抗體反應的因素:
1.電解質 :抗原抗體特異結合后,膠體粒便可發(fā)生脫水作用,此時易受電解質影響,產品僅用于科研如有適當濃度的電解質存在就會使它們失去部分負電荷而相互凝聚,于是出現明顯的凝集或沉淀現象。
2.酸堿度:合適的pH為6-8。
3.溫度:37℃通常是抗原體反應最適溫度。
BTB/POZ結構域蛋白3抗體 別 名 BTB (POZ) domain containing 3; BTB domain containing 3; BTB/POZ domain containing protein 3; BTB/POZ domain-containing protein 3; BTBD3 protein.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse
產品類型 一抗
英文名稱 Anti-BTBD3
中文名稱 BTB/POZ結構域蛋白3抗體
研究領域 細胞生物 免疫學
蛋白分子量 predicted molecular weight: 57kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human BTBD3
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
產品應用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:50-200
(石蠟切片需做抗原修復)
實驗步驟:
1、石蠟切片,常規(guī)脫蠟至水
2、蒸餾水沖洗,pbs 浸泡5 分鐘(如需采用抗原修復,在此步驟后進行)。
3、3%雙氧水去離子水(無色液體)孵育15-20 分鐘,以消除內源性過氧物酶活性。
4、滴加試劑A(藍色液體)室溫孵育15-20 分鐘,傾去,勿洗。
5、滴加適當比例稀釋的一抗,37℃孵育2-3 小時或4℃過夜。
6、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
7、滴加試劑B(黃色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
8、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
9、滴加試劑C(橙色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
10、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
11、顯色劑顯色(DAB 或AEC)
12、自來水充分沖洗。
13、如果需要,可進行復染,脫水,透明。
14、選擇適當的封片劑封片。
抗體的鑒定:
1)抗體的效價鑒定:不管是用于診斷還是用于治療,制備抗體的目的都是要求較高效價。不同的抗原制備的抗體,要求的效價不一。鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應,瓊脂擴散試驗,酶聯免疫吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴散試驗來鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應抗原或近似抗原物質的識別能力??贵w的特異性高,它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應率來表示。交叉反應率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計算各自的結合率,求出各自在IC50時的濃度,并按公式計算交叉反應率。
產品僅用于科研如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質的IC50濃度幾乎是無窮大時,表示這一抗血清與其他抗原物質的交叉反應率近似為0,即該血清的特異性較好。
3)抗體親和力:是指抗體和抗原結合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結合位點與抗原決定簇之間立體構型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數K表示,K的單位是L/mol??贵w親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗證抗體的均一性等均有重要意義。
抗體反應特點:
1.高度特異性,特異性是抗原抗體反應的最主要特征,特定抗原決定簇只與特定抗體結合;
2.可逆性:抗原與抗體結合形成抗原抗體復合物的過程是一種動態(tài)平衡, 其反應式為:Ag+AbAg·Ab;
3.適當濃度和比例;
4.敏感性:在測定血清中某一物質的含量時,化學比色法的敏感度為mg/ml水平,酶反應測定法的敏感度約為5~10μg/ml,免疫測定中凝膠擴散法的敏感度與酶反應法相仿。
含試劑:
1、一抗(應用:IHC-P=1:400-800 IHC-F=1:400-800 )
2、無色試劑:內源性過氧化物酶阻斷劑
3、試劑A:封閉用正常山羊血清工作液
4、試劑B:生物素標記二抗工作液:生物素標記羊抗兔IgG
5、試劑C:辣根酶標記鏈酶卵白素工作液
6、顯色液D液 (棕色) 1ml
7、顯色液E液(白色)20ml
依澤替米貝;依折麥布 英文名稱(EN):LPhenylalanine Standard Substance (≥...規(guī)格(SP):1G
依澤替米貝;依折麥布(標準品) 英文名稱(EN):LOrnithine monohydrochloride (~99%)規(guī)格(SP):5G
依澤替米貝βD葡萄糖苷 英文名稱(EN):LOrnithine hydrochloride Standard (≥...規(guī)格(SP):1G
依澤替米貝羥基βD葡萄糖苷 英文名稱(EN):LMethionine (cell culture tested, ≥9...規(guī)格(SP):25G
依澤替米貝 英文名稱(EN):LMethionine Standard Substance (≥99....規(guī)格(SP):1G
銥標準溶液(1000μg/ml,基質:2.0mol/L) 英文名稱(EN):LLysine monohydrochloride (≥98.5%)規(guī)格(SP):25G
胰蛋白胨 英文名稱(EN):LLysine (≥98%, TLC)規(guī)格(SP):5G
胰蛋白胨(BD) 英文名稱(EN):LLysine Standard Substance (≥99.5%)規(guī)格(SP):1G
胰蛋白1:250 英文名稱(EN):Leupeptin hemisulfate salt (≥90%)規(guī)格(SP):1MG
胰蛋白1:2500 英文名稱(EN):LLeucine (cell culture tested, ≥98.5%)規(guī)格(SP):25G
胰蛋白原 英文名稱(EN):LLeucine Standard Substance (≥99.8%)規(guī)格(SP):1G
胰島素(牛) 英文名稱(EN):LIsoleucine (cell culture tested, ≥9...規(guī)格(SP):25G
胰島素(牛) 英文名稱(EN):LIsoleucine Standard Substance (≥99....規(guī)格(SP):1G
胰島素(豬) 英文名稱(EN):LHistidine (cell culture tested, ≥98...規(guī)格(SP):25G
胰島素樣生長因子Ⅱ(6984) 英文名稱(EN):LHistidine Standard Substance (≥99.9%)規(guī)格(SP):1G
胰島素樣生長因子I(5770) 英文名稱(EN):LArginine monohydrochloride (≥98.5%)規(guī)格(SP):25G
胰多肽,大鼠 英文名稱(EN):GlyGly (cell culture tested, ≥99%)規(guī)格(SP):25G
胰多肽,人 英文名稱(EN):LGlutathione reduced (GSH, ≥99%)規(guī)格(SP):5G
類乳頭狀瘤病毒33抗體Hinokiol中文名:別名:8,11,13-Abietatriene-3,12-diol分子式:C20H30O2
甲型肝炎病毒聚蛋白VP1抗體Pterisolic acid E中文名:別名:分子式:C20H30O5
同源異型盒基因HLX1蛋白抗體Itol A中文名:別名:分子式:C20H32O6
肝細胞單克隆抗體/肝細胞特異性抗原抗體ent-3β,18-Dihydroxylabda-8(17),13E-dien-15-oic acid中文名:別名:分子式:C20H32O4
HRAS樣抑制因子2抗體Cephalomannine中文名:三尖杉寧堿別名:Taxol B分子式:C45H53NO14
BTB/POZ結構域蛋白3抗體 Aspergillussydowii(Bain.Etsart.)Thometchurch種屬:Aspergillussydowii(Bain.Etsart.)Thometchurch
安全等級:1
模式菌株:no
應用領域:除光學含儀器外的防霉試驗菌種。
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:15
生長條件:25-28℃聚多曲霉(薩氏曲霉)