抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、產(chǎn)品僅用于科研進(jìn)行動物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-ARK5
中文名稱 AMPK的相關(guān)蛋白激酶5抗體
別 名 AMPK related protein kinase 5; NUAK family SNF1 like kinase; NUAK1; Probable serine/threonine protein kinase KIAA0537.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 激酶和磷酸酶
蛋白分子量 predicted molecular weight: 73kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ARK5
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.產(chǎn)品僅用于科研用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
下列是AMPK的相關(guān)蛋白激酶5抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
唑沙宗相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:50mg 英文名稱:
鹽標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:25mg 英文名稱:
鹽美普卡因標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Meprylcaine Hydrochloride
福辛普利相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:25mg 英文名稱:
奧美拉唑鎂標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:10mg 英文名稱:Omeprazole Magnesium
唑沙宗標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:350mg 英文名稱:Chlorzoxazone
阿托伐醌標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Atovaquone
昔美沙美特羅標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:150mg 英文名稱:Salmeterol Xinafoate
水楊梅提取物標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:150mg 英文名稱:Pygeum Extract
羥酯標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Butylparaben
(基基)磺鋇鹽 進(jìn)口、國產(chǎn) Bariumdiphenylaminesulfonate 含量:BR
1(2’酰)3,3,3三 進(jìn)口、國產(chǎn) TTA 含量:BR
1(3二基基)3基碳二亞 進(jìn)口、國產(chǎn) WSC 含量:高純,50%
1(4氧基)3(1基)1鹽鹽 進(jìn)口、國產(chǎn) Dycloninehydrochloride 含量:BR,豬心,95%
1,1,1,3,3,3六2 進(jìn)口、國產(chǎn) HFIP 含量:CP
1,1,1三2,4二 進(jìn)口、國產(chǎn) TAA 含量:AR,97%
1,1,1三氧基 進(jìn)口、國產(chǎn) Trimethylorthoacetate 含量:4N
1,1,1三氧基 進(jìn)口、國產(chǎn) Triethylorthopropionate 含量:GR,99.5%
1,1,2三1,2,2三 進(jìn)口、國產(chǎn) 1,1,2Trichlorotrifluoroethane 含量:CP,99.5%
1,1’,1’’次基三 進(jìn)口、國產(chǎn) Triphenylmethane 含量:AR,99%
結(jié)核分枝桿菌分泌性蛋白ESAT6抗體O-Benzyl-L-serine中文名:O-芐基-L-絲氨酸別名:分子式:C10H13NO3
上皮粘連調(diào)控蛋白ESRP2抗體S-Benzyl-L-cysteine中文名:S-芐基-L-半胱氨酸別名:分子式:C10H13NO2S
T細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞表達(dá)特應(yīng)性皮炎蛋白ETEA抗體Benzoyl-DL-valine中文名:苯甲酰-DL-纈氨酸別名:分子式:C12H15NO3
電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白脫氫酶抗體(3R)-(+)-1-Benzyl-3-(tert-butoxycarbonylamino)pyrrolidine中文名:(3R)-(+)-1-芐基-3-(叔丁氧羰基氨基)吡咯烷別名:分子式:C16H24N2O2
EGF毒素受體7跨膜結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體1-Benzyl-5-phenylbarbituric acid中文名:1-芐基-5-苯基巴比妥酸別名:分子式:C17H14N2O3
AMPK的相關(guān)蛋白激酶5抗體 Burkholderia cepacia種屬:Burkholderia cepacia
提供形式:凍干粉
安全等級:1
模式菌株:yes
應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:,抗菌防腐劑的含量測定,培養(yǎng)基:測試,產(chǎn)洋蔥伯克菌素,質(zhì)量控制菌株
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:營養(yǎng)肉汁瓊脂:牛肉膏 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。pH7.0。121℃,15min。
生長條件:30℃,好氧洋蔥伯克霍爾德氏菌