抗體反應(yīng)的因素:
1.電解質(zhì) :抗原抗體特異結(jié)合后,膠體粒便可發(fā)生脫水作用,此時易受電解質(zhì)影響,產(chǎn)品僅用于科研如有適當濃度的電解質(zhì)存在就會使它們失去部分負電荷而相互凝聚,于是出現(xiàn)明顯的凝集或沉淀現(xiàn)象。
2.酸堿度:合適的pH為6-8。
3.溫度:37℃通常是抗原體反應(yīng)最適溫度。
蛋白BOC抗體 別 名 Boc homolog (mouse); Brother of CDO; Protein BOC; brother of CDO precursor; Protein BOC; BOC_HUMAN.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Horse, Zebrafish, Sheep
產(chǎn)品類型 一抗
英文名稱 Anti-Protein BOC
中文名稱 蛋白BOC抗體
研究領(lǐng)域 發(fā)育生物學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 干細胞 細胞表面分子 細胞膜蛋白
蛋白分子量 predicted molecular weight: 121kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Protein BOC
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
實驗步驟:
1、石蠟切片,常規(guī)脫蠟至水
2、蒸餾水沖洗,pbs 浸泡5 分鐘(如需采用抗原修復(fù),在此步驟后進行)。
3、3%雙氧水去離子水(無色液體)孵育15-20 分鐘,以消除內(nèi)源性過氧物酶活性。
4、滴加試劑A(藍色液體)室溫孵育15-20 分鐘,傾去,勿洗。
5、滴加適當比例稀釋的一抗,37℃孵育2-3 小時或4℃過夜。
6、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
7、滴加試劑B(黃色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
8、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
9、滴加試劑C(橙色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
10、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
11、顯色劑顯色(DAB 或AEC)
12、自來水充分沖洗。
13、如果需要,可進行復(fù)染,脫水,透明。
14、選擇適當?shù)姆馄瑒┓馄?/span>
抗體的鑒定:
1)抗體的效價鑒定:不管是用于診斷還是用于治療,制備抗體的目的都是要求較高效價。不同的抗原制備的抗體,要求的效價不一。鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴散試驗,酶聯(lián)免疫吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴散試驗來鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力??贵w的特異性高,它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示。交叉反應(yīng)率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時的濃度,并按公式計算交叉反應(yīng)率。
產(chǎn)品僅用于科研如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時,表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0,即該血清的特異性較好。
3)抗體親和力:是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol??贵w親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗證抗體的均一性等均有重要意義。
抗體反應(yīng)特點:
1.高度特異性,特異性是抗原抗體反應(yīng)的最主要特征,特定抗原決定簇只與特定抗體結(jié)合;
2.可逆性:抗原與抗體結(jié)合形成抗原抗體復(fù)合物的過程是一種動態(tài)平衡, 其反應(yīng)式為:Ag+AbAg·Ab;
3.適當濃度和比例;
4.敏感性:在測定血清中某一物質(zhì)的含量時,化學(xué)比色法的敏感度為mg/ml水平,酶反應(yīng)測定法的敏感度約為5~10μg/ml,免疫測定中凝膠擴散法的敏感度與酶反應(yīng)法相仿。
含試劑:
1、一抗(應(yīng)用:IHC-P=1:400-800 IHC-F=1:400-800 )
2、無色試劑:內(nèi)源性過氧化物酶阻斷劑
3、試劑A:封閉用正常山羊血清工作液
4、試劑B:生物素標記二抗工作液:生物素標記羊抗兔IgG
5、試劑C:辣根酶標記鏈酶卵白素工作液
6、顯色液D液 (棕色) 1ml
7、顯色液E液(白色)20ml
鐵屑(>98%,BC) 英文名稱(EN):Wort Agar規(guī)格(SP):500G
呫噸(標準品) 英文名稱(EN):DLPropargylglycine規(guī)格(SP):250MG原裝
呫噸(標準品) 英文名稱(EN):NHippurylHisLeu Hydrate (≥98%,HPLC)規(guī)格(SP):25MG
通關(guān)藤苷G(標準品) 英文名稱(EN):D(+)Cellobiose (≥99.0%,TLC)規(guī)格(SP):5G
通關(guān)藤苷H(標準品) 英文名稱(EN):D(+)Melibiose (≥99.0%)規(guī)格(SP):1G
通關(guān)藤苷I(標準品) 英文名稱(EN):Limonin (>90%,HPLC)規(guī)格(SP):1MG
銅標準溶液(100µg/mL,基體:1%HNO3) 英文名稱(EN):25Hydroxycholesterol (≥98%)規(guī)格(SP):10MG
銅標準溶液(1000mg/l,溶劑:1%) 英文名稱(EN):Cesium Hydroxide Hydrate (≥90%)規(guī)格(SP):5G
銅標準溶液(1000μg/ml,基體:1.0 mol/L HNO3) 英文名稱(EN):TMB dihydrochloride (≥98%)規(guī)格(SP):250MG
銅標準溶液(500mg/l,溶劑:1%) 英文名稱(EN):Diethyl ether (≥99.7%)規(guī)格(SP):100ML
銅粉(>99.5%,BR) 英文名稱(EN):Formic Acid (98%)規(guī)格(SP):100ML
銅片 英文名稱(EN):Zinc Sulfate Heptahydrate (≥99.0%)規(guī)格(SP):100G
銅鐵試劑 英文名稱(EN):Phenyl Isothiocyanate, PITC (≥99%,GC)規(guī)格(SP):25ML
英文名稱(EN):Acetylsalicylic Acid (≥99.0%)規(guī)格(SP):250G
三 英文名稱(EN):DMAPN (98%)規(guī)格(SP):500ML
三(標準品) 英文名稱(EN):Beef Extract Powder規(guī)格(SP):500G
基匹格列(MⅢ) 英文名稱(EN):Adipic Acid Monomethyl Ester (99%)規(guī)格(SP):5G
基匹格列標記d4 英文名稱(EN):Manganese(II) Chloride Tetrahydrate (C...規(guī)格(SP):100G
鳥嘌呤核苷酸結(jié)合蛋白9抗體Stigmasterol中文名:豆甾醇別名:Stigmasta-5,22-dien-3-ol分子式:C29H48O
糖基轉(zhuǎn)移酶8結(jié)構(gòu)域1抗體Stigmasta-4,22-dien-3-one中文名:豆甾-4,22-二烯-3-酮別名:分子式:C29H46O
高爾基體膜相關(guān)蛋白6樣蛋白4抗體Stigmastane-3,6-dione中文名:豆甾烷-3,6-二酮別名:分子式:C29H48O2
胞漿區(qū)相關(guān)蛋白GIPC2抗體Stigmast-4-ene-3,6-dione中文名:豆甾-4-烯-3,6-二酮別名:分子式:C29H46O2
糖脂轉(zhuǎn)移蛋白結(jié)構(gòu)域2抗體二萜
蛋白BOC抗體 Candida shehatae H.R.Buckley&Uden種屬:Candida shehatae H.R.Buckley&Uden
提供形式:凍干粉
安全等級:1
模式菌株:no
應(yīng)用領(lǐng)域:利用D-木糖產(chǎn)酒精
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:麥芽汁瓊脂:將發(fā)酵啤酒的原料(未加酒花),稀釋至12柏林,加瓊脂15克,溶化后分裝。15磅滅菌30分鐘。
生長條件:25-28℃,好氧休哈塔假絲酵母