"GA-10 clone 4:人B淋巴細胞瘤復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：懸浮

可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)HAO與不HAO至關(guān)重要的考驗。很多同學(xué)都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺HAO的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更HAO一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況把握）。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

BNCL-2細胞類似產(chǎn)品：：CAKI 2細胞、QGY-7701細胞、A72細胞

RL-65細胞類似產(chǎn)品：：U266S細胞、MNNG-HOS (Cl#5)細胞、MDA468細胞

NCIH508細胞類似產(chǎn)品：：UACC893細胞、SUM-52PE細胞、Evsa T細胞

Tj-905細胞類似產(chǎn)品：：GH 3細胞、COLO678細胞、mousepodocyte細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

GA-10 clone 4:人B淋巴細胞瘤復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣

C 6細胞類似產(chǎn)品：：3T3-L1細胞、NT2D1細胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞

OVCAR5細胞類似產(chǎn)品：：SK-NSH細胞、C3H10T1/2 clone8細胞、H524細胞

WERI-Rb-1細胞類似產(chǎn)品：：HDLM-2細胞、RT112細胞、UM-UC-1細胞

細胞培養(yǎng)實驗基本操作：①進無菌室前要徹底洗手，按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用７５%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。②操作者動作要輕，安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應(yīng)在火焰近處并經(jīng)過燒灼進行。但要注意，金屬器械不能在火焰中長時間燒灼，以防退火；燒過的器械要冷卻后才能使用；已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼，因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會產(chǎn)生有害物質(zhì)，吸管再用時會將其帶到培養(yǎng)液中；膠塞、橡皮乳頭及塑料的細胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時間太長，以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體，危害培養(yǎng)細胞，同時塑料細胞培養(yǎng)用品也會產(chǎn)生變形影響使用。③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶，開瓶后的培養(yǎng)液應(yīng)保持斜位，避免直立，以防止下落細菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應(yīng)立即封閉瓶口，培養(yǎng)的細胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。④操作時盡量不要談話，咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。⑤吸取培養(yǎng)液、細胞懸液時，應(yīng)專管專用，一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應(yīng)棄去，以防止污染擴大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。⑥操作完畢后應(yīng)整理HAO工作臺面，用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面；防止細胞交叉污染：所有從別處轉(zhuǎn)來的或是自己所建的細胞系都要早期留有的充足的凍存儲備，一旦懷疑發(fā)生交叉污染，可做細胞遺傳學(xué)方面的鑒定，如發(fā)現(xiàn)原有的細胞遺傳物發(fā)生改變，可以復(fù)蘇早期凍存的細胞使用。重要細胞系的傳代工作應(yīng)由兩人獨立進行；無菌室的徹底消毒①新潔爾滅全面徹底擦洗無菌室。使用前應(yīng)稀釋即配即用。新潔爾滅和酒精相比，Zui大的YOU點是便宜，而且可以稀釋５０倍用，而同樣量的酒精價格可能是新潔爾滅的幾十倍。②甲醛熏蒸法：甲醛是一種廣譜滅菌劑菌，其水溶液和氣體對各種細菌、芽孢及真菌等微生物均有殺滅作用。甲醛價廉，熏蒸消毒時不損壞衣服、家具、皮革、橡膠等。市售的甲醛水溶液中一般含３７－４０%的甲醛。

細胞傳代方法：每２-３天換液

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：懸浮生長 

貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良HAO，當補液時，需避免反復(fù)吹打。

SKM1細胞類似產(chǎn)品：：QBC-939細胞、KBM-5細胞、NCIH647細胞

A253細胞類似產(chǎn)品：：RPE-hTERT細胞、ME16C細胞、LED-WiDr細胞

H-2107細胞類似產(chǎn)品：：rUCMSCs細胞、HDQP1細胞、H-1688細胞

MC 3T3-E1細胞類似產(chǎn)品：：SUNE1細胞、WBF344細胞、OE19細胞

C3H/10T1/2細胞類似產(chǎn)品：：JIMT-1細胞、SF763細胞、RTMC細胞

FCCH1024細胞類似產(chǎn)品：：751-NA細胞、KBM-7細胞、Emory University-3細胞

FCCH1018細胞類似產(chǎn)品：：VP 229細胞、210RCY3-Ag1.2.3細胞、EFM-192C細胞

28SC細胞類似產(chǎn)品：：CCC-ESF-1細胞、HEC1A細胞、COLO201細胞

Panc-03.27細胞類似產(chǎn)品：：COLO 320F細胞、NKT細胞、B16-BL6細胞

HCC1599細胞類似產(chǎn)品：：ARO 81-1細胞、ChaGo-K-1細胞、HCC95細胞

Vero 76 clone E6細胞類似產(chǎn)品：：EFO 27細胞、HMCB細胞、PaTu-8988s細胞

PaTu-8988s細胞類似產(chǎn)品：：8305-C細胞、EBC-1/original細胞、SCC154細胞

SNB19細胞類似產(chǎn)品：：TOV21細胞、PFSK-1細胞、H748細胞

SK MEL 5細胞類似產(chǎn)品：：OVCA 420細胞、AKR細胞、Case 3細胞

TM-3細胞類似產(chǎn)品：：LS174細胞、3T3-A31細胞、746T細胞

PK 15細胞類似產(chǎn)品：：MDCC-MSB1細胞、HCC95細胞、Panc 3.27細胞

PK 15細胞類似產(chǎn)品：：MDCC-MSB1細胞、HCC95細胞、Panc 3.27細胞

H748細胞類似產(chǎn)品：：MJ細胞、H-2009細胞、CAL 27細胞

HOS-143B細胞類似產(chǎn)品：：DSL6A/C1細胞、SK_N_FI細胞、RCCJF細胞

TE3A細胞類似產(chǎn)品：：U266B1細胞、HOSEpiC細胞、A172細胞

Hs 600.T細胞類似產(chǎn)品：：B 95.8細胞、SuDHL 1細胞、H1963細胞

H2.35細胞類似產(chǎn)品：：LNT-229細胞、CCD1112Sk細胞、Karpas 299細胞

H69C細胞類似產(chǎn)品：：H522細胞、MEF (CF-1)細胞、Jurkat E6-1細胞

NCIH2106細胞類似產(chǎn)品：：GM03190細胞、RCF細胞、MN 60細胞

GA-10 clone 4:人B淋巴細胞瘤復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

SK-N-BE(1)細胞類似產(chǎn)品：：AZ-521細胞、NOR-10細胞、RAMOS2G64C10細胞

KYSE270細胞類似產(chǎn)品：：2780CP細胞、P3JHR1細胞、BALB/3T3細胞

H1944細胞類似產(chǎn)品：：Giant Cell Tumor細胞、HFF1細胞、8505C細胞

LA-N-6(OAN)細胞類似產(chǎn)品：：Mel RM細胞、MHCC97H細胞、NG 108-15細胞

H1688細胞類似產(chǎn)品：：T/G HA VSMC細胞、KLM1細胞、HEL-299細胞

HME-1細胞類似產(chǎn)品：：ACT-1細胞、GM02219C細胞、MIHA細胞

Wistar Institute-38細胞類似產(chǎn)品：：PK(15)細胞、WM115細胞、PC 61-5-3細胞

Henrietta Lacks cells細胞類似產(chǎn)品：：IM 9細胞、OVHM細胞、MOLT16細胞

BxPC-3細胞類似產(chǎn)品：：RPMI-7666細胞、M 1細胞、H-345細胞

MDA-175細胞類似產(chǎn)品：：Tn-5細胞、KY180細胞、M4e細胞

MX-1細胞類似產(chǎn)品：：HFE-145細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞、N-2a細胞

P3.times.63 Ag8.653細胞類似產(chǎn)品：：KYSE-520細胞、NCI.H460細胞、MM1-S細胞

H-1105細胞類似產(chǎn)品：：UWB1289細胞、Pt K2 (NBL-5)細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞

BPH1細胞類似產(chǎn)品：：U118MG細胞、MDA-MB-435-S細胞、Lewis lung carcinoma line 1細胞

A72細胞類似產(chǎn)品：：JROECL19細胞、P3/NS1/1-Ag4.1細胞、PF382細胞

NCI H345細胞類似產(chǎn)品：：TOV112D細胞、Earles's cells細胞、PATU-S細胞

Hs675T細胞類似產(chǎn)品：：A2780/CP70細胞、Tu-177細胞、624 MEL細胞

130T細胞類似產(chǎn)品：：L 132細胞、HuPT4細胞、F81細胞

RGE細胞類似產(chǎn)品：：Hs 683.T細胞、L615細胞、NOZC-1細胞

Y3-Ag 1.2.3細胞類似產(chǎn)品：：0V-1063細胞、DU_145細胞、ECC-10細胞

CCD18細胞類似產(chǎn)品：：T-98G細胞、IM9細胞、NCI-H2110細胞

CCD18細胞類似產(chǎn)品：：T-98G細胞、IM9細胞、NCI-H2110細胞

TK10細胞類似產(chǎn)品：：KY70細胞、SK HEP-1細胞、NCI-H1651細胞

U-373MG ATCC細胞類似產(chǎn)品：：IPLB-Sf21-AE細胞、A2780-CP細胞、HK-2 [Human kidney]細胞

FL-83B細胞類似產(chǎn)品：：SW954細胞、Hi-5細胞、MDA175細胞

EB1細胞類似產(chǎn)品：：Colo320細胞、CCFSTTG1細胞、J774A1細胞

LS 180細胞類似產(chǎn)品：：HT-1080細胞、MODE-K細胞、H-661細胞

MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞類似產(chǎn)品：：LNCaP-FGC細胞、HOC-1細胞、CMT-64細胞

NS-1細胞類似產(chǎn)品：：MADB 106細胞、MLOY4細胞、KYSE-140細胞

HSC/mHSC細胞類似產(chǎn)品：：Human Embryonic Kidney 293細胞、Danio rerio Gill細胞、hESC細胞

Ca9-22細胞類似產(chǎn)品：：C643細胞、MV-4-11細胞、NCIH128細胞

Colo-201細胞類似產(chǎn)品：：NK-92 MI細胞、BEL 7404細胞、Ha Fe細胞

SACCLM細胞類似產(chǎn)品：：HEK 293細胞、HCT/Taxo1細胞、Det. 562細胞

TGBC-11-TKB細胞類似產(chǎn)品：：RPMI7951細胞、J82 COT細胞、LC-1 sq細胞

UPCI-SCC-090細胞類似產(chǎn)品：：U20-S細胞、R3/1細胞、OVMANA細胞

TGHAVSMC細胞類似產(chǎn)品：：HCC70細胞、M-20細胞、PTK2細胞

NCI-SNU-216細胞類似產(chǎn)品：：KPL4細胞、NCI-SNU-216細胞、SNU520細胞

H2107細胞類似產(chǎn)品：：38C-13細胞、HCO細胞、NCIH2405細胞

TE 32細胞類似產(chǎn)品：：Pro-5 Lec1.3c細胞、T-ALL 1細胞、NCI-H23細胞

Me Wo細胞類似產(chǎn)品：：MDAMB453細胞、SUM 159PT細胞、SW 1417細胞

SK-ChA1細胞類似產(chǎn)品：：Sc-1細胞、BetaTC6細胞、SCaBER細胞

BV173細胞類似產(chǎn)品：：RGC-5細胞、RBL.2H3細胞、HS-445細胞

NCIADR.RES細胞類似產(chǎn)品：：SUNE 1細胞、SU-DHL-5細胞、3LL細胞

Bat lung細胞類似產(chǎn)品：：LTEP-sm細胞、SHI1細胞、H-187細胞

Jiyoye細胞類似產(chǎn)品：：ABC-1細胞、LNCaP C4-2細胞、3AO細胞

Becker細胞類似產(chǎn)品：：WI38細胞、L cell line細胞、PCI:SG231細胞

CAL851細胞類似產(chǎn)品：：CPA 47細胞、SNU216細胞、hTERT-RPE-1細胞

H660細胞類似產(chǎn)品：：TE5細胞、MC3T3-E1(C4)細胞、UPCI-SCC-90細胞

CEM-C1細胞類似產(chǎn)品：：Reuber H35細胞、AG06814-J細胞、Hs 729細胞

EL4細胞類似產(chǎn)品：：MDCK.2細胞、SK-MEL3細胞、SV40-HCEC細胞

SUM-149細胞類似產(chǎn)品：：RAMOS2G64C10細胞、HMEC-1細胞、KYSE-150細胞

BNL-HCC細胞類似產(chǎn)品：：Walker 256細胞、Vero細胞、QGY細胞

H-2126細胞類似產(chǎn)品：：A253細胞、VCaP細胞、Be Wo細胞

CAL-120細胞類似產(chǎn)品：：Ishikawa細胞、RAT2細胞、MBT-2細胞

BEL7405細胞類似產(chǎn)品：：GDM1細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞、CAL33細胞

STC-1細胞類似產(chǎn)品：：Tu-686細胞、P3-NS1/1Ag 4.1細胞、NIH/3T3細胞

FM88細胞類似產(chǎn)品：：BaF3細胞、NCTC-1469細胞、SKO007細胞

H69/P細胞類似產(chǎn)品：：Mo 59J細胞、SNU-1040細胞、HFT-8810細胞

H69/P細胞類似產(chǎn)品：：Mo 59J細胞、SNU-1040細胞、HFT-8810細胞

SUDHL-1細胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-119細胞、JIMT-1細胞、COS1細胞

LOU-NH91細胞類似產(chǎn)品：：CAL-33細胞、MDA-MB-468細胞、RINm-5F細胞

Normal fibroblast-10細胞類似產(chǎn)品：：58F細胞、PNT1A細胞、JVM-2細胞

Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞類似產(chǎn)品：：HFB細胞、PL-5細胞、MCF 7B細胞

HT1197細胞類似產(chǎn)品：：190PT細胞、MKN1細胞、A-375細胞

CHL/IU細胞類似產(chǎn)品：：NCI-747細胞、DoTc2細胞、MOLP8細胞

Centre Antoine Lacassagne-27細胞類似產(chǎn)品：：MDA435細胞、HIT-T15細胞、C17.2細胞

Hs683T細胞類似產(chǎn)品：：H1836細胞、PBL細胞、HTori3細胞

RERF-LC-MS細胞類似產(chǎn)品：：NH6細胞、H-211細胞、RBL-I細胞

HEL9217細胞類似產(chǎn)品：：Kato-III細胞、H1836細胞、TE 85.T細胞

3T3(A31)細胞類似產(chǎn)品：：MKN-1細胞、H-548細胞、PL-11細胞

Hs 683細胞類似產(chǎn)品：：RDES細胞、Hs606細胞、HuH-6細胞

SUDHL-1細胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-119細胞、JIMT-1細胞、COS1細胞

D324 Med細胞類似產(chǎn)品：：HFL細胞、FHCRC-11細胞、PANC0504細胞

18G3.cl 1細胞類似產(chǎn)品：：SNU-216細胞、NCI H157細胞、SKGIIIA細胞

MH-22a細胞類似產(chǎn)品：：High-5細胞、NCI-H2286細胞、P3-NS1/1Ag 4.1細胞

Mouse Colon 38細胞類似產(chǎn)品：：KTC1細胞、SNU-484細胞、MDA-231細胞

SK-ChA-1細胞類似產(chǎn)品：：CHL細胞、PC-3細胞、TOV-112D細胞

NTHY-ORI3.1細胞類似產(chǎn)品：：hEEC細胞、Mv1Lu細胞、HMy2.CIR細胞

GM05887A細胞類似產(chǎn)品：：MDCK Type II細胞、H2196細胞、CORL51細胞

293-EBNA細胞類似產(chǎn)品：：Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞、NRK49F細胞、CBRH-7919細胞

293H細胞類似產(chǎn)品：：SMC-1細胞、HEK (AD293)細胞、MSB-1細胞

87 MG細胞類似產(chǎn)品：：Hs888 Lu細胞、KU.812細胞、HSC-T6細胞

GA-10 clone 4:人B淋巴細胞瘤復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

Madison lung細胞類似產(chǎn)品：：WEHI-279細胞、CFPAC-1細胞、K 562細胞

VM-CUB-I細胞類似產(chǎn)品：：SHIN-3細胞、HFL 1細胞、HOS(TE85)細胞

HBEpiC細胞類似產(chǎn)品：：RWPE-2細胞、SKO3細胞、GM03571細胞

PC-3M 2B4細胞類似產(chǎn)品：：KYSE510細胞、Reuber-H-35 hepatoma細胞、Transformed Human Liver Epithelial-2細胞

H-2085細胞類似產(chǎn)品：：BC-PAP細胞、GTL16細胞、NCTC 3960細胞

751-NA-15細胞類似產(chǎn)品：：SMA-560細胞、SW 480細胞、KYSE 70細胞

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