"Nb2-11細胞:大鼠淋巴瘤細胞系
細胞背景資料:惡性淋巴瘤;雄性;Nb
細胞形態(tài):淋巴母細胞樣
細胞生長:懸浮
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性:懸浮
購買細胞注意事項:1)收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系;2)仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等;3)用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,將細胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時多數(shù)細胞均會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常,請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細胞無活力,請拍下照片及時和我們聯(lián)系,信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次;4)建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流?!炯毎麄鞔僮鞑襟E】一、貼壁細胞傳代:1)提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi);2)吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞;3)加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用;4)用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡;5)將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。二、懸浮細胞傳代:1)將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min;2)棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液;3)將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內(nèi)皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好,譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應該留很少量的細胞,這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞,如果細胞形態(tài)不好,(或者細胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進行預吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細胞建議只吹打,不消化)其次,把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。通常稱之為“二傳”。如果一次效果還不理想,可重復多次。直到找到細胞上乘形態(tài)。其中要注意,結(jié)合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。
因為細胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系,大部分的細胞都是要成片生長的,尤其是對于貼壁細胞,單個細胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細胞抱團的話,傳代后細胞是不能貼壁的,這樣抱團的細胞就會死亡。所以,消化傳代的時候一定要將細胞消化成單個單個的獨立狀態(tài),這個啊是非常考究你的功夫的!細胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個,因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細胞。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開,受力點就是細胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴格控制好消化的程度啊,這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來,又不能太過,一吹就整片脫落,要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-2細胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點就是一定不能等到細胞長滿的時候才去消化傳代。要在細胞長到70%左右的時候就要傳代了,一旦發(fā)現(xiàn)細胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞,你在洗的時候如果是用無血清1640去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣,用1640培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話,可以用PBS來洗,洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的,對于有些細胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清,防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先,是很關(guān)鍵的一點。先補充這么多,還會后續(xù)更新。再補充一點:傳代時PBS洗是很重要的一步,最近發(fā)現(xiàn),用PBS就可以把細胞消化開來。加入PBS放置10-15分鐘,有些需要更長的時間,等到細胞一個個分離開來的時候,就可以直接吹打下來,但是和胰酶消化一樣,要控制好時間,不能時間太過了,要不然損傷細胞,細胞不容易成活,狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細胞是很管用的。有些細胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候,或者臨時沒有胰酶了,可以選用此方法。不過一定要試試,看是否適合你的細胞。
U138-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HN-6細胞、ST-2細胞、BIU87細胞
PNT1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPE-1細胞、HCCLM6細胞、HLEC-SRA 01/04細胞
UPCI-SCC-154細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-28/I2細胞、NCIH209細胞、WM-115細胞
NS20-Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:F442-A細胞、HeLa229細胞、FM-88細胞
HPDE6c7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16F1細胞、BCPAP細胞、RCC 786-O細胞
A427細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD 841 CoN細胞、SW 954細胞、RH-35細胞
HuPT3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LU165細胞、624-mel細胞、COLO-738細胞
Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV1/P細胞、HFL細胞、RBSMC細胞
HCA7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAKI1細胞、H128細胞、Hs-606-T細胞
ES2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI AML5細胞、ChaGo-K1細胞、32D/cl3細胞
SVEC 4-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-711細胞、RMG-1細胞、GLC-82細胞
GM04678細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P388細胞、L cells (TK-)細胞、GCT細胞
LN229細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 870.T細胞、H647ell細胞、Swiss3T3細胞
GM02132C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HR-8348細胞、GLC82細胞、MC57G細胞
HEK293E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-7951細胞、H920細胞、Tn-5B1-4細胞
G-401細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH889細胞、OC316細胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞
G-401細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH889細胞、OC316細胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞
UMR 106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1990細胞、BSC1細胞、PC-3M-IE8細胞
A-673細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2085細胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞、KG-1a細胞
H-1650細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-SF 21細胞、DAKIKI Clone 1細胞、U 266細胞
CAL 78細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-387細胞、U138-MG細胞、MB49細胞
CAL-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16 subline B78細胞、EA.hy 926細胞、MC-3T3-E1細胞
TALL-104細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mino細胞、LTEP-sm 1細胞、HEK-293-EBNA細胞
HOCF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Psi2-DAP細胞、RPMI1788細胞、Clone Y1細胞
BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UO-31細胞、MC-38細胞、NIH:OVCAR-8細胞
H2052細胞系相關(guān)產(chǎn)品:K-562細胞、P560細胞、L cells (TK-)細胞
Mo 59J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10 clone 4細胞、HuTu 80細胞、Ca759細胞
PFSK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DC 2.4細胞、Hs-274-T細胞、TK 10細胞
SW 948細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGc80-3細胞、U-87-MG細胞、Murine Thymic Epithelial細胞: 1細胞
HIT-T15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SMA560細胞、H747細胞、SNU886細胞
NK92-MI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPP 89細胞、CHP 126細胞、BRL3A細胞
P3/X63-Ag8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC 97細胞、MOVAS細胞、HCC-366細胞
H1792細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IM9細胞、Caco-2BBe細胞、MRC-V細胞
BC3H1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T9細胞、OC 316細胞、NS-20Y細胞
TM-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OAC-P4C細胞、HEC-1-B細胞、CCD966SK細胞
WEHI-164細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC 3細胞、3T3(A31)細胞、PC-3M-1E8細胞
PA-TU S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H322T細胞、IMR 32細胞、NCI-ADR-RES細胞
HTh-74細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mel-MeWo細胞、HSC-I細胞、YD-15細胞
NCI-SNU-182細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIC細胞、WEHI-231細胞、PNT1/A細胞
P-388細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACC-3細胞、SKNBE2細胞、HLF細胞
RM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ChaGo K-1細胞、HOP-92細胞、159PT細胞
WRL-68細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS411細胞、MeT-5A細胞、SUDHL-5細胞
Centre Antoine Lacassagne-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mv 1 Lu (NBL-7)細胞、High 5細胞、CD 18細胞
MCF-7B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat E6.1細胞、TFK-1細胞、NCIH1703細胞
C2BBe1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3-M細胞、GT39細胞、HPAF2細胞
HCC1171細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Wistar Institute-38細胞、MiaPaCa-2細胞、DSL-6A/C1細胞
TE-671細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM8細胞、P3/NS1/Ag4-1細胞、ROS 17/28細胞
H735細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 934.T細胞、IPLB-Sf21AE細胞、CAL 12細胞
NCIH211細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH:OVCAR-10細胞、MDA-361細胞、NCI-H740細胞
RH7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KALS-1細胞、HCC-827細胞、NCI-128細胞
Tu 212細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-187細胞、769P細胞、ssMCF7細胞
NCIH69細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RD 2細胞、H-1963細胞、ASPC1細胞
Hepa1-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Dx5細胞、CATH-a細胞、SAS細胞
NCI-H64細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HepaRG細胞、D-324 Med細胞、McA-RH7777細胞
DC 2.4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:526細胞、HFLS-OA細胞、NBL-S細胞
CAL51細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB231細胞、HEK/293細胞、HSC細胞
SK-Mel1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3M-2B4細胞、OVCAR-433細胞、Ketr3細胞
SU-DH-L5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC 61細胞、RetroPack PT67細胞、EBTr細胞
LN-18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SLK細胞、RH30SJ細胞、WM 266-4細胞
UPCI:SCC154細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PTK1細胞、Lu99A細胞、HSC3細胞
MDA-MB-134 VI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G292細胞、Centre Antoine Lacassagne-33細胞、Plaepi 34細胞
HCC-366細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2591細胞、A 549細胞、LC-1細胞
ECV細胞系相關(guān)產(chǎn)品:S91細胞、NCIH522細胞、H1954細胞
PL-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE-29細胞、NCIH508細胞、NPC-039細胞
SVEC4-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hx147細胞、CORL88細胞、Hs 729.T細胞
Hs1.Tes細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hCMEC/D3細胞、UT7細胞、RPTEC/TERT 1細胞
SNK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD 966SK細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞、H-2085細胞
LCMS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KRC-Y細胞、Tj-905細胞、CT-26細胞
HPAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JVM-3細胞、H2198細胞、YES2細胞
UMUC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLE細胞、HFL-1細胞、H-2029細胞
Hs 606細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L132細胞、KPNRTBM1細胞、E304細胞
NCI-H378細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WRL-68細胞、Intestinal Porcine Epithelial細胞:-1細胞、Huh 7.5.1細胞
UPCI-SCC-154細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-28/I2細胞、H-727細胞、BPH-1細胞
Mv 1 Lu (NBL-7)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBL 100細胞、NCI-H1385細胞、TE14細胞
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