"Ramos細(xì)胞:人B淋巴細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):淋巴母細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng):懸浮
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁或懸浮,詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分
細(xì)胞傳代注意事項(xiàng):①傳代培養(yǎng)時(shí)注意無(wú)菌操作并防止細(xì)胞間的交叉污染。所有操作盡量靠近酒精燈火焰。每次只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作。每種細(xì)胞使用一套器材;②每天觀察細(xì)胞形態(tài),掌握好細(xì)胞是否健康的標(biāo)準(zhǔn):健康細(xì)胞的形態(tài)飽滿,折光性好,生長(zhǎng)致密時(shí)即可傳代;③如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有污染跡象,應(yīng)立即采取措施,一般應(yīng)棄置污染的細(xì)胞,如果必須挽救,可加含有抗生素的BBS或培養(yǎng)基反復(fù)清洗,隨后培養(yǎng)基中加入較大量的抗生素,并經(jīng)常更換培養(yǎng)基。傳代細(xì)胞的建系和維持:細(xì)胞系的維持通過(guò)換液傳代再換液、再傳代和細(xì)胞種子凍存來(lái)實(shí)現(xiàn)。對(duì)每一個(gè)細(xì)胞系來(lái)說(shuō)都有其自身的特點(diǎn),要做好建系的維持必須記錄好細(xì)胞檔案,換液傳代和做好細(xì)胞系的管理工作。培養(yǎng)細(xì)胞的凍存及復(fù)蘇:細(xì)胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細(xì)胞凍存在-196℃液氮中,儲(chǔ)存時(shí)間幾乎是無(wú)限的。細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融。
可以這樣說(shuō),對(duì)于需要消化傳代的細(xì)胞,每一次的消化都是對(duì)這個(gè)細(xì)胞存活與否,狀態(tài)好與不好至關(guān)重要的考驗(yàn)。很多同學(xué)都遇到過(guò)這個(gè)問(wèn)題,自己養(yǎng)的細(xì)胞開(kāi)始的幾代長(zhǎng)的還挺好的,可是穿過(guò)幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞不行了,狀態(tài)越來(lái)越差勁了。對(duì)于這個(gè)問(wèn)題,可以非??隙ǖ卣f(shuō),你的消化環(huán)節(jié)出問(wèn)題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以,越長(zhǎng)越差。在消化的過(guò)程中,你加入胰酶后,所有細(xì)胞都在被胰酶消化著,但是我們忽視了一個(gè)問(wèn)題就是,細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)是不一樣的,每一個(gè)細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的,有的貼壁牢固,有的貼壁沒(méi)有那么牢固的,所以,讓所有的細(xì)胞消化同樣的時(shí)間對(duì)細(xì)胞是不公平的,他們受到了差別待遇當(dāng)然會(huì)有脾氣的,大家爭(zhēng)取做到因材施教,比如試試下面的“四步消化法”。(以難消化細(xì)胞為例),具體操作:1)首先不加胰酶,倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍(目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類(lèi)盡量洗掉)。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍,這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來(lái)。再用培養(yǎng)基洗一遍,兩次所得懸液混合傳入新瓶。(你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng),以與后面胰酶消化過(guò)的細(xì)胞對(duì)比觀察看誰(shuí)長(zhǎng)的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對(duì)胰酶的敏感度了)3)吸干凈瓶?jī)?nèi)剩余液體,加入0.3ml左右的胰酶潤(rùn)洗一遍,吸掉棄之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時(shí)置于顯微鏡下觀察,待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時(shí)候立即吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基開(kāi)始吹打,吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng),以與后面及前面的做對(duì)比)4)然后把前面剛吸出來(lái)的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶,如果你們那比較富裕的話,繼續(xù)鏡下觀察,待剩余細(xì)胞間隙明顯,細(xì)胞獨(dú)立開(kāi)來(lái)的時(shí)候,吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)(根據(jù)實(shí)際情況把握)。
細(xì)胞凍存基本方法:1.細(xì)胞:選對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞,收集細(xì)胞24小時(shí)前換液一次。2.計(jì)數(shù):按常規(guī)方法把細(xì)胞制成細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù),令細(xì)胞密度達(dá)5×10(6)/ml,離心去上清,吸入離心管中。3.凍存液:先用培養(yǎng)液9分+DMSO 1分(或甘油)配成10%的DMSO凍存液,按上法一滴滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細(xì)胞重懸。4.分裝:分裝入無(wú)菌安剖中,每安剖加1.5毫升細(xì)胞懸液。5.封口:用塑料安剖時(shí)擰緊瓶口即可;如用火焰封閉安剖口后,仔細(xì)檢查,定要封嚴(yán),必要時(shí)可浸入藍(lán)色液中觀察,為安全起見(jiàn),把安剖縫入紗布小袋中,以防液氮浸入后,融解時(shí)因受熱發(fā)生爆炸傷人;紗袋一端系以線繩,末端扎有小牌,注明:細(xì)胞名稱(chēng),凍存日期,以便日后查找。細(xì)胞株(系)的使用,為醫(yī)學(xué)研究和測(cè)試工作帶來(lái)了極大的方便。但細(xì)胞的傳代是有限制的,長(zhǎng)期連續(xù)傳代的細(xì)胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細(xì)胞的生長(zhǎng)與形態(tài)等會(huì)有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細(xì)胞失去原有的遺傳特性,有時(shí)還會(huì)由于細(xì)胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實(shí)際工作中常需凍存一定數(shù)量的細(xì)胞,以備替換使用。細(xì)胞冷凍與復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。
MDBK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC10細(xì)胞、U-hth74細(xì)胞、HBZY1細(xì)胞
HT-22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC 70細(xì)胞、Lewis lung carcinoma line 1細(xì)胞、Walker 256細(xì)胞
GM00637F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TMD-8細(xì)胞、H766T細(xì)胞、X63-Ag8細(xì)胞
HVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML5細(xì)胞、1.1B4細(xì)胞、BLO 11細(xì)胞
C666-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AM細(xì)胞、WI-38細(xì)胞、AU-Mel細(xì)胞
SUM-159PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs683細(xì)胞、OCI-LY-3細(xì)胞、LC2/Ad細(xì)胞
SW 579細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ATN-1細(xì)胞、WM 115細(xì)胞、EPC細(xì)胞
MCA205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB-6細(xì)胞、COLO 320DM細(xì)胞、293c18細(xì)胞
NCIH661細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:YTMLC-90細(xì)胞、H1618細(xì)胞、HUVEC-C[HUVEC]細(xì)胞
WM 239-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCP1細(xì)胞、H-2106細(xì)胞、TE353.SK細(xì)胞
MES23.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-1040細(xì)胞、L Wnt-3A細(xì)胞、SN12CPM6細(xì)胞
HLCL9B10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1599細(xì)胞、8402細(xì)胞、BSC40細(xì)胞
NCIH64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo-201細(xì)胞、HL-1細(xì)胞、HOP62細(xì)胞
JB-6 Cl 30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-343 MG細(xì)胞、EC-109細(xì)胞、V79細(xì)胞
Ku812F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:159PT細(xì)胞、GC-2細(xì)胞、CD-18細(xì)胞
KCL-22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Central Adrenergic TH-expressing a細(xì)胞、MKN28細(xì)胞、SaOS細(xì)胞
SKN-AS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1238細(xì)胞、Glioma-261細(xì)胞、Earle's L cells細(xì)胞
Panc 04.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mono-Mac-1細(xì)胞、T2(174 x CEM.T2)細(xì)胞、L428細(xì)胞
HeLa/DDP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320細(xì)胞、KATO 3細(xì)胞、L-6 myoblast細(xì)胞
WM451Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS 1.Tes細(xì)胞、U-138 MG細(xì)胞、NK10a細(xì)胞
A-2058細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-2-OS細(xì)胞、MC-3T3細(xì)胞、PK15細(xì)胞
HEK293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK62a細(xì)胞、Panc 4.03細(xì)胞、L-540細(xì)胞
BHP10-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375-SM細(xì)胞、MES23.5細(xì)胞、SKGT2細(xì)胞
HF-91細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-7細(xì)胞、10T1/2細(xì)胞、Ramos-RA1細(xì)胞
ND7/23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BA/F3細(xì)胞、LN229細(xì)胞、P3X63 Ag8細(xì)胞
16-HBEo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Normal Rat Kidney-49F細(xì)胞、OSC-19細(xì)胞、NCIH1915細(xì)胞
COLO 679細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAOV4細(xì)胞、BHK 21細(xì)胞、NCIH2066細(xì)胞
SW-527細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293E細(xì)胞、Capan-1細(xì)胞、PASMCS細(xì)胞
NCIH1651細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KG-1細(xì)胞、HuT 78細(xì)胞、NCIH1792細(xì)胞
Rh30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 115細(xì)胞、Ramos.G6.C10細(xì)胞、JM-Jurkat細(xì)胞
TGW-I-nu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOK細(xì)胞、N1E-115細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細(xì)胞
TOG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Epidermoid carcinoma #2細(xì)胞、H441細(xì)胞、CCRF-SB細(xì)胞
HCC-94細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPE D407細(xì)胞、8226/S細(xì)胞、H2081細(xì)胞
CORL23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DoTc2細(xì)胞、Madin Darby Bovine Kidney細(xì)胞、RF/6A細(xì)胞
BRL3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI-164細(xì)胞、NTera-2D1細(xì)胞、COLO-205細(xì)胞
OVCA432_Bast細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-A549細(xì)胞、130-T細(xì)胞、SW-1271細(xì)胞
IFRS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-423細(xì)胞、GM06141細(xì)胞、TE13細(xì)胞
H209細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HN6細(xì)胞、SKHEP1細(xì)胞、SPCA1細(xì)胞
PNT1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPE-1細(xì)胞、HCCLM6細(xì)胞、HLEC-SRA 01/04細(xì)胞
C 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-L1細(xì)胞、NT2D1細(xì)胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1細(xì)胞
WIL2 S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OSKM-1細(xì)胞、SW-1222細(xì)胞、HCC-2218細(xì)胞
SF295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2081細(xì)胞、Lu-165細(xì)胞、PK136細(xì)胞
CMK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-411細(xì)胞、CV-1細(xì)胞、NCI-H128細(xì)胞
BJ1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-330細(xì)胞、T241細(xì)胞、NCI-H510A細(xì)胞
OVMANA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-5細(xì)胞、LIXC-002細(xì)胞、PA317細(xì)胞
N-2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL16細(xì)胞、B16-BL6細(xì)胞、NCI.H226細(xì)胞
LS-411N細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:N-87細(xì)胞、H1648細(xì)胞、MESSA細(xì)胞
COV504細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H341細(xì)胞、Rh30細(xì)胞、Hs 27細(xì)胞
NCIH2009細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FD-LSC-1細(xì)胞、CCD1095Sk細(xì)胞、CT26.WT細(xì)胞
WC00097細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0202細(xì)胞、MFE-296細(xì)胞、SEM細(xì)胞
NCIH2009細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FD-LSC-1細(xì)胞、CCD1095Sk細(xì)胞、CT26.WT細(xì)胞
K-1735細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:786.O細(xì)胞、Calu 6細(xì)胞、HSAS3細(xì)胞
PANC-03-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT-HME-1細(xì)胞、G 401細(xì)胞、HEK.EBNA細(xì)胞
H-4-II-E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:8505C細(xì)胞、SNUC2A細(xì)胞、U-373-MG細(xì)胞
GOS-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-837細(xì)胞、8305C_1細(xì)胞、OV-90細(xì)胞
COR-L279細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS1細(xì)胞、Caov-4細(xì)胞、HCC0015細(xì)胞
HR8348細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL10細(xì)胞、LS174T細(xì)胞、DMS153細(xì)胞
HME-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACT-1細(xì)胞、GM02219C細(xì)胞、MIHA細(xì)胞
OVCAR.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero C1008細(xì)胞、SKNEP1細(xì)胞、Madin Darby Canine Kidney細(xì)胞
SKMEL28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 05.04細(xì)胞、Pt K1細(xì)胞、PC3M-1E8細(xì)胞
BHP10-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375-SM細(xì)胞、MES23.5細(xì)胞、SKGT2細(xì)胞
PC-3M IE8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vertebral Cancer of the Prostate細(xì)胞、MRC-V細(xì)胞、AML-12細(xì)胞
C3H 10T1/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CA 46細(xì)胞、H2126細(xì)胞、HCC44細(xì)胞
HCC202細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NKM1細(xì)胞、WEHI 164 TC細(xì)胞、SUDHL16細(xì)胞
MOLM-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI N87細(xì)胞、Sol8細(xì)胞、WEHI3B細(xì)胞
G-361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-118MG細(xì)胞、U-87MG細(xì)胞、HCMEC細(xì)胞
MyLa2059細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL-24細(xì)胞、PC 61 5.3細(xì)胞、NCI-H1781細(xì)胞
CEM-CCRF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLC-8024細(xì)胞、A7r5細(xì)胞、COLO 320HSR細(xì)胞
HTR8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JHH2細(xì)胞、Farage OL細(xì)胞、HDQP1細(xì)胞
D10G41細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-102細(xì)胞、AR4IP細(xì)胞、bEnd3細(xì)胞
WERI-Rb 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4-2細(xì)胞、UPCI-SCC-90細(xì)胞、ND7/23細(xì)胞
Walker 256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-85-1細(xì)胞、SKG-3a細(xì)胞、WPMY-1細(xì)胞
GM00637B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Neukoplast細(xì)胞、NCIH292細(xì)胞、H4IIE細(xì)胞
SF126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML-3細(xì)胞、LMTK-細(xì)胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]細(xì)胞
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