抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、產(chǎn)品僅用于科研進(jìn)行動物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱
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血管緊張素Ⅱ受體相關(guān)蛋白抗體
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英文名稱
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Anti-AGTRAP
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規(guī)格
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0.2ml/200μg
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產(chǎn)品應(yīng)用 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-AGTRAP
中文名稱 血管緊張素Ⅱ受體相關(guān)蛋白抗體
別 名 Angiotensin Ⅱ receptor associated protein; Angiotensin Ⅱ type I receptor associated protein; ATI receptor associated protein; ATRAP; MGC29646; Type 1 angiotensin Ⅱ receptor associated protein; ATRAP_HUMAN.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Pig, Horse, Rabbit, Sheep
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 心血管 細(xì)胞生物 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) G蛋白偶聯(lián)受體
蛋白分子量 predicted molecular weight: 17kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human AGTRAP
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.產(chǎn)品僅用于科研用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
下列是血管緊張素Ⅱ受體相關(guān)蛋白抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
二二標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:0.5ml 英文名稱:Diethylene Glycol
二標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:3ml 英文名稱:Diethanolamine
齊留通標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:150mg 英文名稱:Zileuton
N羥神經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:NGlycolylneuraminic Acid
辛酯標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:300mg 英文名稱:Methyl Caprylate
角鯊標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:500mg 英文名稱:Squalane
標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Pip
二類殘留溶劑環(huán)己標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:1.2ml×3ampules 英文名稱:
β七葉素標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:350mg 英文名稱:Escin
胰島素(牛)標(biāo)準(zhǔn)品(28℃) 規(guī)格:100mg 英文名稱:Insulin (Beef)
苦杏仁甙 進(jìn)口、國產(chǎn) Amygdalin 含量:CP,70%
奎諾二基酯 進(jìn)口、國產(chǎn) AMPSO 含量:FMP,96%
諾 進(jìn)口、國產(chǎn) 2Hydroxyquinoline 含量:AR,98%
拉夫米定 進(jìn)口、國產(chǎn) EpivirHBV 含量:USP級,750mcg/mg
辣根過氧物酶 進(jìn)口、國產(chǎn) POD 含量:BR,2萬u/mg
藍(lán)光性鉻花青 進(jìn)口、國產(chǎn) EriochromecyanineR 含量:IND
勞氏青蓮 進(jìn)口、國產(chǎn) Thionin 含量:FMP,60%
酪酶 進(jìn)口、國產(chǎn) Polyphenoloxidase 含量:BR,0.4~1u/mg,液體
酪脫羧酶 進(jìn)口、國產(chǎn) Tyrosinedecarboxylase 含量:BR,2500~7000u/mg,豬血
酪蛋白 進(jìn)口、國產(chǎn) Casein 含量:超純,1200u/mg,液體
Tuberin樣蛋白1抗體Primeverose中文名:櫻草糖別名:分子式:C11H20O10
X連鎖Charcot-Marie-Tooth神經(jīng)病變相關(guān)蛋白抗體Phomaligol A中文名:別名:分子式:C14H20O6
甘氨酰胺核苷酸合成酶抗體Aflatoxin B1中文名:B1別名:AFB1; 黃曲霉素B1分子式:C17H12O6
生長休止特定蛋白2抗體ucralose中文名:三氯蔗糖別名:分子式:C12H19Cl3O8
半乳糖瓦爾登轉(zhuǎn)化酶抗體4,5-Di-O-caffeoylquinic acid methyl ester中文名:4,5-二咖啡??鼘幩峒柞e名:Methyl 4,5-di-O-caffeoylquinate分子式:C26H26O12
血管緊張素Ⅱ受體相關(guān)蛋白抗體 Deinococcusaerolatus種屬:Deinococcusaerolatus
分離基物:空氣樣本,韓國
安全等級:1
模式菌株:yes
應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:108