"CEM/C1:人急性淋巴細胞白血病復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)
細胞生長:懸浮
貼壁細胞傳代實驗準備事項:將15mL離心管、T25細胞培養(yǎng)瓶、PBS緩沖液、移液管、電動移液器等物品提前放入生物安全柜中,紫外照射30min消毒滅菌;細胞完全培養(yǎng)基、0.25%胰酶-0.02%EDTA從4℃冰箱中取出后,復溫至室溫,備用。貼壁細胞傳代實驗步驟:將準備HAO的培養(yǎng)基等物品用酒精消毒后放入安全柜中;從培養(yǎng)箱中取出待處理的細胞,在顯微鏡下觀察細胞狀態(tài);用酒精消毒培養(yǎng)瓶,放入安全柜中;輕輕吸去細胞上清;加入2~3ml(PBS緩沖液)潤洗一次,吸去上清;加入1mL(0.25%胰酶-0.02%EDTA),輕輕晃勻、覆蓋所有細胞后,置于37℃培養(yǎng)箱靜置消化;消化1min左右,在顯微鏡下觀察細胞消化情況;消化完全后,加3ml完全培養(yǎng)基終止;按比例將細胞懸液分裝至培養(yǎng)瓶中;在顯微鏡下觀察傳代后的細胞密度及狀態(tài);將培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。注意事項:培養(yǎng)過程中需維持細胞處于對數(shù)生長期,80%左右即可傳代,傳代比例請參照說明書建議;消化時間不宜過長,大部分細胞回縮變圓并有少量細胞脫落即可中止消化,難消化的細胞可分次消化,每次時間不超過5min;培養(yǎng)過程中需要定期換液,一般細胞建議2~3天換液一次。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
MES 23.5細胞類似產品::C2A細胞、Mono Mac6細胞、P3/ag細胞
HTori:3細胞類似產品::KBM-7/Hap8細胞、H4-II-E細胞、SCC7細胞
A-2780細胞類似產品::H9c2細胞、SCL-2細胞、BALL1細胞
Human Embryonic Kidney 293細胞類似產品::My-La 2059細胞、NKL細胞、NKL細胞
[細胞產品包裝]鮮活細胞:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞:1ml凍存管(兩支)
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
CEM/C1:人急性淋巴細胞白血病復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)
細胞形態(tài):淋巴母細胞樣
SK-N-BE-2細胞類似產品::ID8/MOSEC細胞、BpRc1細胞、SK-CO-1細胞
Centre Antoine Lacassagne-78細胞類似產品::H-548細胞、LNT-229細胞、NTERA2-cloneD1細胞
Hs934T細胞類似產品::Kit-225-K6細胞、hRPTC細胞、HEK293F細胞
細胞傳代培養(yǎng)的胰酶消化法:傳代培養(yǎng):是指細胞從一個培養(yǎng)瓶以1:2或1:2以上的比例轉移,接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。傳代細胞,可根據(jù)不同細胞采取不同的方法進行細胞傳代。貼壁生長的細胞用消化法傳代,部分貼壁的細胞用直接吹打或用硅膠軟刮的刮除法傳代。懸浮細胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進行傳代,或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進行傳代。實驗步驟:①入無菌室之前用肥皂洗手,再用75% 的酒精擦拭消毒雙手;②倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài),確定細胞是否傳代及細胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液37℃下預熱;③超凈臺臺面應整潔,用75%酒精棉球擦拭清潔;④打開超凈工作臺的紫外燈照射臺面20min左右,關閉紫外燈,打開風機清潔空氣除去臭氧;⑤點燃酒精燈;取出無菌試管,巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內;⑥將培養(yǎng)用液瓶口用75%酒精消毒,過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上;⑦倒掉培養(yǎng)細胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用2-3ml Hanks液洗去殘留的就培養(yǎng)基,或用少量胰酶涮洗一下;⑧每個大培養(yǎng)瓶加入1ml胰酶,小培養(yǎng)瓶用量酌減,蓋HAO瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察。當細胞收回突起變圓時立即翻轉培養(yǎng)瓶,使細胞脫離胰酶,然后將胰酶倒掉。注意勿使細胞提早脫落入消化液中;⑨加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基,反復吹打消化HAO的細胞使其脫壁并分散,再根據(jù)分傳瓶數(shù)補加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(7-10ml/大瓶;3-5ml/小瓶)制成細胞懸液,然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋HAO瓶蓋,適度擰緊后稍回轉,以利于CO2的進入,將培養(yǎng)瓶放回CO2培養(yǎng)箱;⑩對懸浮培養(yǎng)細胞,步驟7-9不做。直接將細胞懸液進行離心去除舊培養(yǎng)基上清,加入新鮮培養(yǎng)基,然后分裝到各瓶中。
細胞傳代方法:1:2傳代
細胞來源說明:來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫
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細胞生長特性:貼壁生長
貼壁細胞傳代:去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞,顯微鏡下觀察,待細胞變圓,細胞間隙明顯,部分細胞剛開始脫離瓶壁,加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細胞小心吹打下來,1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代:一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,將細胞懸液移入離心管中,1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長,此時細胞生長狀態(tài)良HAO,當補液時,需避免反復吹打。
Hs863T細胞類似產品::NCIH1836細胞、LC-1細胞、RDES-1細胞
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NCI-460細胞類似產品::CAL12T細胞、GFP-Olig2細胞、MKN-7細胞
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LA-N-5細胞類似產品::Merwin Plasma Cell tumor-11細胞、NIH:OVCAR-8細胞、LAD-2細胞
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關鍵字: CEM/C1:人急性淋巴細胞白血病復蘇細;
上海冠導生物工程有限公司,先后從ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、PromoCell、ScienCell、JCRB等國內外細胞庫引進細胞2000余株。以此為契機,公司組建了冠導細胞庫,我司細胞均由資深細胞培養(yǎng)工程師進行培養(yǎng)。我司可以提供的細胞有:①細胞系②原代細胞③穩(wěn)轉株④耐藥株⑤標記細胞⑥細胞配套試劑等。