豬瘟E2病毒蛋白，豬瘟CSFV病毒蛋白(CSFV-E2)，豬瘟E2病毒抗原
豬瘟病毒(CSFV)的主要保護(hù)性抗原E2是由約370個氨基酸殘基組成的囊膜糖蛋白(gP53)。
豬瘟病毒E2蛋白是誘導(dǎo)產(chǎn)生保護(hù)性中和抗體的主要抗原結(jié)構(gòu)蛋白,是豬瘟病毒主要的免疫相關(guān)基因,
豬瘟(Classical swine fever,CSF)是一種嚴(yán)重危害養(yǎng)豬業(yè)的高度傳染性、出血性疾病(Liess et al.1987)。
E2蛋白是豬瘟病毒的重要結(jié)構(gòu)蛋白,也是豬瘟病毒的主要保護(hù)性抗原。基于其很好的免疫原性,
且能誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生高水平的病毒中和抗體,E2蛋白是CSF亞單位疫苗及相關(guān)檢測技術(shù)開發(fā)理想的候選抗原。
畢赤酵母表達(dá)體系具有分泌表達(dá)、真核修飾等優(yōu)點(diǎn),是E2蛋白理想的表達(dá)系統(tǒng)。
本研究以豬瘟病毒E2蛋白胞外區(qū)基因為模板,構(gòu)建畢赤酵母表達(dá)載體pPICZαA-E2,并通過電轉(zhuǎn)化獲得畢赤酵母X-33菌陽性克隆,經(jīng)SDS-PAGE、
western-blot鑒定篩選出E2蛋白表達(dá)菌株。通過探究誘導(dǎo)培養(yǎng)基pH、誘導(dǎo)劑濃度以及誘導(dǎo)時間使E2蛋白在搖瓶達(dá)到最佳表達(dá)量。
將培養(yǎng)基上清進(jìn)行Ni NTA親和層析、離子交換等純化方法獲得較純E2蛋白,對其糖基化修飾、二聚體結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析;并將純化的蛋白免疫動物,根據(jù)血清學(xué)試驗分析蛋白免疫原性。
結(jié)果表明,豬瘟病毒E2蛋白在畢赤酵母中成功分泌表達(dá),且表達(dá)的E2蛋白為二聚體結(jié)構(gòu),具有糖基化修飾。血清學(xué)分析表明該蛋白具有良好的免疫原性。
表達(dá)載體： 桿狀病毒載體
蛋白純度： 大于95%（SDS-PAGE電泳）
蛋白大小：15KD
品牌：PhyCell/費(fèi)雪
規(guī)格：0.1mg,0.5mg,1mg
該抗原可應(yīng)用于ELISA、膠體金、免疫親和柱層析等免疫檢測。
蛋白載體:牛血清白蛋白/卵清白蛋白/匙孔血藍(lán)蛋白BSA/OVA/KLH
物理性狀：液體，避免反復(fù)凍融
來 源:Balb/c 小鼠
免疫層析效價： 1:40以上，偶聯(lián)比大于1:60
蛋白濃度：＞1mg/ml，具體視批次而定
緩沖液：0.01M PBS PH7.4無防腐劑
儲存條件：-20℃以下
穩(wěn) 定 性： 凍融一次復(fù)檢合格，有效期兩年
本產(chǎn)品僅供研究使用，不適用于人類、治療或診斷應(yīng)用。
關(guān)鍵字： 豬瘟E2病毒蛋白;豬瘟抗原;豬瘟病毒抗原;豬瘟CSFV抗原;
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費(fèi)雪公司真核重組表達(dá)技術(shù)平臺涵蓋了細(xì)胞發(fā)酵、重組抗體/抗原哺乳動物細(xì)胞表達(dá)、蛋白理化性質(zhì)分析等。
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