產(chǎn)品名稱:埃希氏菌通用PCR試劑盒
英文名稱:Escherichia spp.PCR
編號(hào): FSP1644
分類:PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
儲(chǔ)存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、產(chǎn)品僅供科研制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見(jiàn)下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
數(shù)據(jù)采集:
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌具體操作按所用儀器推薦的流程進(jìn)行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時(shí),吸收光譜在 471nm,結(jié)合 DNA 時(shí)的吸收光譜在 500nm,發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌以 Cps 陽(yáng)性對(duì)照濃度的 log 值為橫軸,以 Ct 值為縱軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測(cè)樣品濃度的 log 為橫軸,以 Ct 值為縱軸,通過(guò)待測(cè)樣品的 Ct 值計(jì)算出樣品 DNA 的濃度。
C18orf5618號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框56抗體特價(jià)促銷anti- FOXO6 antibody人腦血液補(bǔ)體蛋白C3免疫比濁法定量檢測(cè)試劑盒Bcl-2轉(zhuǎn)錄抑制因子1抗體
MIC1/C18orf8結(jié)腸癌相關(guān)蛋白MIC1抗體特價(jià)促銷anti- FOXP1 antibody通用細(xì)胞/組織載玻片制備試劑盒骨骼肌細(xì)胞線粒體膜蛋白PARL抗體
C19orf1819號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框18抗體特價(jià)促銷anti- FOXP2 antibody細(xì)胞/組織多聚賴氨酸載玻片制備試劑盒多核苷酸磷酸化酶蛋白抗體
C19orf2119號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框21抗體特價(jià)促銷anti- FOXP3 antibody細(xì)胞/組織高粘性多聚賴氨酸載玻片制備試劑盒卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白139抗體
C19orf2419號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框24抗體特價(jià)促銷anti- FOXP3 antibody細(xì)胞/組織明膠載玻片制備試劑盒PEST含核蛋白抗體
MFSD12/C19orf2819號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框28抗體特價(jià)促銷anti- FOXP4 antibody細(xì)胞/組織白蛋白載玻片制備試劑盒絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶18
C19orf4519號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框45抗體特價(jià)促銷anti- FOXQ1 antibody細(xì)胞/組織氨丙基三乙氧基硅烷載玻片制備試劑盒PELO蛋白抗體
C19orf4619號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框46抗體特價(jià)促銷anti- FOXR1 antibody石蠟切片組織真菌高碘酸希爾(PAS)法染色試劑盒缺陷性分配同源物β抗體
埃希氏菌通用PCR試劑盒freeze-driedABHD1 肺α/β水解酶蛋白1抗體4,5-雙二苯基膦-9,9-二甲基氧雜蒽鹽酸地芬尼多進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)DDCT/DDT D型多巴色脫羧酶含量:溶出度檢查
Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..ABHD13 水解酶結(jié)構(gòu)域蛋白13抗體二甲酚橙鹽酸烏拉地爾進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)Cyclophilin B 親環(huán)蛋白PPIB抗體含量:含量測(cè)定(HPLC)
Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..ABHD14B 水解酶結(jié)構(gòu)域蛋白14B抗體黃嘌呤鹽酸桂利嗪進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)BCAS2 癌相關(guān)蛋白2抗體含量:HPLC法含量測(cè)定
Erysipelothrix rhusiopathiae (Migula) Bucha ..ABHD15 水解酶結(jié)構(gòu)域蛋白15抗體5-溴-4-氯-3-吲哚基-β-D-葡萄糖苷酸環(huán)己銨鹽酸川芎嗪進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)PLRP1/PNLIPRP1 胰脂肪酶相關(guān)蛋白1抗體含量:HPLC法含量測(cè)定
Homo sapiens, humanABHD3 肺α/β水解酶蛋白3抗體5-溴-4-氯-3-吲哚基-β-D-葡萄糖苷酸環(huán)己銨鹽異喹物進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)BMP15 骨形態(tài)發(fā)生蛋白15抗體含量:含量測(cè)定
Cyberlindnera sargentensis (Wickerham et Ku ..ABHD4 α/β水解酶4抗體木聚糖對(duì)羥酸酯進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)BCAT1 胞漿支鏈氨酸酸轉(zhuǎn)氨酶抗體含量:含量測(cè)定(內(nèi)標(biāo))
Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..ACBD4 ?;o酶A結(jié)合結(jié)構(gòu)域蛋白4抗體木聚糖雌進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)BMP5 骨形態(tài)發(fā)生蛋白5抗體含量:系統(tǒng)適用性(HPLC)
Escherichia coli bacteriophage lambdaADCK1 ADCK1蛋白抗體葉黃素人參二醇進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)Hepatic lipase 肝脂酶抗體含量:鑒別
關(guān)鍵字: 埃希氏菌通用;PCR試劑盒;50T;FSP1644;
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.,China)是一家生物企業(yè),主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的研發(fā)、銷售。主營(yíng)產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測(cè)試劑盒、分光光度法檢測(cè)試劑盒、熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒、細(xì)胞株、原代細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.,China)先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué),暨南大學(xué),南京工業(yè)大學(xué),曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機(jī)研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒,種屬標(biāo)本齊全,有專門針對(duì)人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標(biāo)本的試劑盒;另有針對(duì)各種動(dòng)物(鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚(yú))的科研試劑。
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