xì)胞脫落。不過有人說EDTA對(duì)細(xì)胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡(jiǎn)單、省事；效果很好并且不損失細(xì)胞！
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
WEHI 164細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFLS-OA細(xì)胞、H-250細(xì)胞、Neuro-2a細(xì)胞
U-937細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC 11細(xì)胞、JM細(xì)胞、Epstein-Barr-2細(xì)胞
NL-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RERF-LC-MS細(xì)胞、9L細(xì)胞、Hs832.Tc細(xì)胞
H-1437細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-64細(xì)胞、L02細(xì)胞、PA-TU S細(xì)胞
253JB-V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV2008細(xì)胞、HSC-6細(xì)胞、NCI-HUT-520細(xì)胞
CAL 85-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細(xì)胞、HIBEpiC細(xì)胞、SCC-7細(xì)胞
H2107細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：38C-13細(xì)胞、HIT T-15細(xì)胞、KB細(xì)胞
HAC-84 Cell:人肺癌細(xì)胞系
Be-Wo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-022細(xì)胞、SIRC細(xì)胞、3T3(A31)細(xì)胞
D341Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2405細(xì)胞、U20S細(xì)胞、MDA-MB-157細(xì)胞
RPMI8402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-33 A細(xì)胞、MDCC MSB1細(xì)胞、Rat 1細(xì)胞
JKT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEYA8細(xì)胞、NCI-SNU-449細(xì)胞、HCC0366細(xì)胞
SP2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD1095Sk細(xì)胞、SW 13細(xì)胞、HPB-ALL細(xì)胞
HFLS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC11細(xì)胞、HCC-9204細(xì)胞、HEM細(xì)胞
KNS81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3-J2細(xì)胞、LS-513細(xì)胞、LUDLU 1細(xì)胞
Wistar Institute-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK(15)細(xì)胞、WM115細(xì)胞、PC 61-5-3細(xì)胞
B6Tert-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM-0細(xì)胞、EL4細(xì)胞、SNT8細(xì)胞
B6Tert-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM-0細(xì)胞、EL4細(xì)胞、SNT8細(xì)胞
PNT-1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SV40 MES 13細(xì)胞、A9 (Hamprecht)細(xì)胞、GMK,BSC-1細(xì)胞
LLC PK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U20S細(xì)胞、LTEP-s細(xì)胞、JTC-28細(xì)胞
WM266-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MeT 5A細(xì)胞、OUMS23細(xì)胞、SGC7901細(xì)胞
ACC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU.86細(xì)胞、Detroit562細(xì)胞、OC-316細(xì)胞
SN12C-PM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-5細(xì)胞、SK-N-FI細(xì)胞、Strain KB細(xì)胞
NTERA2-cloneD1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GL-261細(xì)胞、MB49細(xì)胞、SUNE 1細(xì)胞
HuCC-T1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOP 62細(xì)胞、P3HR1-BL細(xì)胞、H-209細(xì)胞
IOSE-Van細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VM Cub 1細(xì)胞、Potorous tridactylus Kidney 1細(xì)胞、HMO6細(xì)胞
JCA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTC-200細(xì)胞、H-1975細(xì)胞、Fox/NY細(xì)胞
Kuramochi細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML-4細(xì)胞、OP9細(xì)胞、SNU-C1細(xì)胞
LTEP-s細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IEC6細(xì)胞、CCRF-CEM/S細(xì)胞、TR 146細(xì)胞
GM03320D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TK.10細(xì)胞、HLEB3細(xì)胞、RH35細(xì)胞
ZYM-SVEC01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EB-1細(xì)胞、HOS-143B細(xì)胞、KTCTL-140細(xì)胞
Ramos-2G6-4C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT 549細(xì)胞、PANC0327細(xì)胞、COS7細(xì)胞
IPLB-Sf21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV-2008細(xì)胞、HNTEC細(xì)胞、KYSE-510細(xì)胞
Jurkat-E6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Baby Hamster Kidney-21細(xì)胞、WM-451Lu細(xì)胞、NIH 3T6細(xì)胞
LTEP-a2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：S37細(xì)胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細(xì)胞、WRL68細(xì)胞
K562/ADR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LCMS細(xì)胞、PG-4細(xì)胞、HSC-I細(xì)胞
SKN-AS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1238細(xì)胞、Glioma-261細(xì)胞、Earle's L cells細(xì)胞
COLO-738細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 1846細(xì)胞、M3 Clone M-3細(xì)胞、GM05862細(xì)胞
NCI-H2126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1651細(xì)胞、BNL-HCC細(xì)胞、H-441細(xì)胞
H1048細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IGROV1細(xì)胞、HT55細(xì)胞、NL20細(xì)胞
GM00215細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OS-RC-2細(xì)胞、NCIH524細(xì)胞、OCI AML2細(xì)胞
Y1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CaSki細(xì)胞、28SC細(xì)胞、LS-123細(xì)胞
293E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：INS-1E細(xì)胞、LS 174 T細(xì)胞、SHP77細(xì)胞
Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-87 MG細(xì)胞、LAN-1細(xì)胞、MeT 5A細(xì)胞
NCI-H295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2141細(xì)胞、HUC-1細(xì)胞、Keio University-19-19細(xì)胞
SKOV-433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1703細(xì)胞、Hs 729.T細(xì)胞、MC-26細(xì)胞
OV1/P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CA46細(xì)胞、MDAMB435細(xì)胞、CCD18細(xì)胞
DU145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKN細(xì)胞、Mc Coy細(xì)胞、1.1B4細(xì)胞
MAntle cell VERona-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CORL88細(xì)胞、PASMCS細(xì)胞、Tu686細(xì)胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A 375細(xì)胞、RLE-6TN細(xì)胞、NCM-460細(xì)胞
HPAF II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細(xì)胞、Caki-1細(xì)胞、NUGC2細(xì)胞
HAC-84 Cell:人肺癌細(xì)胞系
38C-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAVER細(xì)胞、HT-3細(xì)胞、U343細(xì)胞
201T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fetal Bovine Heart Endothelial細(xì)胞、KALS-1細(xì)胞、MDBK (NBL-1)細(xì)胞
C33A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1770細(xì)胞、HCC2157細(xì)胞、Chinese Hamster Ovary細(xì)胞
ROS 17/2.8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLFa細(xì)胞、293 Ad5細(xì)胞、UMNSAH-DF 1細(xì)胞
NIH-3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TM-4細(xì)胞、CAL-85-1細(xì)胞、HA1800細(xì)胞
Tadarida brasiliensis 1 lung細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JCA-1細(xì)胞、SCC15細(xì)胞、P30/OHK細(xì)胞
SCC 15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VeroC1008細(xì)胞、NCI-H522細(xì)胞、MV4-11細(xì)胞
HT 1080細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KG1A細(xì)胞、SKNBE(2)細(xì)胞、RMG-1細(xì)胞
ACT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-2-Ad細(xì)胞、SW1990細(xì)胞、H1688細(xì)胞
HCC9724細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BIU87細(xì)胞、MRAEC細(xì)胞、T-47D細(xì)胞
Hs729細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 08.13細(xì)胞、HONE1細(xì)胞、MC3T3-E細(xì)胞
Karpas 299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE-1細(xì)胞、U-118MG細(xì)胞、WERIRb1細(xì)胞
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關(guān)鍵字： HAC-84 Cell:人肺癌細(xì)胞系
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