抗體的制備過(guò)程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,產(chǎn)品僅用于科研通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見(jiàn)偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱(chēng) Anti-DAPK2/DRP1
中文名稱(chēng) 凋亡相關(guān)蛋白激酶2抗體
別 名 Death associated protein kinase 2; DAK 2; DAK2; DAP kinase related protein 1; DAPK 2; DAPK2; Death associated protein kinase 2; DRP 1; DRP1; DRP-1; MGC119312; DAP kinase 2; DAP kinase related protein 1; DAP kinase related protein 1 beta isoform; DAP-kinase-related protein 1; DAPK 2; DAPK2; DAPK2_HUMAN; Death associated protein kinase 2; Death-associated protein kinase 2; DRP 1; DRP-1; DRP1; MGC119312.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類(lèi)型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog
產(chǎn)品類(lèi)型 一抗
研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞凋亡 激酶和磷酸酶
蛋白分子量 predicted molecular weight: 41kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human DAPK2
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
產(chǎn)品僅用于科研當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無(wú)載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過(guò)濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見(jiàn)。
抗體制備過(guò)程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無(wú)菌采制)
下列是凋亡相關(guān)蛋白激酶2抗體 的相關(guān)熱銷(xiāo)產(chǎn)品:
桃仁英文名稱(chēng):Peach kernel保存:20℃,避光規(guī)格:1g轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子β2一抗(TGFβ2)
降香英文名稱(chēng):Dalbergia odorifera保存:20℃,避光規(guī)格:1g轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子β3一抗(TGFβ3)
前胡(白花前胡)英文名稱(chēng):(Peucedanum praeruptorum)保存:20℃,避光規(guī)格:1g轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子β受體2一抗(TGFβRⅡ,TGFβRⅡ)
茵陳(濱蒿)英文名稱(chēng):Yin Chen (Artemisia scoparia)保存:20℃,避光規(guī)格:1.5g轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子β受體1一抗(TGFβRⅠ,TGFβRⅠ)
郁金(溫郁金)英文名稱(chēng):Turmeric (Wen Yujin)保存:20℃,避光規(guī)格:1g狀腺過(guò)氧化物酶一抗
返魂草(麻葉千里光)英文名稱(chēng):Soul grass (Maba Chisatohikaru)保存:20℃,避光規(guī)格:5g腫瘤壞死因子受體1相關(guān)死亡域蛋白一抗
防風(fēng)英文名稱(chēng):Wind保存:20℃,避光規(guī)格:1g腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子1一抗
西青果英文名稱(chēng):West olive保存:20℃,避光規(guī)格:2g腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子2一抗
白芷英文名稱(chēng):Angelica dahurica保存:20℃,避光規(guī)格:1g生精細(xì)胞凋亡相關(guān)基因4一抗
天麻英文名稱(chēng):Gastrodia elata Blume保存:20℃,避光規(guī)格:0.6g腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體一抗
廣山楂英文名稱(chēng):Wide Hawthorn保存:20℃,避光規(guī)格:4g轉(zhuǎn)狀蛋白一抗
干姜英文名稱(chēng):Dried ginger保存:20℃,避光規(guī)格:2g端粒體復(fù)制結(jié)合因子1一抗
4(N,NDiphenylamino)benzaldehyde 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(N)酪激酶A一抗
Tris(4iodophenyl)amine 質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(GC)酪激酶C一抗(神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體的一種)
七水 Bindschedler's Green Leuco Base 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)原肌球蛋白一抗
異氰 Bis(4iodophenyl)amine 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)促狀受體一抗
水楊 4(Diethylamino)benzaldehyde Diphenylhydrazone 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(N)促狀受體一抗(C端)
鈣激活氯離子通道4抗體Tachioside中文名:別名:分子式:C13H18O8
非受體酪氨酸激酶c-Abl抗體2,4-Dihydroxyphenylacetic acid中文名:2,4-二羥基苯乙酸別名:2,4-Dihydroxybenzeneacetic acid分子式:C8H8O4
2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框65抗體5,7-Dihydroxy-2-isopropylchromone中文名:別名:分子式:C12H12O4
富半胱氨酸肝素結(jié)合蛋白61抗體Piceatannol中文名:白皮杉醇別名:3,3',4,5'-Tetrahydroxystilbene分子式:C14H12O4
細(xì)胞角蛋白5+6抗體Nervogenic acid中文名:別名:4-Hydroxy-3,5-diprenylbenzoic acid分子式:C17H22O3
凋亡相關(guān)蛋白激酶2抗體 StachybotrysatraCorda種屬:StachybotrysatraCorda
分離基物:羊糞
安全等級(jí):1
模式菌株:no
應(yīng)用領(lǐng)域:分解纖維素
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:17
生長(zhǎng)條件:25~28℃黑色葡萄穗霉