"SR Thawing人間變性大細胞淋巴瘤細胞系
細胞背景資料：間變性大細胞淋巴瘤；男性
細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣
SR Thawing人間變性大細胞淋巴瘤細胞系
細胞生長：懸浮
培養(yǎng)細胞的凍存及復蘇：細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細胞凍存在-１９６℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復蘇的原則是慢凍快融。【凍存細胞】１)選對數(shù)增生期細胞(證明無支原體污染)，在凍存前１d換液；２)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細胞制備成懸液，計數(shù)，使細胞密度達５×１０／ml左右密度，離心，去上清；３)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。凍存細胞時培養(yǎng)液中加入保護劑１０％二甲基亞砜(DMSO)或甘油，可使冰點降低，使細胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細胞外；４)分裝于無菌凍存管中，每管加１.５m懸液；５)旋好凍存管并仔細檢查，一定要蓋緊，做好標記；６)凍存：在特殊的儀器或簡易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min時間內(nèi)，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要適當掌握下降冷凍速度，過快能影響細胞內(nèi)水分透出，太慢則促進冰晶形成。操作時應戴防護眼鏡和手套，以免液氮凍傷?！緩吞K細胞】１)從罐中取出凍存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不時搖動，使其急速融化，３０～６０s內(nèi)完成；３)凍存管用７０％酒精擦拭消毒后，打開蓋子，用吸管將細胞懸液注入離心管中，再滴加１０ml培養(yǎng)液；４)低速離心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培養(yǎng)液洗一次；５)用培養(yǎng)液適當稀釋后，裝入培養(yǎng)瓶３７℃培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后，繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進行培養(yǎng)。凍存細胞數(shù)量要充分，密度應達到１０／ml，在融后稀釋２０倍時，仍能保持５×１０／ml數(shù)量。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)好與不好至關(guān)重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況把握）。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
SR Thawing人間變性大細胞淋巴瘤細胞系
細胞生長特性：懸浮
細胞消化過程總結(jié)：其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞（絕大部分１min不到）。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了（雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個時候應該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液（不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開）。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的（比如Calu-３細胞），吹打不超過２０次后（一般１０次即可），成小規(guī)模聚集（１０個細胞左右），是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞（潤洗方法５min還不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
HEK-EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ES細胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞
CoCL3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1355細胞、H2228細胞、T-ALL1細胞
HCC-1428細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL-CL.2細胞、HFL1細胞、130-T細胞
HBEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RWPE-2細胞、SKO3細胞、GM03571細胞
MESSA/Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM12-SM細胞、HLEC-B3細胞、MEG01細胞
SHSY5Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1666細胞、MEF細胞、FL-83B細胞
FRO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H441-4細胞、hUC-MSC細胞、H716細胞
Kit-225-K6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA-420細胞、H4IIEC3細胞、ABE­8.1/2細胞
RFL-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNUC2B細胞、PG13細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞
HGC-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FLS細胞、H510細胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細胞
SNB19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV21細胞、PFSK-1細胞、H748細胞
SKRC-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1155細胞、SPDC-CCL141細胞、MOLT-3細胞
KG-1a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HVSMC細胞、ROS17/28細胞、QG-56細胞
CORL105細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-29細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞、MDA-MB 361細胞
GM00637F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TMD-8細胞、Oka-C1細胞、Walker256-TC細胞
ECC10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT116細胞、hEEC細胞、NCI.H522細胞
Calu6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ra #1細胞、RPMI8402細胞、HEK-A細胞
KHYG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3細胞、GM00346細胞、BALB 3T3 clone A31細胞
118MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUP-B1細胞、Detroit 562細胞、LM1細胞
130 T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2106細胞、3396細胞、MDAMB231細胞
Capan-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1341細胞、NOR 10細胞、NG10815細胞
Capan-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1341細胞、NOR 10細胞、NG10815細胞
SKNEP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-138MG細胞、U14細胞、BIC1細胞
CX-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIA-Pa-Ca-2細胞、BV-2細胞、GM03320細胞
TM-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OAC-P4C細胞、HEC-1-B細胞、CCD966SK細胞
HO-8910PM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T6細胞、TYKnu細胞、T98G細胞
SR Thawing人間變性大細胞淋巴瘤細胞系
KM12-SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：143B TK-細胞、Potorous tridactylus Kidney 2細胞、HLFa細胞
Ramos.2G6.4C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hepa1-6細胞、NCI-H1915細胞、GC-1 spg細胞
OCI-Ly 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H220細胞、253J-BV細胞、Tsup-1細胞
A1847細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H345細胞、NCI-H647細胞、P-2003細胞
CEMC7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPDLF細胞、Jijoye細胞、H.Ep. #2細胞
EB-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rainbow Trout Embryo細胞、U251n細胞、CHO-S細胞
H889細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB415細胞、MDA.MB.435細胞、Ramos 2G6 4C10細胞
NCTC-1469細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-357細胞、Jeko1細胞、FRhK4細胞
NCIH322細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1116細胞、H-865細胞、Henrietta Lacks cells細胞
KU.812細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J-774A.1細胞、Hi-five細胞、HEK-293-H細胞
CACO2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI:SG231細胞、HFB細胞、GBCSD細胞
MA 104細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IHHA-1細胞、NCIH1876細胞、NCI-H1568細胞
Panc 10.05細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U373-MG細胞、CMT-93細胞、SNUC2A細胞
SK-MEL-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBZY-1細胞、GM07404D細胞、Strain L-929細胞
LA-795細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NR 8383細胞、HTori 3細胞、DHL6細胞
SKMEL3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H146細胞、NCI-ADR-RES細胞、COV434細胞
NG 108-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03569B細胞、MDA-MB-436細胞、A431細胞
PTK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2052細胞、CFPAC細胞、MuM-2B細胞
VSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hce8693細胞、Calu3細胞、IGROV 1細胞
HuP-T4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN-6細胞、OCI/AML-2細胞、EL4細胞
A549/DDP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2029細胞、SW 948細胞、COLO320 DM細胞
A431/P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2135細胞、MCF12F細胞、LMTK-細胞
HCC1438細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE-2細胞、OVCA-433細胞、A-673細胞
SW1353細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GP293細胞、L5178Y細胞、CAL-51細胞
Nb2-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2444細胞、L-363細胞、MFE 280細胞
H2110細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV504細胞、HEK-AD 293細胞、CCD18Co細胞
HSC/mHSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Embryonic Kidney 293細胞、Danio rerio Gill細胞、hESC細胞
Panc08.13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3M-1E8細胞、MEL-526細胞、NIH3T3-L1細胞
SW 756細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G422細胞、RBL-1細胞、CCD 966SK細胞
H2023細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUPT-1細胞、Hmy.2 CIR細胞、H1651細胞
HEL92.1.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLMEC細胞、MDA157細胞、GM05372細胞
Calu 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV-1-Lu細胞、SW780細胞、RT4-D6-P2T細胞
Oka-C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-719細胞、NCI-H322細胞、HHFK細胞
SR Thawing人間變性大細胞淋巴瘤細胞系
BIC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1563細胞、Adeno 293細胞、Panc-3_27細胞
G-402細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FU-MMT-1細胞、NCI-H2141細胞、MGH-U1 (EJ)細胞
High5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C2BBe 1細胞、Kit225 K6細胞、BrCL15細胞
A-101D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML-3細胞、FRTL-5 Cl 2細胞、TE-15細胞
H1435細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc5.04細胞、NCIH1395細胞、190PT細胞
FK81細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TK-10細胞、DMS53細胞、A375SM細胞
Hep-G2/C3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：alpha TC1-6細胞、BJA-B-1細胞、aTC1-6細胞
RFL-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNUC2B細胞、PG13細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞
HuH6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mel526細胞、LC1細胞、Wistar Institute, Susan Hayflick細胞
Ca Ski細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tb 1 Lu (NBL-12)細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞、D-407細胞
HCC-9724細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN299細胞、L-6 myoblast細胞、697細胞
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