"MEC-1細胞：人粘液表皮樣癌細胞系
細胞背景資料：粘液表皮樣癌
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細胞生長特性：貼壁
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
冷凍細胞解凍程序：依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類，若因?qū)嶒炐枰?，必須有所不同時，務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細胞適應(yīng)后，方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清)，對細胞而言差異極大，請務(wù)必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于３７°C水槽中回溫，回溫后噴以７０%酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管，立即放入３７°C水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在１分鐘內(nèi)全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細胞種類和濃度，于無菌操作臺內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T２５或T７５flask中。取出已解凍之細胞懸浮液，緩緩加入T２５或T７５flask內(nèi)之培養(yǎng)基，混合均勻，放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言，１%以下之冷凍保護劑DMSO，不會對細胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細胞中去除，待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細胞分化之細胞，需立即去除DMSO者，則可將解凍后之細胞懸浮液放入５-１０ml培養(yǎng)基中，離心３００xg(約１０００rpm)，５分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細胞均勻混合后，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中，再放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
U-138-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-GT-2細胞、HNSC細胞、RIN-m5F細胞
CAL 148細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TPC-1細胞、SNK-1細胞、HRA-19細胞
NK-10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63細胞、EFO 27細胞、LL/2(LLc1)細胞
AG06814-N細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-838細胞、SKNO1細胞、TE8細胞
HuH-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCCAR細胞、Hs934T細胞、Jurkat, Clone E6-1細胞
SUM 149PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3-LL細胞、SHEE細胞、PE CA PJ34細胞
HemECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Beta-TC-6細胞、H-1184細胞、COS-7細胞
NCI747細胞系相關(guān)產(chǎn)品：N87細胞、KYSE0520細胞、NCI-H735細胞
UMUC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P388D1細胞、Psi-2 DAP細胞、MOLT 16細胞
H1781細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAC1細胞、mREC細胞、HEC151細胞
NCIH526細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc8.13細胞、WERI Rb-1細胞、ATC241細胞
NIH 3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AR42J細胞、KYSE-150細胞、RPMI-2650細胞
SW-527細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293E細胞、Capan-1細胞、PASMCS細胞
Ketr3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRA19細胞、VE細胞、RPMI7666細胞
DoTc2-4510細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MS-751細胞、RPMI no. 8226細胞、SG231細胞
HLE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC細胞、D10G41細胞、NB4細胞
Y 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MESSA/Dx5細胞、U-251-MG細胞、P3J HR-1細胞
Eca 109細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO8910/PM細胞、PC 12細胞、SNU869細胞
hTERT RPE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGY-7703細胞、CCRFCEM細胞、G519細胞
RPVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-149細胞、NCI-H1651細胞、NCIH1975細胞
Alexander細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-SF-21-AE細胞、95D細胞、Sp2/0-Ag-14細胞
MNNG-HOS (Cl#5)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P31-FUJ細胞、HCGC細胞、Hi-5細胞
LS 1034細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞、LY細胞、OVCA 433細胞
AG06814-N細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-838細胞、SKNO1細胞、TE8細胞
G401細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PaTu-8988s細胞、GM03571細胞、H322細胞
3T3-442A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-MeWo細胞、PANC 327細胞、RKO-AS45-1細胞
LYR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL6細胞、XuanWei Lung Cancer-05細胞、HSC6細胞
GM02132C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HR-8348細胞、GLC82細胞、MC57G細胞
SO-RB50細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U118-MG細胞、NP69SV40T細胞、H-660細胞
3T3-L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS1-Ag 4/1細胞、LTEP-a2細胞、CCD1112Sk細胞
SUM 52PE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OKa-C-1細胞、HT 1376細胞、NCI-H2198細胞
GM03571細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fetal Rhesus Kidney-4細胞、HCC-1395細胞、SU86.86細胞
NBL-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU 812F細胞、M14細胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized細胞
CCD1095Sk細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H711細胞、ETCC-007細胞、MM134細胞
Ku812細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VK-2/E6E7細胞、HTh 74細胞、EFM192細胞
CEM/C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2106細胞、DH-82細胞、NK-92.05細胞
MDAMB175VII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCV-29細胞、CT-26細胞、WM451細胞
HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3M細胞、HPAF2細胞、MLM細胞
SW 948細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGc80-3細胞、U-87-MG細胞、Murine Thymic Epithelial細胞： 1細胞
A427細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 841 CoN細胞、SW 954細胞、RH-35細胞
ISHI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF17細胞、MC-26細胞、NCI-SNU-387細胞
OVCAR-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE10細胞、SW1417細胞、LN-382細胞
22Rv-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC7901細胞、HCC-70細胞、Monomac-1細胞
HT-29/CX-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：231-luc細胞、PC-3/M細胞、HL60細胞
MDA-MB 468細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U373細胞、SKMEL5細胞、ARPE19細胞
MARC 145細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CoCL2細胞、CP70細胞、T-T細胞
H1404細胞系相關(guān)產(chǎn)品：He-La細胞、Hs-343-T細胞、PT-67細胞
GM-346細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVHM細胞、KM H-2細胞、NBLS細胞
Jijoye細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D283細胞、SRA 01/04細胞、Mo 59J細胞
102PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMH2細胞、COLO 16細胞、C2C12細胞
OAC-P4C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hut292細胞、Karpas 422細胞、AG06814-M細胞
MGSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM 115細胞、Hs675細胞、16HBE14o-細胞
MPP 89細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KY180細胞、Sp 2/0-Ag 14細胞、INS1細胞
A101D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-C2B細胞、NCI-A549細胞、B6Tert-1細胞
HEC1-B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HConEpic細胞、HT 1376.T細胞、GDM-1細胞
OCI-LY-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEC-1細胞、SKml2細胞、HIT細胞
MCF7/WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB134VI細胞、MMAc-Serum Free細胞、C26細胞
HANK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA-38細胞、H-1781細胞、NCI-H322細胞
McArdle RH-7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WB F344細胞、786.O細胞、OVCAR-420細胞
HEK293F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-2細胞、P3 NS1 Ag4/1細胞、SupT1細胞
PL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF-CEM細胞、UACC-893細胞、NTera2 cl.D1細胞
MDAPCa2b細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE3細胞、JM1細胞、Lieming Xu-2細胞
A2780-CP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 578.T細胞、NG10815細胞、KM-H2細胞
VP303細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh-7細胞、COLO 205細胞、MOLP-8細胞
Panc_08_13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-112CoN細胞、Jurkat 77細胞、PCI-4M細胞
P3JHR1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEMC7細胞、ECC-10細胞、JB6Cl30細胞
OC-3-VGH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-6細胞、PJ34細胞、SUD-4細胞
Large Cell Lung Cancer-103H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WPMY-1細胞、A2780CP細胞、NCI-SNU-423細胞
A-375SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCa/16A3-F細胞、NCIH1355細胞、NR8383細胞
C32r細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB19細胞、HEI193細胞、SF763細胞
SuDHL 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Evsa T細胞、SUM-52PE細胞、Tokyo Medical and Dental university 8細胞
AKR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA-TU S細胞、MDA-MB231細胞、SK-RC 42細胞
NK-10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63細胞、H766T細胞、F98細胞
IALM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2126細胞、NE-4C細胞、SK-N-BE(2)-M17細胞
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