"CCRF-CEM:人急性淋巴細胞白血病T淋巴復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)
細胞生長:懸浮
可以這樣說,對于需要消化傳代的細胞,每一次的消化都是對這個細胞存活與否,狀態(tài)HAO與不HAO至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題,自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺HAO的,可是穿過幾代之后就發(fā)現自己的細胞不行了,狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題,可以非常肯定地說,你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以,越長越差。在消化的過程中,你加入胰酶后,所有細胞都在被胰酶消化著,但是我們忽視了一個問題就是,細胞的生長狀態(tài)是不一樣的,每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的,有的貼壁牢固,有的貼壁沒有那么牢固的,所以,讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的,他們受到了差別待遇當然會有脾氣的,大家爭取做到因材施教,比如試試下面的“四步消化法”。(以難消化細胞為例),具體操作:1)首先不加胰酶,倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍(目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉)。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍,這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍,兩次所得懸液混合傳入新瓶。(你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng),以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更HAO一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了)3)吸干凈瓶內剩余液體,加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍,吸掉棄之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察,待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基開始吹打,吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng),以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶,如果你們那比較富裕的話,繼續(xù)鏡下觀察,待剩余細胞間隙明顯,細胞獨立開來的時候,吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)(根據實際情況把握)。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
2008細胞類似產品::T241細胞、1301細胞、SK-Col-1細胞
NCI-522細胞類似產品::SR細胞、He La細胞、TE14細胞
RCS細胞類似產品::A375細胞、GM17219細胞、PANC3.27細胞
HBE135-E6E7細胞類似產品::WERIRb1細胞、NFS 60細胞、GalK1細胞
[細胞產品包裝]鮮活細胞:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞:1ml凍存管(兩支)
細胞背景資料:G.E. Foley 等人建立了類淋巴母細胞細胞株CCRF-CEM。 細胞是1964年11月從一位四歲白人女性急性淋巴細胞白血病患者的外周血白血球衣中得到。此細胞系從香港收集而來。
CCRF-CEM:人急性淋巴細胞白血病T淋巴復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)
細胞形態(tài):淋巴母細胞樣
Vero from pool #76細胞類似產品::TM-3細胞、DoTc2 4510細胞、HCE-2 [50.B1]細胞
MDA-MB-134-VI細胞類似產品::MDA-MB436細胞、TGW-nu細胞、RAOEC細胞
HuH 6細胞類似產品::UACC812細胞、OE19細胞、NCI-SNU-601細胞
購買細胞注意事項:1)收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完HAO,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現象發(fā)生請及時和我們聯系;2)仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等;3)用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,將細胞置于培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時多數細胞均會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常,請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結果顯示細胞無活力,請拍下照片及時和我們聯系,信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次;4)建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和公司技術部溝通交流?!炯毎麄鞔僮鞑襟E】一、貼壁細胞傳代:1)提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內;2)吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞;3)加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用;4)用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡;5)將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。二、懸浮細胞傳代:1)將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min;2)棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液;3)將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
細胞傳代方法:1:2傳代。3天內可長滿。
細胞來源說明:來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫
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細胞生長特性:懸浮生長
細胞培養(yǎng)技術也叫細胞克隆技術,在生物學中的正規(guī)名詞為細胞培養(yǎng)技術。不論對于整個生物工程技術,還是其中之一的生物克隆技術來說,細胞培養(yǎng)都是一個必不可少的過程,細胞培養(yǎng)本身就是細胞的大規(guī)??寺?。細胞培養(yǎng)技術可以由一個細胞經過大量培養(yǎng)成為簡單的單細胞或極少分化的多細胞,這是克隆技術必不可少的環(huán)節(jié),而且細胞培養(yǎng)本身就是細胞的克隆。通過細胞培養(yǎng)得到大量的細胞或其代謝產物。因為生物產品都是從細胞得來,所以可以說細胞培養(yǎng)技術是生物技術中Zui核心、Zui基礎的技術。公司是國內Zui大的細胞庫之一,迄今為止,細胞收錄背景資料清晰,活力狀態(tài)良HAO的細胞系達1356株,其中大部分是1999年以來從美國ATCC、德國DSMZ和日本RIKEN等分批次引進的細胞系,是全國Zui權威的細胞庫,為您實驗提供Zui可信賴的細胞。公司立足上海,輻射全國,面向世界,為國內科研細胞實驗做綿薄之力。
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Hs-343-T細胞類似產品::FL83B細胞、RCK-8細胞、HCT FET細胞
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關鍵字: CCRF-CEM:人急性淋巴細胞白血病T;
上海冠導生物工程有限公司,先后從ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、PromoCell、ScienCell、JCRB等國內外細胞庫引進細胞2000余株。以此為契機,公司組建了冠導細胞庫,我司細胞均由資深細胞培養(yǎng)工程師進行培養(yǎng)。我司可以提供的細胞有:①細胞系②原代細胞③穩(wěn)轉株④耐藥株⑤標記細胞⑥細胞配套試劑等。