"TE15細胞：小鼠B淋巴細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣
細胞生長：懸浮
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
細胞培養(yǎng)方面注意的幾點：無菌意識要強：實驗進行前，超凈臺以紫外燈照射３０分鐘滅菌，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟超凈工作臺風(fēng)扇運轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置，其它個人實驗用品用完應(yīng)立即拿出。實驗用品以７０%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應(yīng)在中央無菌區(qū)域，一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約４５°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經(jīng)干細胞，有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實驗?zāi)康闹饕亲隹寡趸脱趸矫娴?，而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:４℃冰箱全溶后再分裝，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指５６℃，３０分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到５６℃后，將血清放入，待溫度升高到５６℃后計時，一般５分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因為會造成沉淀物之顯著增多，且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。
可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)好與不好至關(guān)重要的考驗。很多同學(xué)都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況把握）。
細胞傳代時消化的問題：可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗。很多同學(xué)都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況你自己把握）。這是第四步。其實還可以有第五步，對于特別難消化的細胞和對胰酶特別敏感的細胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對細胞的損傷降到最低，保證細胞的狀態(tài)能夠。當然了，如果細胞是屬于那種很容易消化的細胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實驗中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細胞時把各步消化的細胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實驗的開展。將細胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對細胞的損傷之外，還有一個更重要的作用就是，可以程度地把細胞吹打成單個單個的狀態(tài)，不成片不連體。
SNU251細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 513細胞、L-Wnt-3A細胞、AN3-CA細胞
RIN m5F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2141細胞、ROS-17/2.8細胞、SF 295細胞
UPCI-SCC090細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L M (TK-)細胞、Panc 1細胞、NCI.H460細胞
THLE-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human podocyte細胞、SKMES細胞、95D細胞
MHHCALL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-24細胞、Mouse Forestomach Carcinoma細胞、WM35細胞
COLO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 766T細胞、OACP4 C細胞、Hs-675-T細胞
PLC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs739T細胞、RPMI-1788細胞、OVCA-432細胞
T9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA801D細胞、CWR22-R1細胞、NCIH250細胞
MDA415細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2135細胞、A 375細胞、HPDLF細胞
MDAMB175細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FCCH1018細胞、Reuber H-35細胞、H292細胞
SK-ML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR L279細胞、Sp2/0-Ag14細胞、J 111細胞
HONE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T2 (174 x CEM.T2)細胞、TR-146細胞、Rin-M-5F細胞
H-748細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mel624細胞、MARC 145細胞、SK-RC 39細胞
CAL 12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK2細胞、HO8910/PM細胞、IPLB-SF 21細胞
NCI-H1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD19-Lu細胞、CNE1-LUC細胞、Scott細胞
AHH1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GOTO細胞、DKMG細胞、NCI-HUT-596細胞
AHH1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GOTO細胞、DKMG細胞、NCI-HUT-596細胞
OVCAR-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IAR20細胞、NK-92MI細胞、Hs 895.T細胞
SVHUC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2052細胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞、NCI-H716細胞
JEG-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-295R細胞、GM02131A細胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞
SGC-7901細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH596細胞、NK-92細胞、V-79-4細胞
751-NA-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMA-560細胞、SW 480細胞、KYSE 70細胞
BHK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TEC細胞、I90細胞、H2085細胞
Anip-973細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D 407細胞、HR-8348細胞、RKOE6細胞
CCK81細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLE-B3細胞、IOSE29細胞、NCI H23細胞
B104 [Rat neuroblastoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C57/B6-L細胞、HHL5細胞、C166細胞
DoTc2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 688(A).T細胞、FU-OV-1細胞、MV4:11細胞
NCIADRRES細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RWPE-1細胞、CEL細胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞
NK-92MI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SLMT1細胞、SUPB-15細胞、NCI-SNU-407細胞
Be-Wo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-022細胞、SIRC細胞、3T3(A31)細胞
NCIH2009細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FD-LSC-1細胞、CCD1095Sk細胞、CT26.WT細胞
MPASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc_03_27細胞、H-1672細胞、T-HSC細胞
SKES1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madison 109細胞、Hs819.T細胞、HONE1細胞
U-118-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP4細胞、Hs611T細胞、NB-9細胞
KGN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SO-RB50細胞、HS688AT細胞、SKCO1細胞
PL 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U 266細胞、HT144-mel細胞、D10.G4.1細胞
Jeko1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mel-RM細胞、MMVECs細胞、ChaGo-K1細胞
HOSEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Toledo細胞、Hs-27細胞、P-36細胞
H-498細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NHRF細胞、SNU368細胞、COLO 320 DM細胞
RL-952細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16細胞、BEND細胞、TE3A細胞
HS-766T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1353細胞、NCI-H2085細胞、C32r細胞
Hepa1-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Dx5細胞、CATH-a細胞、SAS細胞
RS(4;11)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞、MUTZ1細胞、THLE2細胞
CTLL(2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU-19-19細胞、SLMT-1細胞、MC9細胞
NCIH716細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03573A細胞、3D4/21細胞、AMJ2C8細胞
A20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE2細胞、HME1細胞、95C細胞
HeLaS3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP-N-RT-BM細胞、HCC0202細胞、AC29細胞
SKLU01細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM 239細胞、MM-1S細胞、ATDC-5細胞
2BS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：alphaTC1 Clone 6細胞、NCI-H2030細胞、H69細胞
CHOK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC20細胞、R 1610細胞、KHYG-1細胞
P3/NS1/1-Ag4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2444細胞、IR 983F細胞、LC1細胞
Jurkat (clone E6-1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW756細胞、CEM-CCRF (CAMR)細胞、MOLT-16細胞
IM-95細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-204細胞、AMJ2-C8細胞、JB6 Cl 30-7b細胞
NCIH82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT55細胞、NTera 2細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞
NCI-H1355細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1618細胞、COLO-1細胞、T 24細胞
OVCAR-433細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-435 S細胞、BC3H1細胞、Hs578Bst細胞
OVCAR-433細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-435 S細胞、BC3H1細胞、Hs578Bst細胞
IBMF-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC/mHSC細胞、SW954細胞、L5178-R細胞
RPMI 8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC1細胞、A204細胞、Intestinal Epithelioid細胞： No. 18細胞
6-T CEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：1.1B4細胞、TR146細胞、Walker256細胞
DHL8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Chondrosarcoma Swarm細胞、Hu-P-T4細胞、SBC5細胞
CAL 39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM1S細胞、NCI-H1522細胞、MMAc.SF細胞
JJN3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DrG細胞、SK-RC 39細胞、MiaPaca.2細胞
TK.10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa/DDP細胞、ECV-304細胞、TOV112細胞
CPAE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OSRC2細胞、LS411細胞、SW48細胞
KLM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPE1細胞、KALS1細胞、MEL細胞
NCI-H2023細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G-292細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞、HOS (TE85)細胞
KU-812F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：E304細胞、LAN-6細胞、BpRc1細胞
Tu-212細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-475細胞、NCI-H526細胞、V79-4細胞
NCI747細胞系相關(guān)產(chǎn)品：N87細胞、KYSE0520細胞、NCI-H735細胞
NCI-H1385細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCCSUP細胞、LC-MS細胞、SKUT-1細胞
NCI H157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-606-T細胞、H128細胞、NCIH295R細胞
UPCI:SCC90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat (clone E6-1)細胞、SBC5細胞、HET-1A細胞
JIMT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mo 59J細胞、KLM-1細胞、293-F細胞
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