抗體反應(yīng)的因素:
1.電解質(zhì) :抗原抗體特異結(jié)合后,膠體粒便可發(fā)生脫水作用,此時易受電解質(zhì)影響,產(chǎn)品僅用于科研如有適當(dāng)濃度的電解質(zhì)存在就會使它們失去部分負(fù)電荷而相互凝聚,于是出現(xiàn)明顯的凝集或沉淀現(xiàn)象。
2.酸堿度:合適的pH為6-8。
3.溫度:37℃通常是抗原體反應(yīng)最適溫度。
14號染色體開放閱讀框140抗體 別 名 chromosome 14 open reading frame 140; FAM164C; family with sequence similarity 164 member C; FLJ23093; UPF0418 protein FAM164C; ZC21C_HUMAN.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
產(chǎn)品類型 一抗
英文名稱 Anti-C14ORF140/FAM164C
中文名稱 14號染色體開放閱讀框140抗體
研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 免疫學(xué)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 52kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human C14ORF140/FAM164C
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
實驗步驟:
1、石蠟切片,常規(guī)脫蠟至水
2、蒸餾水沖洗,pbs 浸泡5 分鐘(如需采用抗原修復(fù),在此步驟后進行)。
3、3%雙氧水去離子水(無色液體)孵育15-20 分鐘,以消除內(nèi)源性過氧物酶活性。
4、滴加試劑A(藍色液體)室溫孵育15-20 分鐘,傾去,勿洗。
5、滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗,37℃孵育2-3 小時或4℃過夜。
6、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
7、滴加試劑B(黃色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
8、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
9、滴加試劑C(橙色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
10、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
11、顯色劑顯色(DAB 或AEC)
12、自來水充分沖洗。
13、如果需要,可進行復(fù)染,脫水,透明。
14、選擇適當(dāng)?shù)姆馄瑒┓馄?/span>
抗體的鑒定:
1)抗體的效價鑒定:不管是用于診斷還是用于治療,制備抗體的目的都是要求較高效價。不同的抗原制備的抗體,要求的效價不一。鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴散試驗,酶聯(lián)免疫吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴散試驗來鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力??贵w的特異性高,它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示。交叉反應(yīng)率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時的濃度,并按公式計算交叉反應(yīng)率。
產(chǎn)品僅用于科研如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時,表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0,即該血清的特異性較好。
3)抗體親和力:是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol。抗體親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗證抗體的均一性等均有重要意義。
抗體反應(yīng)特點:
1.高度特異性,特異性是抗原抗體反應(yīng)的最主要特征,特定抗原決定簇只與特定抗體結(jié)合;
2.可逆性:抗原與抗體結(jié)合形成抗原抗體復(fù)合物的過程是一種動態(tài)平衡, 其反應(yīng)式為:Ag+AbAg·Ab;
3.適當(dāng)濃度和比例;
4.敏感性:在測定血清中某一物質(zhì)的含量時,化學(xué)比色法的敏感度為mg/ml水平,酶反應(yīng)測定法的敏感度約為5~10μg/ml,免疫測定中凝膠擴散法的敏感度與酶反應(yīng)法相仿。
含試劑:
1、一抗(應(yīng)用:IHC-P=1:400-800 IHC-F=1:400-800 )
2、無色試劑:內(nèi)源性過氧化物酶阻斷劑
3、試劑A:封閉用正常山羊血清工作液
4、試劑B:生物素標(biāo)記二抗工作液:生物素標(biāo)記羊抗兔IgG
5、試劑C:辣根酶標(biāo)記鏈酶卵白素工作液
6、顯色液D液 (棕色) 1ml
7、顯色液E液(白色)20ml
甲氧標(biāo)準(zhǔn)品Rat PTH ELISA Kit純度:0.996
甲氧標(biāo)準(zhǔn)品Rat PTH ELISA Kit純度:0.996
甲氧明標(biāo)準(zhǔn)品Rat AFP ELISA Kit純度:0.98
左美嗪標(biāo)準(zhǔn)品Rat AFP ELISA Kit純度:0.999
甲蝶呤標(biāo)準(zhǔn)品Rat Methylase ELISA Kit純度:0.999
美索比妥標(biāo)準(zhǔn)品Rat Methylase ELISA Kit純度:0.97
美索巴莫標(biāo)準(zhǔn)品TIMP-1 ELISA Kit純度:0.996
Rabbit soluble endothelial protein C receptor,sEPCR ELISA Kit兔子腎上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA試劑盒特價促銷規(guī)格:96T/48T130454-200905含量測定氧氟沙星規(guī)格:100mg
Rabbit soluble endothelial protein C receptor,sEPCR ELISA Kit兔子可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒特價供應(yīng)規(guī)格:96T/48T≥80%(鑒別用)Rhaponticin土大黃苷規(guī)格:
Rabbit lipoprotein α,Lp-α ELSIA Kit 兔蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒 進口/分裝規(guī)格:96T/48T≥98%pseudolaric acid B土槿皮酸規(guī)格:
Rabbit Apolipoprotein E,Apo-E ELISA Kit 兔載蛋白E(Apo-E)ELISA試劑盒 進口/原裝規(guī)格:96T/48T≥98%Pseudolaric Acid C土荊皮酸規(guī)格:
Rabbit apoprotein B100,apo-B100 ELISA Kit 兔載蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒 特價促銷規(guī)格:96T/48T≥97%Pseudolaric Acid A土荊皮酸規(guī)格:
Rabbit transforming growth factorβ2,TGFβ2 ELISA Kit兔轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒特價供應(yīng)規(guī)格:96T/48T≥97%Pseudolaric acid A-O-β-D-glucopyranoside土荊皮酸-O-β-D-葡萄糖苷規(guī)格:
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14號染色體開放閱讀框140抗體 Myrothecium│roridum Tode種屬:Myrothecium│roridum Tode
分離基物:洋玉蘭落葉葉片
提供形式:斜面培養(yǎng)物
安全等級:1
模式菌株:no
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:14
生長條件:26
存儲條件:定期移植法露濕粘座孢霉(或露濕漆斑菌)