"NSC-34細胞：鼠神經(jīng)元細胞系
細胞背景資料：神經(jīng)元
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細胞生長特性：貼壁
造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié)：細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染，大多數(shù)較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢？我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?！具`規(guī)操作】１)為節(jié)省時間，有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時，不開紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開始試驗；２)器材或者溶液很久沒用，未檢測是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺不點酒精燈；點了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗；４)不帶手套，徒手操作；５)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋，未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°C高壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺和桌面，東西太多太亂：超凈臺不是儲物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺！這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞！一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里，細胞就會養(yǎng)的不好，啥時候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染，如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒了要記得加，還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?！緜鞔毎硕嗫陔s，難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室，實驗服當(dāng)風(fēng)衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細胞污染；超凈臺做實驗時，喜歡說話聊著做試驗，要是還不帶口罩，里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢！
貼壁細胞的消化方法介紹：１、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在０.２５-０.５%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。０.２５%的胰酶作用于單層貼壁的細胞，在３７度條件下，一般消化１-５分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-２０度。２、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養(yǎng)時，從組織消化下細胞。這種方法作用溫和，對細胞損傷較小，但是，價格也較貴。中止同樣是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在０.０２%左右。作用于細胞與間質(zhì)，對細胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來的細胞要洗一遍。４、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大，但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。５、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。６、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理，我想是因細胞冷凍后收縮，從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是：對細胞損傷小，不需要中止或洗細胞，方便，不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊，又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng)，效果非常滿意。具體過程是：１、用較多的４度的PBS 洗滌一遍細胞(以６孔板為例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，靜置操作臺上，很快細胞就小片脫落，３、輕輕吹打，細胞即完全脫落，４、按一定比例傳代。
細胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前，細胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存：計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存：使用分離試劑從基層分離細胞，分離時盡可能溫和，使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細胞，確定有活力細胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細胞/ml密度，在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
HFE-145細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VSMC細胞、H1876細胞、T 84細胞
no.11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCE-2 [50.B1]細胞、THC-8307細胞、HCA-7細胞
HME1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC 116細胞、LNCaP clone FGC細胞、NCIH1666細胞
C8D1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1930細胞、HELA-GFP細胞、Dunn LM8細胞
CALU 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00637I細胞、NCI H226細胞、Hs 695.T細胞
VSC4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCH-1細胞、KE-37細胞、118 MG細胞
OE-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nthy-ori 3.1細胞、CTLA4Ig-24細胞、JM-1細胞
HRPEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDQ-P1細胞、RSC-364細胞、QBI-HEK 293A細胞
FHL 124細胞系相關(guān)產(chǎn)品：38C13細胞、L-M[TK-]細胞、FRO 81-2細胞
H716細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo16細胞、BRL 3A細胞、NCI-H1666細胞
LTEPa2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-484細胞、PTK-1細胞、MADB106細胞
DMS-79細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U031細胞、AM38細胞、UMUC1細胞
A431細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS688AT細胞、H740細胞、HCC 94細胞
HBE135-E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERIRb1細胞、NFS 60細胞、GalK1細胞
WM-239細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C8D1A細胞、Kit 225-K6細胞、2PK3細胞
CCD19-Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCD-MLA-144細胞、NG 108-15細胞、AAV-293細胞
CCD19-Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCD-MLA-144細胞、NG 108-15細胞、AAV-293細胞
MDCK-II細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-Lu-65細胞、MN-60細胞、HCC94細胞
Mouse Forestomach Carcinoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA 205細胞、GM00346B細胞、Capan-1細胞
L-1210細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cattle chondrocytes細胞、3T3J2細胞、MJ細胞
3T3-Swiss細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Mel 24細胞、LIPF155C細胞、DMS-79細胞
GalK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CaEs17細胞、T/G HA VSMC細胞、MB-49細胞
OCM1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：686LN-M4e細胞、C-Lu-65細胞、HUT 226細胞
HT-1080細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMJ2C8細胞、Capan-2細胞、U266細胞
SK-Mel 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 683細胞、KYSE 140細胞、Murine Leydig Tumor細胞：-1細胞
FET細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTLL-2細胞、N-Tera-2細胞、H-1563細胞
NWA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H2106細胞、OCI AML3細胞、Natural Killer-92細胞
OVCAR-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：578T細胞、Epstein-Barr-1細胞、BJA-B1細胞
NCIH1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUP-T1細胞、E.L.4細胞、Panc 2.03細胞
National Medical Center-Glioma 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBE 135-E6E7細胞、HSCT6細胞、KYSE 410細胞
CORL51細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1299細胞、CF Pac1細胞、Hs746-T細胞
SK-N-BE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS 17/2.8細胞、CCD841CoN細胞、KYSE-410細胞
RS4:11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3/M細胞、Ramos (RA 1)細胞、COLO-394細胞
RSC-96細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC-52細胞、769-P細胞、SUM 52PE細胞
bEND.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ATDC5細胞、KP-N-NS細胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞
NIH-3T3-L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sup T-1細胞、B4G12細胞、RM1細胞
PSN-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJ1細胞、NB-19細胞、293E細胞
L6565細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00637F細胞、MB157細胞、DU145細胞
Wien133細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL-CL-11細胞、BALL1細胞、LTEP-a2細胞
NCl-H157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-027細胞、HITT15細胞、MDA-134細胞
HPAFII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM-UC-1細胞、SKG-3a細胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞
BJA-B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Me Wo細胞、Granta 519細胞、TR146細胞
VMRCLCD細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-5178-Y-R細胞、PaTu-8988s細胞、Astrocyte type I clone細胞
C4-2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-II-E-C3細胞、FRO81-2細胞、LCD細胞
Intestinal Epithelioid細胞： No. 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG-4細胞、MESSA-DX5細胞、RCC4細胞
C6661細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLP-8細胞、THLE-3細胞、NS1細胞
Centre Antoine Lacassagne-33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Det. 562細胞、MV522細胞、MAC1細胞
LA-N-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOP-62細胞、B16F10細胞、CHG-5細胞
SNU216細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MyLa 2059細胞、DI-TNC1細胞、HeLa細胞
IGROV-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G361細胞、PC-9/GR細胞、RPE-1細胞
hRMECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSAS4細胞、LSECs細胞、NCI-H1672細胞
NCI-H1563細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO-8910PM細胞、U87MG細胞、FHCRC-11細胞
NCIH510細胞系相關(guān)產(chǎn)品：N-9細胞、HCT GEO細胞、SNU-886細胞
COLO320HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2110細胞、SuDHL 4細胞、H2073細胞
J 82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RK-13細胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞、REC細胞
CWR22R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EAhy926細胞、A72細胞、SK_N_BE2C細胞
U118細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE-2細胞、GM17346細胞、MRAEC細胞
HT 1080.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Hep1細胞、HANK細胞、HFL細胞
C8D1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1930細胞、HELA-GFP細胞、Dunn LM8細胞
Swiss 3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JROECL 19細胞、624細胞、HNE2細胞
SNU620細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H196細胞、NCI-H1838細胞、DU-145細胞
NCIH322細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1116細胞、H-865細胞、Henrietta Lacks cells細胞
RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPDE細胞、TOV-21G細胞、H-2107細胞
33604細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS-18細胞、H-711細胞、U118細胞
RAMOS2G64C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：McCoy細胞、MADB106細胞、U-87MG細胞
H1618細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-12細胞、TCMK-1細胞、H810細胞
MHCC97-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞、RIN m5F細胞、MC3T3-E1(C4)細胞
hFOB 1.19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR8細胞、MiaPaCa2細胞、THP-1(ATCC)細胞
MCFs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK (AD293)細胞、PG-4 S+L-細胞、Ramos.G6.C10細胞
BaF3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECV304細胞、NCIH526細胞、H-1437細胞
GBCSD細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vx2細胞、H676細胞、HM06.A1細胞
KOPN8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC 94細胞、H740細胞、COLO 680N細胞
HME-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACT-1細胞、NCI-H1792細胞、NCIH1703細胞
NCI-SNU-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tb 1 Lu細胞、ECC1細胞、KCL22S細胞
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