"Nb2-11 Lymphoblastoid cells大鼠淋巴瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:惡性淋巴瘤;雄性;Nb
細(xì)胞形態(tài):淋巴母細(xì)胞樣
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟:常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn):(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-196℃,使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應(yīng)防止焊接部裂開(kāi)。(3)在裝入液氮時(shí),要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo),使液氮直達(dá)瓶底,如有專(zhuān)用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時(shí)更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無(wú)色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤校碴逞b1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無(wú)勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱(chēng)和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類(lèi)及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過(guò)夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時(shí),再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時(shí),再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時(shí),最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存,但為妥善起見(jiàn),凍存半年后,取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況,然后再繼續(xù)凍存。
Hs 445細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OP9細(xì)胞、TK.10細(xì)胞、H-1963細(xì)胞
NCI-H1944細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL2H3細(xì)胞、RA細(xì)胞、NCI-H596細(xì)胞
Calu-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GTL-16細(xì)胞、SW-13細(xì)胞、GM06141細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng):懸浮
Nb2-11 Lymphoblastoid cells大鼠淋巴瘤細(xì)胞系
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞復(fù)蘇基本方法:1.從液氮罐中取出安剖;有時(shí)因安剖未封嚴(yán),浸入了液氮,取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸,因此應(yīng)帶有防護(hù)眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時(shí)搖動(dòng),盡快解凍。3.剪開(kāi)紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺(tái)上打開(kāi)蓋,用吸管吸出細(xì)胞懸液,裝入離心管中,再補(bǔ)加10ml培養(yǎng)液,吹打使細(xì)胞懸浮。4.低速離心(500~1000轉(zhuǎn)/分)5分鐘,取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。5.加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后,再移裝入培養(yǎng)瓶中,置溫箱培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T25 flask細(xì)胞時(shí),處理方式為:在寄送過(guò)程中,為避免起泡造成細(xì)胞脫落死亡,T25 flask均加滿(mǎn)培養(yǎng)基。請(qǐng)檢查flask外觀,并于顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀況和有無(wú)污染現(xiàn)象,若有任何問(wèn)題,不要打開(kāi)蓋子,請(qǐng)立即通知細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室。將原封之T25 flask靜置于37°C,5%CO2培養(yǎng)箱中,使細(xì)胞回溫至37°C,并讓運(yùn)送過(guò)程中少數(shù)脫落的細(xì)胞可再附著生長(zhǎng)。隔天后,于無(wú)菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用),僅留約5-10ml培養(yǎng)基于flask內(nèi),依一般培養(yǎng)方式再將細(xì)胞置入培養(yǎng)箱中,或細(xì)胞已長(zhǎng)滿(mǎn)盤(pán),則將細(xì)胞做傳代培養(yǎng)。
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
HEK 293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ESC-410細(xì)胞、LC-1/sq細(xì)胞、RGC5細(xì)胞
Ramos 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBE 135-E6/E7細(xì)胞、SK-N-BE-2c細(xì)胞、Sc-1細(xì)胞
SY5Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DBTRG-05MG細(xì)胞、BHT-101細(xì)胞、TE11細(xì)胞
NCI-BL2141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UO31細(xì)胞、H3255_DA細(xì)胞、HO8910/PM細(xì)胞
MH-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細(xì)胞、PC12(高分化)細(xì)胞、KE39細(xì)胞
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
Nb2-11 Lymphoblastoid cells大鼠淋巴瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:懸浮
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代?體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長(zhǎng)接觸抑制的特性,也就是說(shuō)當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候,它就會(huì)停止生長(zhǎng),及時(shí)傳代后,細(xì)胞的生長(zhǎng)得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長(zhǎng)必需成分如谷眈肢或生長(zhǎng)因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染;試劑保存不當(dāng);比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度;讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補(bǔ)加谷酷肢或生長(zhǎng)因子等;用無(wú)抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測(cè)支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺(tái)操作細(xì)胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí),必須注意安全,預(yù)防冷凍管爆裂。
EC-109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRIF細(xì)胞、P3-X63Ag8.653細(xì)胞、SUDHL-1細(xì)胞
H1435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc5.04細(xì)胞、NCIH1395細(xì)胞、190PT細(xì)胞
SKNBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PZ-HPV-7細(xì)胞、L-132細(xì)胞、H-446細(xì)胞
U251n細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IM-9細(xì)胞、NCIH748細(xì)胞、H-1672細(xì)胞
OCI-Ly7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK 49F細(xì)胞、HFT 8810細(xì)胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細(xì)胞
Malme-3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H920細(xì)胞、HEK-EBNA細(xì)胞、Hs 343.T細(xì)胞
H2198細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Malme3M細(xì)胞、NK10a細(xì)胞、TB-1 Lu細(xì)胞
SW 1463細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC202細(xì)胞、H-345細(xì)胞、GT38細(xì)胞
BEL 7405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H128細(xì)胞、D-341細(xì)胞、IOSE80UBC細(xì)胞
Ramos (RA 1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hESC細(xì)胞、K7M2 wt細(xì)胞、SW-1990細(xì)胞
Nb2-11 Lymphoblastoid cells大鼠淋巴瘤細(xì)胞系
FRTL-5 Cl 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63Ag8.653細(xì)胞、HUCEC細(xì)胞、MCF-7/AdrR細(xì)胞
RWPE-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C 643細(xì)胞、SF-539細(xì)胞、NT2D1細(xì)胞
3T3 clone A31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EC-109細(xì)胞、NB-4細(xì)胞、BDCM細(xì)胞
A20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNE2細(xì)胞、HME1細(xì)胞、95C細(xì)胞
KYSE-70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK/293細(xì)胞、NCI-H82細(xì)胞、Nthy-ori 3.1細(xì)胞
PC 12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-2650細(xì)胞、RPMI 6666細(xì)胞、SKN-SH細(xì)胞
Hs839T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-87MG ATCC細(xì)胞、PANC0203細(xì)胞、SK-Hep1細(xì)胞
Human ErythroLeukemia細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBC-1細(xì)胞、LAN6細(xì)胞、GM3570細(xì)胞
DMS53細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ca-Ski細(xì)胞、L428細(xì)胞、H1836細(xì)胞
P30-OHK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA468細(xì)胞、KU812-F細(xì)胞、H441細(xì)胞
NCIH740細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:95C細(xì)胞、NCI-H3255細(xì)胞、CCC-HHM-2細(xì)胞
HUASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HC11細(xì)胞、SKLU01細(xì)胞、hTERT-HME1細(xì)胞
hTERT RPE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGY-7703細(xì)胞、CCRFCEM細(xì)胞、G519細(xì)胞
Hs675細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1755細(xì)胞、Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞、Panc 1細(xì)胞
GM03569D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSTO-211H細(xì)胞、MDA MB 175 VII細(xì)胞、HL-60 clone15細(xì)胞
CCRFCEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM-1S細(xì)胞、SR786細(xì)胞、HTori:3細(xì)胞
H-596細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-661細(xì)胞、CAL62細(xì)胞、Tb1Lu細(xì)胞
HEK-AD293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KASUMI1細(xì)胞、ROS1728細(xì)胞、LA-N-5細(xì)胞
HSC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2081細(xì)胞、Nb2細(xì)胞、HUCEC細(xì)胞
KYSE-30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:95-D細(xì)胞、NCTC929細(xì)胞、3T3 L1細(xì)胞
BC-3-H-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP126細(xì)胞、Lewis Lung細(xì)胞、NBL-3細(xì)胞
LS-174細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OLN-93細(xì)胞、NCI-H1703細(xì)胞、HCC-2279細(xì)胞
RDES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC-4B/C細(xì)胞、CD 18細(xì)胞、BT 549細(xì)胞
C-33-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PVEC細(xì)胞、293c18細(xì)胞、NCI-H2107細(xì)胞
C-26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-878細(xì)胞、NS-1-Ag4-1細(xì)胞、J-774A.1細(xì)胞
HCC-1833細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細(xì)胞、Panc 5.04細(xì)胞、HOCF細(xì)胞
Bovine Turbinate細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MARC-145細(xì)胞、TCC-PAN2細(xì)胞、RPMI-1846細(xì)胞
H-1105細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UWB1289細(xì)胞、Pt K2 (NBL-5)細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細(xì)胞
SK-N-BE(2)C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB157細(xì)胞、NCI-H64細(xì)胞、J-111細(xì)胞
FDCP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT4P細(xì)胞、CCRF/CEM細(xì)胞、COR-L23細(xì)胞
231-luc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BTT739細(xì)胞、HCC-2185細(xì)胞、RPE1-hTERT細(xì)胞
IOSE-80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細(xì)胞、LO2細(xì)胞、H1781細(xì)胞
NCI-H125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J82COT細(xì)胞、SKMEL28細(xì)胞、HT144-mel細(xì)胞
22Rv-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC7901細(xì)胞、HCC-70細(xì)胞、Monomac-1細(xì)胞
NKT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MASMC細(xì)胞、Tca8113細(xì)胞、SKMEL5細(xì)胞
Co 115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO829細(xì)胞、JHH7細(xì)胞、NCIH1688細(xì)胞
NCI-H460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK Mel28細(xì)胞、NCI-H1793細(xì)胞、SW 480細(xì)胞
L-M[TK-]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRTL 5細(xì)胞、H2286細(xì)胞、C57 Mouse Tumor 93細(xì)胞
MDAMB134VI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:R2C細(xì)胞、HCC0015細(xì)胞、RPMI 1846細(xì)胞
NBLS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEF細(xì)胞、RT-BM 1細(xì)胞、RK 13細(xì)胞
STC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tu-686細(xì)胞、P3-NS1/1Ag 4.1細(xì)胞、NIH/3T3細(xì)胞
ketr 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTSMC細(xì)胞、Granta-519細(xì)胞、OVCAR 4細(xì)胞
H292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU620細(xì)胞、BALB/3T3 clone A31細(xì)胞、NCI-H157細(xì)胞
NIH:OVCAR-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63-Ag8.653細(xì)胞、QBI-HEK 293A細(xì)胞、IEC-6細(xì)胞
HCC-1937細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBMEC細(xì)胞、OE21細(xì)胞、MDAMB330細(xì)胞
RL-952細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16細(xì)胞、BEND細(xì)胞、TE3A細(xì)胞
NCCIT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-929細(xì)胞、Ca Ski細(xì)胞、NPC-TW01細(xì)胞
CCRF.CEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCIAML2細(xì)胞、SUDHL-16細(xì)胞、Hs 688(A).T細(xì)胞
G401細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PaTu-8988s細(xì)胞、GM03571細(xì)胞、H322細(xì)胞
SW1088細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63NS1細(xì)胞、SUDHL-2細(xì)胞、SW-1573細(xì)胞
Ca759細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:130T細(xì)胞、C3H10T1/2CL8細(xì)胞、OAC-P4C細(xì)胞
Nb2-11 Lymphoblastoid cells大鼠淋巴瘤細(xì)胞系
MDA134細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL 1細(xì)胞、H-1993細(xì)胞、MDCK細(xì)胞
MES-SA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-12A細(xì)胞、SUM 190細(xì)胞、CAL120細(xì)胞
CAL-120細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ishikawa細(xì)胞、Balb/c 3T3細(xì)胞、MES23.5細(xì)胞
SKNBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PZ-HPV-7細(xì)胞、NCIH2073細(xì)胞、MGH-UI細(xì)胞
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