目前廣泛使用的用于蛋白質(zhì)鑒定的質(zhì)譜分析主要使用兩種類型質(zhì)譜:一種是MALDI-TOF直接對(duì)分子量進(jìn)行測量;另一種是使用ESI-MS高分辨率質(zhì)譜分析電噴霧得到的多電荷信號(hào),然后對(duì)信號(hào)進(jìn)行去卷積分析,獲得精確分子量數(shù)值。這兩種方法各有其優(yōu)點(diǎn)及適用的領(lǐng)域。百泰派克生物同時(shí)配備了這兩種質(zhì)譜分析系統(tǒng),可用于各類蛋白質(zhì)樣品分子量測定,滿足包括肽指紋圖譜分析及蛋白質(zhì)鑒定在內(nèi)的多種蛋白質(zhì)分子量分析需求。
案例分析:
1 大于10KDa分子量的某蛋白藥物精確分子量測定
百泰派克通過online反相色譜分離后,直接用Q Exactive質(zhì)譜儀對(duì)原始信號(hào)進(jìn)行采集。然后使用ProMass for XcaliburTM對(duì)原始數(shù)據(jù)進(jìn)行deconvolution計(jì)算,得到樣品精確分子量。
進(jìn)入質(zhì)譜之前的反相色譜分離過程中連接了紫外檢測器(如下圖所示),在實(shí)現(xiàn)對(duì)樣品分離的同時(shí),還會(huì)對(duì)樣品的純度進(jìn)行評(píng)估;色譜分離的過程也降低了在精確分子量檢測過程中對(duì)樣品純度的要求。
利用軟件對(duì)質(zhì)譜原始數(shù)據(jù)進(jìn)行分析時(shí),可以根據(jù)TIC(總離子流圖)分別對(duì)樣品中的主要成分和次要成分的分子量進(jìn)行選擇和分析。
例如我們對(duì)上圖中紅框標(biāo)注的主要成分進(jìn)行分子量分析,我們只需要找到該時(shí)刻得到質(zhì)譜原始數(shù)據(jù)(如下圖所示)。
然后對(duì)上述原始數(shù)據(jù)進(jìn)行去卷積處理,得到該蛋白樣品中主要成分的精確分子質(zhì)量(如下圖所示)。
2 小于10KDa分子量的某肽段藥物精確分子量測定
百泰派克生物科技通過online反相色譜分離后,直接用Q Exactive質(zhì)譜儀對(duì)原始信號(hào)進(jìn)行采集,然后利用經(jīng)典的計(jì)算分子量的方法對(duì)原始數(shù)據(jù)直接進(jìn)行計(jì)算,得到樣品精確分子量。
進(jìn)入質(zhì)譜之前的反相色譜分離過程中連接了紫外檢測器(如下圖所示),在實(shí)現(xiàn)對(duì)樣品分離的同時(shí),還會(huì)對(duì)樣品的純度進(jìn)行評(píng)估;色譜分離的過程同樣也降低了在肽段精確分子量檢測過程中對(duì)樣品純度的要求。
在進(jìn)行肽段精確分子量計(jì)算的過程中,我們只需要找到肽段洗脫時(shí)間點(diǎn)的質(zhì)譜原始數(shù)據(jù)(如下圖所示)
按照經(jīng)典的計(jì)算分子質(zhì)量的方法,同時(shí)對(duì)帶有兩個(gè)以上電荷的分子進(jìn)行分子量計(jì)算,得到該肽段樣品的精確分子質(zhì)量。
同時(shí)我們還會(huì)給高豐度的帶電離子質(zhì)譜原始數(shù)據(jù)供您參考(如下圖所示)。
MALDI 與ESI的優(yōu)缺點(diǎn)比較:
進(jìn)入質(zhì)譜之前的反相色譜分離過程中連接了紫外檢測器
在技術(shù)報(bào)告中,百泰派克會(huì)為您提供詳細(xì)的中英文雙語版技術(shù)報(bào)告,報(bào)告包括:
1. 實(shí)驗(yàn)步驟(中英文)
2. 相關(guān)的質(zhì)譜參數(shù)(中英文)
3. 質(zhì)譜圖片
4. 原始數(shù)據(jù)
5. 蛋白質(zhì)/多肽分子量信息
高分辨質(zhì)譜分子量鑒定一站式服務(wù)
您只需下單-寄送樣品
百泰派克一站式服務(wù)完成:樣品處理-上機(jī)分析-數(shù)據(jù)分析-項(xiàng)目報(bào)告
關(guān)鍵字: 高分辨質(zhì)譜分子量鑒定;
北京百泰派克生物科技有限公司(Beijing Biotech Pack Scientific Co., Ltd. 簡稱BTP)成立于2015年,是國家級(jí)高新技術(shù)企業(yè),業(yè)務(wù)范圍主要圍繞蛋白和小分子代謝物檢測兩大板塊,從事蛋白質(zhì)和小分子代謝物的理化性質(zhì)分析及結(jié)構(gòu)解析等相關(guān)技術(shù)服務(wù),為客戶提供高性價(jià)比、高效率的技術(shù)服務(wù)。深耕蛋白鑒定、定量蛋白組(iTRAQ/TMT、label free、DIA/SWATH)、PRM靶蛋白定量、蛋白和抗體測序、蛋白修飾(二硫鍵、糖基化、磷酸化、乙?;?、泛素化等)、靶向和非靶向代謝物檢測。
百泰派克生物科技檢測平臺(tái)包括:檢測分析平臺(tái)、蛋白質(zhì)組學(xué)分析平臺(tái)、代謝組學(xué)分析平臺(tái)、蛋白質(zhì)從頭測序平臺(tái)、生物制藥分析平臺(tái)和流式細(xì)胞多因子檢測平臺(tái)。公司擁有獨(dú)立的質(zhì)譜實(shí)驗(yàn)室、色譜實(shí)驗(yàn)室、細(xì)胞培養(yǎng)室和免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)室,以及高分辨率質(zhì)譜儀和高效液相色譜。目前已與國內(nèi)外多家藥物研發(fā)企業(yè),以及哈佛大學(xué)、北京大學(xué)在內(nèi)的國內(nèi)外高校建立了合作關(guān)系,協(xié)助客戶發(fā)表了多篇中英文文章,包括Cell等多家高水平期刊。
公司自主檢測平臺(tái)發(fā)展至今,已覆蓋蛋白質(zhì)組學(xué)、代謝組學(xué)、生物制藥、生信分析等多組學(xué)檢測平臺(tái),積累了豐富的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn),憑借專業(yè)的技術(shù)和優(yōu)質(zhì)的服務(wù)水平,客戶覆蓋北京大學(xué)、清華大學(xué)、中科院等多所知名院校,也與國內(nèi)外多家藥物研發(fā)企業(yè)建立合作關(guān)系。公司始終致力于為各科研院校、企業(yè)和機(jī)構(gòu)提供高效、準(zhǔn)確、高性價(jià)比的蛋白質(zhì)(組)研究技術(shù)包裹,助力客戶在基礎(chǔ)研究、分子診斷及其他生命科學(xué)研究領(lǐng)域取得突破,為生命科學(xué)的發(fā)展做出貢獻(xiàn)。
百泰派克技術(shù)平臺(tái)
檢測分析平臺(tái):多臺(tái)高分辨率質(zhì)譜儀、高效液相色譜、氣相色譜,NMR。
蛋白質(zhì)組分析平臺(tái):Label-free、iTRAQ、SILAC、SWATH、MRM;蛋白質(zhì)定性定量鑒定、蛋白質(zhì)差異分析、發(fā)現(xiàn)疾病標(biāo)記物、發(fā)現(xiàn)藥物靶標(biāo)。
代謝組分析平臺(tái):靶向代謝組學(xué)、非靶向代謝組學(xué)、脂質(zhì)組學(xué)分析;通量達(dá)1000種代謝分子、代謝通路分析、代謝靶標(biāo)鑒定。流式細(xì)胞多因子檢測平臺(tái):CBA、FlowCytomix;微量樣品需求,分析多種細(xì)胞因子。
蛋白質(zhì)從頭測序平臺(tái):Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀、PEAKS軟件分析;100%序列測定,精準(zhǔn)蛋白、抗體測序。
生物制藥分析平臺(tái):生物藥物鑒定、變異性分析、純度分析。
流式細(xì)胞多因子檢測平臺(tái):CBA、FlowCytomix;微量樣品需求,分析多種細(xì)胞因子。
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