"HCT 116細胞：人結(jié)腸癌細胞系
細胞背景資料：結(jié)腸腺癌；男性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細胞后，應該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應該懷疑凍存，實際上復蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。
冷凍細胞解凍程序：依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應不同之基礎培養(yǎng)基或不同之血清種類，若因?qū)嶒炐枰?，必須有所不同時，務必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細胞適應后，方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清)，對細胞而言差異極大，請務必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于３７°C水槽中回溫，回溫后噴以７０%酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管，立即放入３７°C水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在１分鐘內(nèi)全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細胞種類和濃度，于無菌操作臺內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T２５或T７５flask中。取出已解凍之細胞懸浮液，緩緩加入T２５或T７５flask內(nèi)之培養(yǎng)基，混合均勻，放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言，１%以下之冷凍保護劑DMSO，不會對細胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細胞中去除，待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細胞分化之細胞，需立即去除DMSO者，則可將解凍后之細胞懸浮液放入５-１０ml培養(yǎng)基中，離心３００xg(約１０００rpm)，５分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細胞均勻混合后，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中，再放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
MF2059細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM266mel細胞、HBL 100細胞、SU.86細胞
MDAMB436細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1990細胞、UMR-106細胞、SJRH-30細胞
WML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMR-106細胞、BCP1細胞、K7M2細胞
HOP 62細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU886細胞、NCI-SNU-16細胞、H-1105細胞
MHCC97-L細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKCO1細胞、SACC83細胞、NCI-H2126細胞
EST50細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-1095Sk細胞、GLRK 13細胞、SKES1細胞
LNCaP clone FGC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-51細胞、H2330細胞、JKT-1細胞
NB19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IHC-ST1細胞、U-251 MG細胞、NCI-H1869細胞
NPA87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DU 145細胞、Sc-1細胞、SHEP1細胞
RFL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-1197細胞、CAKI.1細胞、COLO 738細胞
P3/NS1/Ag4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：2008細胞、AA-Mel細胞、SMMC-7721細胞
EFO 27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TU 686細胞、Kit-225細胞、JB6 [Mouse]細胞
Calu-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GTL-16細胞、SW-13細胞、GM06141細胞
WC00097細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0202細胞、MFE-296細胞、SEM細胞
WM-266-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-966SK細胞、T-HSC細胞、MCF-7/ADR-RES細胞
AU 565細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Det 562細胞、OCM1細胞、WC00097細胞
AU 565細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Det 562細胞、OCM1細胞、WC00097細胞
HL60細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MT-3 [Human leukocytes]細胞、Farage細胞、MDA MB 436細胞
BJA-B-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GES1細胞、OVCAR-10細胞、SLMT-1細胞
H740細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Neuro2a細胞、SUM-190細胞、IOSE80細胞
159 PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T2細胞、H526細胞、HCC1937細胞
SR786細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOR-10細胞、NCIH1944細胞、639-V細胞
NTERA2D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MARC145細胞、MGH-U3細胞、H2195細胞
CMT-93細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bac1 2F5細胞、D341MD細胞、H1105細胞
Panc4.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMG-1細胞、EB2細胞、Melanoma 14細胞
PNT1/A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1599細胞、Hs729T細胞、NRK-49F細胞
Hs729T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIHOVCAR3細胞、EJ細胞、MDA361細胞
OE19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-10.05細胞、BT 20細胞、DH82細胞
Mono-Mac-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP-N-NS細胞、OSA細胞、P 815細胞
TCC Sup細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 695.T細胞、OCI-Ly01細胞、OCILY10細胞
Colo320細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC/PRF/5細胞、RBL-I細胞、TERT-RPE1細胞
PLMVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB6 clone 30, subclone 7b細胞、HTh-74細胞、L(TK-)細胞
H295R-S1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AU565細胞、AN3-CA細胞、HEK-2細胞
HL-60 Clone 15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HHUA細胞、Roswell Park Memorial Institute 7666細胞、TE-6細胞
HGC-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FLS細胞、H510細胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細胞
HL-60 Clone 15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HHUA細胞、Roswell Park Memorial Institute 7666細胞、TE-6細胞
NIE-115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRASMC細胞、Hs852細胞、L5178Y細胞
National Medical Center-Glioma 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBE 135-E6E7細胞、HSCT6細胞、KYSE 410細胞
RBE4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B95-8細胞、MCF-12F細胞、NCIH522細胞
Walker/LLC-WRC256細胞系相關(guān)產(chǎn)品：INS1-E細胞、CL1-0細胞、Vero 76 clone E-6細胞
HPAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero細胞、FBHE細胞、SK-SH-SY5Y細胞
H-1623細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOP-92細胞、Caki-2細胞、MFM-223細胞
H-929細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H/10T1/2 CL8細胞、ZR751細胞、NCI-H661細胞
Intestinal Porcine Epithelial細胞：-J2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B10BR細胞、C-33A細胞、HuH 6細胞
UT7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEG01細胞、TE-671細胞、T/GHA-VSMC細胞
PC-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CWR-22rv1細胞、V79-GalK1細胞、JJN3細胞
C2A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HaCaT細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞、Hs445細胞
8402細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMCUB1細胞、BMDC細胞、WM 2664細胞
He-La細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1703細胞、J 82細胞、THP1細胞
RERF-LC-MS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NH6細胞、H-211細胞、RBL-I細胞
Alexander cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293 c18細胞、M2-10B4細胞、CAL 85-1細胞
KE37細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2107細胞、J111細胞、M14細胞
SUM 52PE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OKa-C-1細胞、HT 1376細胞、NCI-H2198細胞
Hs895T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 7951細胞、SK-N-AS細胞、MOLP2細胞
Hopkins-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKBr3細胞、H1650細胞、Panc 4.03細胞
SNU878細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L cell細胞、CMECs細胞、A-875細胞
HLEB3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：McA-RH 7777細胞、2780CP細胞、NRK-52E細胞
MF2059細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM266mel細胞、HBL 100細胞、SU.86細胞
High 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC 327細胞、MA104細胞、MKN7細胞
U-343 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGH-U3 (RN)細胞、H735細胞、H1385細胞
NCIH244細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIPF155C細胞、MF2059細胞、EJ細胞
WM-239A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 410細胞、BRL-3A細胞、Mel-624細胞
H-1395細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A549-Taxol細胞、NCI-322細胞、UO-31細胞
PANC403細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFM223細胞、Hs294T細胞、H-929細胞
L-Wnt3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hk-2細胞、Hs1.Tes細胞、MUGCHOR1細胞
N1S1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTera2 cl.D1細胞、373MG細胞、RCF細胞
NCIH1105細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ST 486細胞、CT26.WT細胞、H-1299細胞
HCC2108細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNCL2細胞、MXI細胞、SW1783細胞
SAOS 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EO771細胞、SU.86細胞、Toledo細胞
H711細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMCD-3細胞、SW 982細胞、MGHU3細胞
Panc_08_13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-112CoN細胞、SV40-HCEC細胞、DU 145細胞
MC-CAR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NSH細胞、SW-962細胞、MC3T3-E1 Subclone 24細胞
WML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMR-106細胞、RT4-D6P2T細胞、CT26-clone 25細胞
SSP-25細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nb2細胞、NCI-SNU-1040細胞、H-2110細胞
"