"SR Lymphoblastoid cells人間變性大細胞淋巴瘤細胞系
細胞背景資料：間變性大細胞淋巴瘤；男性
細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣
細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。
KYSE70細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TF-1細胞、H-1838細胞、52PE細胞
GC-2spd(ts)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞、TMD8細胞、SKNBE-1細胞
SK MEL 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA 420細胞、AKR細胞、Case 3細胞
細胞生長：懸浮
SR Lymphoblastoid cells人間變性大細胞淋巴瘤細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前，細胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存：計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存：使用分離試劑從基層分離細胞，分離時盡可能溫和，使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細胞，確定有活力細胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細胞/ml密度，在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
SCC25細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-940細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞、P3-Jiyoye細胞
CAKI.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ChA1細胞、NKM1細胞、HGMC細胞
Ca Ski細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tb 1 Lu (NBL-12)細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞、D-407細胞
P3/X63/Ag8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1666細胞、HFSF細胞、CAL-62細胞
H209細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HN6細胞、SKHEP1細胞、SPCA1細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
SR Lymphoblastoid cells人間變性大細胞淋巴瘤細胞系
細胞生長特性：懸浮
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應(yīng)，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
HCC-2218細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WRL 68細胞、SCC4細胞、RT-BM 1細胞
Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs600T細胞、NCI-SNU-182細胞、NRK clone 52E細胞
SKRC-52細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VA-ES-BJ細胞、Ly19細胞、Sci-1細胞
Me Wo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB453細胞、SUM 159PT細胞、SW 1417細胞
SKOV3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA 1386細胞、3T3-L1細胞、SW-1088細胞
H-1793細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC-10細胞、Swiss 3T6細胞、SCC-25細胞
NCIH1793細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-324 Med細胞、GM04154B細胞、NCIH82細胞
Mouse podocyte細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC 813細胞、MEC-1細胞、L5178Y-R細胞
IM95細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CORL279細胞、Nakata-1細胞、Panc_04_03細胞
MN 60細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H719細胞、639-V細胞、MZCRC1細胞
SR Lymphoblastoid cells人間變性大細胞淋巴瘤細胞系
FU-MMT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KG-1a細胞、H-522細胞、SK-Mel 2細胞
MDA-435細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA-10 (Clone 4)細胞、SK-RC-20細胞、F-36P細胞
EBTr (NBL-4)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep3B細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞、HHL5細胞
QGY細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-1112sk細胞、IPLB-SF-21細胞、HCC-4006細胞
Potorous tridactylus Kidney 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco-2BBe細胞、Eca-109細胞、H157細胞
Jurkat clone A3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LL/2 (LLC1)細胞、RTMC細胞、RIN m5F細胞
L-M(TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GB-1細胞、BALB/3T3細胞、KMM1細胞
TK.10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa/DDP細胞、ECV-304細胞、TOV112細胞
SKHEP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat 1細胞、Human Liver-7702細胞、KHYG1細胞
HEK293-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63Ag8.653細胞、SKG3A細胞、B4G12細胞
COLO 320細胞系相關(guān)產(chǎn)品：THLE-2細胞、UM-UC-3細胞、NCI-H1876細胞
C22細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR 420細胞、Ca759細胞、NCIH1417細胞
RL95-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Clone 166細胞、GM03570細胞、Molm 13細胞
CAL 33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO1-N1細胞、HOP 92細胞、KM932細胞
Swiss3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T6-Swiss albino細胞、NCI-BL6細胞、NCIH661細胞
HCC0070細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1395細胞、TO 175.T細胞、DHL-16細胞
Lu-65細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LO2細胞、NCIH661細胞、MDAMB175細胞
HTR8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JHH2細胞、Farage OL細胞、HDQP1細胞
HCCLM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HAEC細胞、Panc_03_27細胞、EB-3細胞
SEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEP-a2細胞、OC-3-VGH細胞、WM115細胞
SW1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-16細胞、Kuramochi細胞、L細胞
RH30SJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：End1/E6E7細胞、TCC-SUP細胞、HT22細胞
PG13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG-HOS細胞、MDST8細胞、FRTL-5細胞
LTEP-sm細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H146細胞、293/EBNA細胞、HFL-I細胞
L-363細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2342細胞、MCF-7細胞、SK ES 01細胞
NS1-Ag 4/1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Meat Animal Research Center-145細胞、AMO-1細胞、ESC細胞
74Int細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT-BM細胞、H-1581細胞、H6c7細胞
639-V細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA-TU-8988S細胞、CAL27細胞、NCI-H1435細胞
SF 126細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16/BL6細胞、BSC-1細胞、SUM102細胞
SNU-407細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-44細胞、SK UT 1細胞、TE-1細胞
JTC-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G 292 Clone A 141B1細胞、HSC2細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞
H1155細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HM細胞、C32 [Human melanoma]細胞、NCIH526細胞
NCI-H2171細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AN3細胞、Walker/LLC-WRC 256細胞、RCK8細胞
Alexander細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-SF-21-AE細胞、95D細胞、Sp2/0-Ag-14細胞
HEL-92_1_7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKG-IIIa細胞、H4-IIE-C3細胞、NCI H226細胞
Hs746-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DU 4475細胞、NCI-H2126細胞、KY-270細胞
DMS 79細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SH-SY5Y Parental細胞、Cates-1B細胞、HN6細胞
SW-837細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3HR-1細胞、WM451Lu細胞、TCam-2細胞
FRO81-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN-m細胞、SW1088細胞、NCI-H196細胞
NIH:OVCAR-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ca9-22細胞、HCT-GEO細胞、Hs870T細胞
Medical Research Council cell strain-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH441細胞、T24(ECV304)細胞、H4-II-E-C3細胞
DF1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞、H838細胞、MC3T3-E1 Subclone 14細胞
SKN-AS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1238細胞、Glioma-261細胞、Earle's L cells細胞
NUGC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 1細胞、GM05887A細胞、P3/X63/Ag8.653細胞
Mhh-Call 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GP2-293細胞、RBVEC細胞、J 774A.1細胞
MFD-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAPC-4細胞、JHH-7細胞、MC3T3-E1 Subclone 24細胞
HR1K細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB6 Cl 30-7b細胞、TM-4細胞、IB-RS2細胞
H1238細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Dysplastic Oral Keratinocyte細胞、PC-3M-IE8細胞、A549-Taxol細胞
RPMI-8402細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuperTube細胞、ABE8.1/2細胞、HDMEC細胞
CHO-K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：V 79細胞、MCF 7細胞、NCI-HUT-69細胞
Vero細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H3255細胞、A-375SM細胞、32D.3細胞
SR Lymphoblastoid cells人間變性大細胞淋巴瘤細胞系
C38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL1細胞、NCI-H441-4細胞、RBL 2H3細胞
HOPC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC-893細胞、HCT FET細胞、H-2030細胞
EFO27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2171細胞、SNU601細胞、Human Liver-7702細胞
SKRC-52細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VA-ES-BJ細胞、WM115mel細胞、Sp2/O-Ag14細胞
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