"MEC-1 epithelioid cells人粘液表皮樣癌細胞系 細胞背景資料:粘液表皮樣癌 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉! EBTr (NBL-4)細胞系相關產品:Hep3B細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞、HHL5細胞 U87MG細胞系相關產品:OE-19細胞、EFM-192C細胞、BHK 21細胞 Panc_04_03細胞系相關產品:YD38細胞、J 111細胞、SNU-739細胞 細胞生長:貼壁 MEC-1 epithelioid cells人粘液表皮樣癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 為了防止因污染或技術原因使長期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現變異,有時因寄贈、交換和購買,培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉運到另一個實驗室,的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要?,F簡要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時,細胞內的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止狀態(tài),故可以長期保存。細胞低溫保存的關鍵,在于通過0~20℃階段的處理過程。在此溫度范圍內,水晶呈針狀,極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復蘇:凍存細胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細胞要快速融化,并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。1ml凍存細胞使用10~20ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數,細胞接種應該至少在3×10(5)活細胞/ml;培養(yǎng)細胞12到24小時,更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細胞加入到大約25ml完全生長培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞,并且進行活細胞計數。細胞鋪板,細胞接種應該至少為3×10(5)活細胞/ml。細胞的分化:一個成年人全身細胞總數約1012個,可以區(qū)分為200多種不同類型的細胞:形態(tài)結構,代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以,通常把發(fā)育過程中,細胞后代在形態(tài)、結構和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細胞的產生和分化,這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞,轉入分化,通常從細胞周期中G1期開始時一個確定的點G0點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞,它們的基因表達和代謝活動各不相同。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 MDA-415細胞系相關產品:HUVEC細胞、Mouse INsulinoma 6細胞、C22 (Clara)細胞 Panc 02.03細胞系相關產品:HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞、VK2/E6E7細胞、CCD-841CoN細胞 NCIH2009細胞系相關產品:FD-LSC-1細胞、CCD1095Sk細胞、CT26.WT細胞 SY5Y細胞系相關產品:DBTRG-05MG細胞、BHT-101細胞、TE11細胞 PC-9/GR細胞系相關產品:PC 61-5-3細胞、NCI-H2172細胞、MDA MB 134VI細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系 MEC-1 epithelioid cells人粘液表皮樣癌細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。 P3/NSI/1-AG4-1細胞系相關產品:SW 1088細胞、Alexander細胞、CAL-148細胞 PLA801D細胞系相關產品:P388-D1細胞、LU-65M細胞、LTEP-a-2細胞 L 132細胞系相關產品:Roswell Park Memorial Institute 8226細胞、MES-13細胞、H1694細胞 OCIAML5細胞系相關產品:Leukemia 1210細胞、HS-294細胞、HEL-92-1-7細胞 COLO206F細胞系相關產品:TC7細胞、INS1細胞、MonoMac6細胞 T/GHA-VSMC細胞系相關產品:SGC-7901細胞、NCIH441細胞、KOSC2細胞 AMC-HN-8細胞系相關產品:BEL7405細胞、HMSC細胞、SKMES-1細胞 SNB19細胞系相關產品:TOV21細胞、PFSK-1細胞、H748細胞 P 815細胞系相關產品:SPCA1細胞、SNU354細胞、EU-3細胞 Hep-3B細胞系相關產品:Hs445細胞、T24細胞、HOS/MNNG細胞 MEC-1 epithelioid cells人粘液表皮樣癌細胞系 MFM223細胞系相關產品:TMD8細胞、Hepatoma 22細胞、P3J-HR-1細胞 HOPC細胞系相關產品:UACC-893細胞、Normal Rat Kidney細胞、H209細胞 NCI-H378細胞系相關產品:WRL-68細胞、RC-4B細胞、KHYG細胞 NIH:OVCAR-8細胞系相關產品:X63-Ag8.653細胞、QBI-HEK 293A細胞、IEC-6細胞 VeroC1008細胞系相關產品:Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞、CEMO-1細胞、EST81細胞 IMR-32細胞系相關產品:BpRcl細胞、SKNF1細胞、Hs729T細胞 RT112細胞系相關產品:RS4;11細胞、P 815細胞、HaCaT細胞 TOV-112D細胞系相關產品:ECGI10細胞、HEK293-H細胞、Hs68細胞 SU-DHL-5細胞系相關產品:WiDr-TC細胞、PC3-M細胞、MCA 38細胞 H1355細胞系相關產品:NBL-3細胞、SN-12C細胞、NCI-H250細胞 SUM-149PT細胞系相關產品:AU 565細胞、LIM 1215細胞、HEYA8細胞 TCam 2細胞系相關產品:COLO-320-HSR細胞、OCI-Ly 7細胞、LNT-229細胞 ECV304細胞系相關產品:H82細胞、3T3L1細胞、GOS-3細胞 QGP1細胞系相關產品:NCI-H220細胞、MT-2J細胞、LS-180細胞 H4-II-E-C3細胞系相關產品:Mel-624細胞、CESS細胞、THEECs細胞 M-1細胞系相關產品:HEEpiC細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞、RPMI7951細胞 MALME.3M細胞系相關產品:P3J細胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞、SP-2細胞 SUM149PT細胞系相關產品:HCC1954細胞、hTERT RPE1細胞、HEK293-F細胞 RCF細胞系相關產品:HA細胞、Malme-3 M細胞、MRASMC細胞 TE32細胞系相關產品:NIH-3T3細胞、LC1-Sq細胞、MDA-MB-415細胞 HCC4006細胞系相關產品:KAT-5細胞、HCC-94細胞、H-1184細胞 HBE 135-E6/E7細胞系相關產品:FHL-124細胞、SCC 9細胞、HPMC細胞 NCI H508細胞系相關產品:NB9細胞、NK-92.05細胞、J45.01細胞 Natural Killer-92細胞系相關產品:BrCL15細胞、BEL7405細胞、H-865細胞 UPCI:SCC154細胞系相關產品:PTK1細胞、Lu99A細胞、HSC3細胞 Sp2/O細胞系相關產品:X63-AG 8.653細胞、OUMS-23細胞、SCC4細胞 MCF10-A細胞系相關產品:ME-1 [Human leukemia]細胞、SNU387細胞、SNU251細胞 MEL細胞系相關產品:RS411細胞、QGP1細胞、TE 85 ClF-5細胞 MOLM-13細胞系相關產品:NCI N87細胞、Sol8細胞、WEHI3B細胞 NCIH2073細胞系相關產品:BCECs細胞、L23/P細胞、ECC1細胞 MES23.5細胞系相關產品:NCI-SNU-1040細胞、L Wnt-3A細胞、SN12CPM6細胞 PaTu8988s細胞系相關產品:Hs863T細胞、HCEC-B4G12細胞、HPBALL細胞 PLC PRF 5細胞系相關產品:RLE-6TN細胞、U-2932細胞、DMS-53細胞 SNU182細胞系相關產品:U266細胞、CC-LP-1細胞、hTERT-RPE1細胞 COLO-829細胞系相關產品:A-10細胞、SW48細胞、CA 46細胞 L363細胞系相關產品:alpha-TC1-6細胞、H1568細胞、S180細胞 Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞系相關產品:MeWo細胞、HCC-9724細胞、H-520細胞 WM239A細胞系相關產品:PC-3M-IE8細胞、OVCAR420細胞、TCMK1細胞 DHL-6細胞系相關產品:MLMA細胞、H719細胞、A549/DDP細胞 NS1-Ag4細胞系相關產品:NCI-H2196細胞、OCI-Ly 3細胞、SW-626細胞 ARPE-19細胞系相關產品:CoCL3細胞、TMK-1細胞、MDA 1386細胞 HRPEpiC細胞系相關產品:HDQ-P1細胞、RSC-364細胞、QBI-HEK 293A細胞 HCEpiC細胞系相關產品:C2BBe1細胞、Meat Animal Research Center-145細胞、RFL-6細胞 MEL細胞系相關產品:RS411細胞、QGP1細胞、TE 85 ClF-5細胞 NCIH889細胞系相關產品:LS180細胞、SK-HEP-1細胞、FHL 124細胞 Balb/c3T3細胞系相關產品:IPLB-SF 21AE細胞、DLM8細胞、BL6細胞 MCF12F細胞系相關產品:hs 68細胞、MGc80-3細胞、TM4細胞 H-526細胞系相關產品:HMEC-1細胞、GM05384細胞、Mono-Mac-1細胞 TE7細胞系相關產品:NCI-H1417細胞、CPA 47細胞、UM-UC-14細胞 MHCC97-L細胞系相關產品:SKCO1細胞、SACC83細胞、NCI-H2126細胞 L-Wnt-3A細胞系相關產品:MC3T3-E細胞、A-172細胞、RPMI-1788細胞 MEC-1 epithelioid cells人粘液表皮樣癌細胞系 NKT細胞系相關產品:MASMC細胞、Tca8113細胞、SKMEL5細胞 OCI/AML-2細胞系相關產品:HCC94細胞、MN-60細胞、MES-SA細胞 HCA 7細胞系相關產品:H-292細胞、WI38細胞、751-NA細胞 L 1210細胞系相關產品:BHP10-3細胞、HCC1500細胞、SP-2細胞 "
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