抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、產(chǎn)品僅用于科研進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱
|
Cullin3抗體
|
英文名稱
|
Anti-Cullin 3
|
規(guī)格
|
0.2ml/200μg
|
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-Cullin 3
中文名稱 Cullin3抗體
別 名 CUL 3; Cul-3; CUL3; CUL3_HUMAN; Cullin-3; Cullin3; KIAA0617.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 免疫學(xué) 染色質(zhì)和核信號(hào) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞周期蛋白
蛋白分子量 predicted molecular weight: 85kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Cullin 3
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.產(chǎn)品僅用于科研用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
下列是Cullin3抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
二咪唑(標(biāo)準(zhǔn)品) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品純度:>95%
青霉素V鉀(標(biāo)準(zhǔn)品) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品純度:>95%
2NPAOZ(標(biāo)準(zhǔn)品) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品純度:>95%
醋酰(標(biāo)準(zhǔn)品) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品純度:>95%
喹噁啉(標(biāo)準(zhǔn)品) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品純度:>95%
吡嗪(標(biāo)準(zhǔn)品) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品純度:>90%
泰妙素(標(biāo)準(zhǔn)品) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品純度:>90%
碘化銫(用于高通量質(zhì)譜,99.9995%) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于高通量質(zhì)譜,99.9995%純度:>90%
1,3二基2咪唑啉(用于GCHS,≥99.8%(GC)) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:用于GCHS,≥99.8%(GC)純度:>95%
二基亞砜(農(nóng)殘級(jí)) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:農(nóng)殘級(jí)純度:>90%
十二基三基化銨(DTAC)(99%,離子對(duì)色譜級(jí)) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:99%,離子對(duì)色譜級(jí)純度:>95%
二十(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0% (GC)) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0% (GC)純度:>95%
聚酰粉(柱層析用) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:柱層析用純度:>95%
聚酰粉(柱層析用,200400目) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:柱層析用,200400目純度:>95%
聚酰粉(柱層析用,1030目) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:柱層析用,1030目純度:>95%
二鈉,二水(for HPLC, ≥99%(T)) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:for HPLC, ≥99%(T)純度:>95%
PARP4 多腺苷二多聚酶4一抗/多聚ADP核糖聚合酶4 特價(jià)促銷 0.2ml sulphadoxine
DOCK1 細(xì)胞質(zhì)分裂付出蛋白1一抗 特價(jià)促銷 0.2ml sulphadoxine
EDA2R/TNFRSF27 腫瘤壞死因子受體超家族成員27一抗 特價(jià)促銷 0.2ml Penicillin G, sodium salt
EDG1/CD363/S1P1 內(nèi)皮細(xì)胞分化鞘脂G蛋白偶聯(lián)受體1一抗 特價(jià)促銷 0.2ml Penicillin G, sodium salt
FEM 1B FEM1B一抗 特價(jià)促銷 0.2ml Mitiglinide calcium Hydrate
AIF 調(diào)亡誘導(dǎo)因子一抗 特價(jià)促銷 0.1ml Mitiglinide calcium Hydrate
BACH1/BRIP1 癌易感基因相互作用蛋白1一抗 特價(jià)促銷 0.1ml Propylthiouracil
AIMP2 AIMP2一抗 特價(jià)促銷 0.2ml Fluorometholone Acetate
大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)ELISA試劑盒 英文名稱:Rat Vascular Endothelial cell Growth Factor,VEGF ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子B(VEGF-B)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Vascular Endothelial cell Growth Factor B,VEGF-B ELISA Kit進(jìn)口/原裝
大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子C(VEGF-C)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Vascular Endothelial cell Growth Factor C,VEGF-C ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子D(VEGF-D)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Vascular Endothelial cell Growth Factor D,VEGF-D ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體1(VEGFR-1/Flt1)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Vascuoar endothelial cell growth factor receptor 1,VEGFR-1/Flt1 ELISA Kit進(jìn)口/原裝
大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Vascuoar endothelial cell growth factor receptor 2,VEGFR-2/Flk-1 ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)兔纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA試劑盒 組裝/原裝
兔細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1)ELISA試劑盒 組裝/原裝
兔透明質(zhì)酸(HA)ELISA試劑盒 組裝/原裝
兔銅藍(lán)蛋白(CP)ELISA試劑盒 組裝/原裝
Cullin3抗體 Pleurotus│citrinopileatus Singer種屬:Pleurotus│citrinopileatus Singer
分離基物:子實(shí)體
提供形式:斜面培養(yǎng)物
安全等級(jí):1
模式菌株:no
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:72
生長條件:25
存儲(chǔ)條件:定期移植法榆黃蘑