"HL-60細胞：人原髓細胞白血病細胞系

細胞背景資料：該細胞由CollinsSJ從一位患有急性早幼粒細胞性白血病的３６歲白人女性的外周血中分離建立；可自發(fā)分化，或在鹽、次黃嘌呤、佛波醇肉豆蔻酸(PMA,TPA)、DMSO(１%to１.５%)、D和視黃酸的刺激下發(fā)生分化；PMA刺激后可分泌TNF-α。該細胞具有吞噬活性和趨化反應，癌基因myc陽性，表達補體受體和FcR。

細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣

細胞生長：懸浮

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)

細胞傳代方法：維持細胞濃度在１×１０５-１×１０６/ml,每２-３天換液１次。

細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系

細胞生長特性：懸浮生長

購買細胞注意事項：１)收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系；２)仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等；３)用７５%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落，將細胞置于培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)過夜，隔天再取出觀察。此時多數(shù)細胞均會貼壁，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力，如果證實細胞活力正常，請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結果顯示細胞無活力，請拍下照片及時和我們聯(lián)系，信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次；４)建議客戶收到細胞后前３天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和公司技術部溝通交流。【細胞傳代操作步驟】一、貼壁細胞傳代：１)提前將培養(yǎng)基、PBS放入３７℃水浴鍋內預熱，用７５%酒精擦拭后再放入超凈臺內；２)吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞；３)加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，３７℃孵育，每隔２~３min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用；４)用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產生大量的氣泡；５)將細胞懸液分別接種到另外的２~３個細胞瓶內，加入新鮮培養(yǎng)基，置３７℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。二、懸浮細胞傳代：１)將細胞懸液轉移到無菌離心管內，１０００rpm離心５min；２)棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液；３)將細胞懸液分別接種到另外的２~３個細胞瓶內，加入新鮮培養(yǎng)基，置３７℃溫箱培養(yǎng)。

絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可。吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足夠消化細胞。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后37℃消化。比較難消化的細胞（潤洗方法5min還不能消化），這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育。不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了（雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個時候應該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性。如果和標準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不好。

細胞凍存基本方法：１．細胞：選對數(shù)生長期細胞，收集細胞２４小時前換液一次。２．計數(shù)：按常規(guī)方法把細胞制成細胞懸液，計數(shù)，令細胞密度達５×１０(６)/ml，離心去上清，吸入離心管中。３．凍存液：先用培養(yǎng)液９分＋DMSO １分（或甘油）配成１０％的DMSO凍存液，按上法一滴滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。４．分裝：分裝入無菌安剖中，每安剖加１.５毫升細胞懸液。５．封口：用塑料安剖時擰緊瓶口即可；如用火焰封閉安剖口后，仔細檢查，定要封嚴，必要時可浸入藍色液中觀察，為安全起見，把安剖縫入紗布小袋中，以防液氮浸入后，融解時因受熱發(fā)生爆炸傷人；紗袋一端系以線繩，末端扎有小牌，注明：細胞名稱，凍存日期，以便日后查找。細胞株(系)的使用，為醫(yī)學研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的，長期連續(xù)傳代的細胞，不僅消耗大量的人力和物力，而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉化，因而細胞失去原有的遺傳特性，有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷，種子丟失。因此，在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞，以備替換使用。細胞冷凍與復蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術。

Cor L88細胞系相關產品：NCI-H1573細胞、SW-900細胞、CV1細胞

SCL I細胞系相關產品：UCW 100細胞、SF-295細胞、Centre Antoine Lacassagne-33細胞

RA細胞系相關產品：T47D細胞、NCIH2291細胞、MV522細胞

HEK-293 c18細胞系相關產品：brain-derived Endothelial cells.3細胞、Caki2細胞、GES-1細胞

DU 145細胞系相關產品：Fetal Human Lens-124細胞、McA-RH 8994細胞、U118-MG細胞

MCF12F細胞系相關產品：hs 68細胞、MGc80-3細胞、TM4細胞

SUSM-1細胞系相關產品：NCIH2073細胞、Hs604T細胞、MKN45細胞

MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞系相關產品：Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞、Okayama University Medical School-23細胞、FHL124細胞

EoL-1-cell細胞系相關產品：BRL細胞、H-1048細胞、SPCA-1細胞

KMS-11細胞系相關產品：NOR10細胞、NCIH2106細胞、BT細胞

HPAEC細胞系相關產品：Vero細胞、FBHE細胞、SK-SH-SY5Y細胞

MOLT 3細胞系相關產品：BC-009細胞、OAW-42細胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞

GM-215細胞系相關產品：H2286細胞、KP-N-YN細胞、MonoMac 6細胞

RGC-5細胞系相關產品：B16F0細胞、Human Epidermoid carcinoma #2細胞、A 72細胞

N87細胞系相關產品：HDSMC細胞、Th17細胞、L-M(TK-)細胞

SKNBE2C細胞系相關產品：C17細胞、ECV細胞、JiyoyeP-2003細胞

SKNBE2C細胞系相關產品：C17細胞、ECV細胞、JiyoyeP-2003細胞

TH1細胞系相關產品：A9(Hamprecht)細胞、Large Cell Lung Cancer-103H細胞、SC1細胞

NCI-H157細胞系相關產品：Tu 212細胞、SUD4細胞、CAL 12T細胞

LY細胞系相關產品：H7721細胞、H35 Reuber細胞、Karpas-422細胞

VP 267細胞系相關產品：Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細胞、ELD-1細胞、GM03190細胞

H-2126細胞系相關產品：A253細胞、VCaP細胞、Be Wo細胞

NUGC-2細胞系相關產品：LNCaP C4-2細胞、HBE 135-E6/E7細胞、H1703細胞

Y1細胞系相關產品：CaSki細胞、28SC細胞、LS-123細胞

LNCaP C4-2B細胞系相關產品：EB1細胞、HCE細胞、MAD109細胞

Hut292細胞系相關產品：H650細胞、GM3569細胞、H-841細胞

BNL CL.2細胞系相關產品：TF1細胞、JURKAT E-6.1細胞、Colo-206F細胞

BEL7402細胞系相關產品：Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞、2PK3細胞、Potorous tridactylus Kidney 2細胞

HBE 135-E6/E7細胞系相關產品：FHL-124細胞、SCC 9細胞、HPMC細胞

NCI H548細胞系相關產品：HCC 38細胞、MDAMB175VII細胞、AQ-Mel細胞

GM17219細胞系相關產品：SUM159細胞、BT483細胞、Hs-852-T細胞

GOTO細胞系相關產品：MTC-TT細胞、OV 1063細胞、KRC-Y細胞

Wistar Institute-38細胞系相關產品：PK(15)細胞、WM115細胞、PC 61-5-3細胞

COR-L23細胞系相關產品：CF Pac1細胞、J774A1細胞、NFS 60細胞

LIPF178C細胞系相關產品：NEC8細胞、GM04154細胞、C41細胞

VE細胞系相關產品：GC-2spd(ts)細胞、LM3細胞、EA.Hy926細胞

A431/P細胞系相關產品：NCIH2135細胞、MCF12F細胞、LMTK-細胞

H1648細胞系相關產品：HFSF細胞、Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞、HBE細胞

SMA 560細胞系相關產品：HPAF-II細胞、H2444細胞、I90細胞

Karpas-299細胞系相關產品：HCM細胞、SHIN-3細胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞

DMS 153細胞系相關產品：Hs852T細胞、CHO細胞、T/G HA VSMC細胞

NS1/1-Ag4.1細胞系相關產品：JEG-3細胞、SW 839細胞、MCF-7ADR細胞

Tu 212細胞系相關產品：H-187細胞、769P細胞、ssMCF7細胞

NB19-RIKEN細胞系相關產品：MODE-K細胞、NCI-H2342細胞、IPEC-J2細胞

WEHI-164細胞系相關產品：HSC 3細胞、3T3(A31)細胞、PC-3M-1E8細胞

F98細胞系相關產品：MC-CAR細胞、YES 2細胞、YAC-1細胞

HOP 62細胞系相關產品：SNU886細胞、NCI-SNU-16細胞、H-1105細胞

PC3M-IE8細胞系相關產品：NWA細胞、SW-1417細胞、X63.Ag8.653細胞

ChaGo-K-1細胞系相關產品：Michigan Cancer Foundation-7細胞、LS123細胞、CAKI1細胞

MT2細胞系相關產品：HS-294-T細胞、BIU87細胞、DMS273細胞

HCT15細胞系相關產品：P-3J細胞、HuT 102細胞、OVCAR 8細胞

PANC-08-13細胞系相關產品：SUM102細胞、JROECL21細胞、KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150

細胞

MUTZ-1細胞系相關產品：SKM1細胞、HEK293-EBNA細胞、HIT-T15細胞

Jijoye細胞系相關產品：D283細胞、SRA 01/04細胞、Mo 59J細胞

OV-90細胞系相關產品：P3JHR-1細胞、RK-13細胞、OK-WT細胞

Toledo細胞系相關產品：G-361細胞、H-295細胞、KP4細胞

8505C細胞系相關產品：BGC823細胞、NCI-H1930細胞、Danio rerio Gill細胞

U2932細胞系相關產品：RL95細胞、Rat-1細胞、HUT-226細胞

SNU-C2B細胞系相關產品：MDA-MB-435細胞、H-82細胞、HuLEC-5a細胞

H-841細胞系相關產品：SUM 102PT細胞、MES-SA細胞、CEM/0細胞

H727細胞系相關產品：OCM-1細胞、A2780/CP70細胞、NCI-H358細胞

KP-N-YN細胞系相關產品：SW-954細胞、Bovine ENDometrial cells細胞、COV504細胞

HFL細胞系相關產品：HeLaS3細胞、hTERT RPE-1細胞、SKLU-1細胞

Hs 766細胞系相關產品：SUM52PE細胞、A172細胞、HF-91細胞

Me Wo細胞系相關產品：MDAMB453細胞、SUM 159PT細胞、SW 1417細胞

Glioma-261細胞系相關產品：BHP 10-3細胞、H2141細胞、COLO 205細胞

Madin-Darby Canine Kidney細胞系相關產品：U-251細胞、CCC-HEL-1細胞、RERF-LC-MS細胞

DMS 79細胞系相關產品：SH-SY5Y Parental細胞、Cates-1B細胞、HN6細胞

HCCC9810細胞系相關產品：Hs 840.T細胞、MEL細胞、Human Lung Microvascular Endothelial細胞：-5a細胞

207細胞系相關產品：CHOS細胞、Panc-03.27細胞、HEC1-A細胞

VAESBJ細胞系相關產品：ELD-1細胞、H-2108細胞、Malme-3 M細胞

NCIH1385細胞系相關產品：P 815細胞、EC-GI-10細胞、MS1細胞

RA細胞系相關產品：T47D細胞、SUP-B1細胞、Strain L-929細胞

HEK 293-H細胞系相關產品：Danio rerio Gill細胞、NCI-H1930細胞、WIL2 S細胞

"