抗體反應(yīng)的因素:
1.電解質(zhì) :抗原抗體特異結(jié)合后,膠體粒便可發(fā)生脫水作用,此時易受電解質(zhì)影響,產(chǎn)品僅用于科研如有適當(dāng)濃度的電解質(zhì)存在就會使它們失去部分負(fù)電荷而相互凝聚,于是出現(xiàn)明顯的凝集或沉淀現(xiàn)象。
2.酸堿度:合適的pH為6-8。
3.溫度:37℃通常是抗原體反應(yīng)最適溫度。
丙型肝炎病毒核結(jié)合蛋白-1抗體 別 名 AA3; Acy-3; Acylase III; Aminoacylase 3; Aminoacylase III; ASPA2; Aspartoacylase (aminoacylase) 3; Aspartoacylase 2; AW107362; EC 3.5.1.-; EC 3.5.1.15; HCBP1; Hepatitis C virus core binding protein 1; MGC108859; MGC9740; RGD1305394; 0610006H10Rik; ACY3_HUMAN.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Chicken
產(chǎn)品類型 一抗
英文名稱 Anti-ACY 3/HCV-HCBP1
中文名稱 丙型肝炎病毒核結(jié)合蛋白-1抗體
研究領(lǐng)域 免疫學(xué) 細(xì)菌及病毒
蛋白分子量 predicted molecular weight: 35kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ACY 3 C-terminus
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
實驗步驟:
1、石蠟切片,常規(guī)脫蠟至水
2、蒸餾水沖洗,pbs 浸泡5 分鐘(如需采用抗原修復(fù),在此步驟后進(jìn)行)。
3、3%雙氧水去離子水(無色液體)孵育15-20 分鐘,以消除內(nèi)源性過氧物酶活性。
4、滴加試劑A(藍(lán)色液體)室溫孵育15-20 分鐘,傾去,勿洗。
5、滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗,37℃孵育2-3 小時或4℃過夜。
6、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
7、滴加試劑B(黃色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
8、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
9、滴加試劑C(橙色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
10、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
11、顯色劑顯色(DAB 或AEC)
12、自來水充分沖洗。
13、如果需要,可進(jìn)行復(fù)染,脫水,透明。
14、選擇適當(dāng)?shù)姆馄瑒┓馄?/span>
抗體的鑒定:
1)抗體的效價鑒定:不管是用于診斷還是用于治療,制備抗體的目的都是要求較高效價。不同的抗原制備的抗體,要求的效價不一。鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴散試驗,酶聯(lián)免疫吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴散試驗來鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力??贵w的特異性高,它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示。交叉反應(yīng)率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時的濃度,并按公式計算交叉反應(yīng)率。
產(chǎn)品僅用于科研如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時,表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0,即該血清的特異性較好。
3)抗體親和力:是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol??贵w親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗證抗體的均一性等均有重要意義。
抗體反應(yīng)特點:
1.高度特異性,特異性是抗原抗體反應(yīng)的最主要特征,特定抗原決定簇只與特定抗體結(jié)合;
2.可逆性:抗原與抗體結(jié)合形成抗原抗體復(fù)合物的過程是一種動態(tài)平衡, 其反應(yīng)式為:Ag+AbAg·Ab;
3.適當(dāng)濃度和比例;
4.敏感性:在測定血清中某一物質(zhì)的含量時,化學(xué)比色法的敏感度為mg/ml水平,酶反應(yīng)測定法的敏感度約為5~10μg/ml,免疫測定中凝膠擴散法的敏感度與酶反應(yīng)法相仿。
含試劑:
1、一抗(應(yīng)用:IHC-P=1:400-800 IHC-F=1:400-800 )
2、無色試劑:內(nèi)源性過氧化物酶阻斷劑
3、試劑A:封閉用正常山羊血清工作液
4、試劑B:生物素標(biāo)記二抗工作液:生物素標(biāo)記羊抗兔IgG
5、試劑C:辣根酶標(biāo)記鏈酶卵白素工作液
6、顯色液D液 (棕色) 1ml
7、顯色液E液(白色)20ml
硼標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:1g 英文名稱:Boric Acid (AS)
基標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:0.5ml×3ampules 英文名稱:Ethylbenzene
鈣標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:1g 英文名稱:Calcium Chloride (AS)
汀二物標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:25mg 英文名稱:Amifostine Disulfide
依莰舒相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:50mg 英文名稱:Ecamsule Related Compound C
α環(huán)糊精標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:500mg 英文名稱:Alpha Cyclodextrin
萬古標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:4vials 英文名稱:
羧基纖維素鈣標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:1.5g 英文名稱:
肝素標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:300mg 英文名稱:
肝素標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:10x1 ml 英文名稱:Heparin Sodium
鋁屑 進(jìn)口、國產(chǎn) Aluminum 含量:AR,99.5%
鋁氧 進(jìn)口、國產(chǎn) Aluminumoxide 含量:BR,90%
綠藜蘆 進(jìn)口、國產(chǎn) 3,4Dimethoxybenzoicacid 含量:超純,99%
綠色碳硅 進(jìn)口、國產(chǎn) Siliconcarbide 含量:CP,99%
咪唑 進(jìn)口、國產(chǎn) Econazolenitrate 含量:BR
脲 進(jìn)口、國產(chǎn) CN113183 含量:BR,98%
代十六基 進(jìn)口、國產(chǎn) Hexadecylpyridiniumchloride 含量:IND
進(jìn)口、國產(chǎn) Chlorobutanol 含量:AR,85%
2羥基3(三基)基聚環(huán)氧纖維素 進(jìn)口、國產(chǎn) Polyquaternium10 含量:IND
芐基三銨 進(jìn)口、國產(chǎn) TEBAC 含量:CP,45.5%
磷酸化糖皮質(zhì)激素受體抗體Methyl levulinate中文名:別名:分子式:C6H10O3
葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白6抗體Cleroindicin C中文名:別名:分子式:C8H12O3
糖皮質(zhì)激素受體β抗體Cleroindicin B中文名:別名:4-Hydroxy-4-(2-hydroxyethyl)cyclohexanone分子式:C8H14O3
胰島葡萄糖6磷酸酶2抗體Cleroindicin F中文名:別名:Rengyolone; Halleridone; (-)-Cleroindicin F分子式:C8H10O3
葡萄糖氧化酶抗體1-chloro-6-(5-ethynylthiophen-2-yl)hexa-3,5-diyn-2-ol中文名:別名:分子式:C12H7ClOS
丙型肝炎病毒核結(jié)合蛋白-1抗體 Oleispiralenta種屬:Oleispiralenta
分離基物:海水,中國海洋大學(xué)
安全等級:1
模式菌株:no
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:102
生長條件:28℃惰性解油螺旋菌