中文名稱:豬瘟病毒PCR試劑盒 | 英文名稱:Classical Swine Fever VirusCSFVRTPCR |
保存條件: 低溫冷藏 | 純度規(guī)格: 詳見說明書 |
產(chǎn)品類別: PCR試劑盒 PCR檢測試劑盒 |
產(chǎn)品名稱:豬瘟病毒PCR試劑盒
英文名稱:Classical Swine Fever Virus(CSFV)RTPCR
編號: FSP1488
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、產(chǎn)品僅供科研制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
數(shù)據(jù)采集:
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌具體操作按所用儀器推薦的流程進(jìn)行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時(shí),吸收光譜在 471nm,結(jié)合 DNA 時(shí)的吸收光譜在 500nm,發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌以 Cps 陽性對照濃度的 log 值為橫軸,以 Ct 值為縱軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測樣品濃度的 log 為橫軸,以 Ct 值為縱軸,通過待測樣品的 Ct 值計(jì)算出樣品 DNA 的濃度。
PLEKHM2/SKIP血小板白細(xì)胞C激酶底物同源結(jié)構(gòu)域M2抗體特價(jià)促銷anti- CRNN antibodyDNA產(chǎn)物磷酸化處理試劑盒富含亮氨酸重復(fù)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體
PLEKHM3血小板白細(xì)胞C激酶底物同源結(jié)構(gòu)域M3抗體特價(jià)促銷anti- CROP antibody載體/DNA產(chǎn)物去磷酸化處理試劑盒脂質(zhì)磷酸磷酸酶相關(guān)蛋白1/可塑性相關(guān)基因3抗體
PID1磷酸相互作用結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體特價(jià)促銷anti- CROT antibody5’端銜接體(LINKER)連接試劑盒層粘蛋白α2抗體
beta-Amyloid 1-40(CT)β淀粉樣肽1-40(C端)抗體特價(jià)促銷anti- CRP antibody3’端銜接體(LINKER)連接試劑盒白介素1β抗體
SRRM1絲氨酸/精氨酸相關(guān)核基質(zhì)蛋白1抗體特價(jià)促銷anti- CRP antibody適配體(ADAPTER)連接試劑盒熒光素酶抗體
SRRM2絲氨酸/精氨酸相關(guān)核基質(zhì)蛋白2抗體特價(jià)促銷anti- CRTAC1 antibody細(xì)菌鈣轉(zhuǎn)試劑盒亮氨酸氨基肽酶3抗體
SRRM3絲氨酸/精氨酸相關(guān)核基質(zhì)蛋白3抗體特價(jià)促銷anti- CRTAP antibody通用型CHIP DNA分子克隆試劑盒肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體
beta-Amyloid 1-40(CT)β淀粉樣肽 1-40(C端)抗體特價(jià)促銷anti- CRTC2/TORC2 antibody通用型CHIP DNA分子庫構(gòu)建試劑盒層粘蛋白α1抗體
豬瘟病毒PCR試劑盒Human PWP2 ELISA KitBRD8 甲狀腺激素受體共激活蛋白抗體三氯化鈧六水合物KEA肉湯
Human RABGAP1L ELISA KitPAP1/Acid Phosphatase 酸性磷酸酶抗體S-1-氨基-3-氯-2-丙醇鹽酸鹽靛基質(zhì)試驗(yàn)用培養(yǎng)基
Human PCK2(Phosphoenolpyruvate carboxykinase [GTP], mitochondrial) ELISA KitBone Alkaline Phosphatase/AKP2 骨堿性磷酸酶抗體S-1-氨基-3-氯-2-丙醇鹽酸鹽乳酸桿菌瓊脂培養(yǎng)基
Human CYP27B1(25-hydroxyvitamin D-1 alpha hydroxylase, mitochondrial) ELISA KitProstatic Acid Phosphatase 前列腺酸性磷酸酶抗體S-1-氨基-3-氯-2-丙醇鹽酸鹽pH9.6葡萄糖肉湯
Human RABGEF1 ELISA KitOncostatin M 癌基因蛋白抑瘤素M抗體氯亞鉑酸鈉乳酸桿菌糖發(fā)酵培養(yǎng)基
Human PYGO2 ELISA KitCDR2/PCD17 小腦變性相關(guān)蛋白2抗體氯亞鉑酸鈉改良愛德華瓊脂基礎(chǔ)
Human PWP2 ELISA KitHLC3/Kanadaptin 肺癌癌基因蛋白3抗體(2S)-N-氯乙?;?2-氰基四氫吡咯BBL液體培養(yǎng)基
Human PYCR1 (Pyrroline-5-carboxylate reductase 1, mitochondrial)ELISA KitOVCA2 卵巢癌相關(guān)基因2蛋白抗體(2S)-N-氯乙?;?2-氰基四氫吡咯MPC瓊脂培養(yǎng)基
成立日期 | 2012-05-02 (13年) | 注冊資本 | 550 |
員工人數(shù) | 50-100人 | 年?duì)I業(yè)額 | ¥ 100萬以內(nèi) |
主營行業(yè) | 生化試劑,抗體,細(xì)胞培養(yǎng),分子生物學(xué),細(xì)胞生物學(xué) | 經(jīng)營模式 | 貿(mào)易,工廠,試劑 |
產(chǎn)品名稱 | 價(jià)格 | 公司名稱 | 報(bào)價(jià)日期 | |
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¥650 |
VIP1年
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費(fèi)雪(杭州)醫(yī)學(xué)研究有限公司
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2025-01-14 | |
¥3990 |
VIP6年
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上海澤葉生物科技有限公司
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2025-01-14 | |
¥1490 |
VIP6年
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上??道噬锟萍加邢薰?/div>
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2025-01-14 |