"HCT 116 epithelioid cells人結(jié)腸癌細胞系 細胞背景資料:結(jié)腸腺癌;男性 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 SUM-159-PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp2/0-Ag-14細胞、SW1271細胞、OVCAR4細胞 COLO 738細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T 98 G細胞、Hs 688(A).T細胞、P560細胞 RGC-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16F0細胞、Human Epidermoid carcinoma #2細胞、A 72細胞 細胞生長:貼壁 HCT 116 epithelioid cells人結(jié)腸癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化,需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前,細胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細胞條件無血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存:計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以1×10(7)到5×10(7)細胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存:使用分離試劑從基層分離細胞,分離時盡可能溫和,使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細胞,確定有活力細胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以5×10(6)到1×10(6)細胞/ml密度,在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 UCLA RO-81A-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞、Hep3B細胞、M14-MEL細胞 211H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Gejiu Lung Carcinoma-82細胞、TO175T細胞、HSC 3細胞 CATHa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMB17細胞、GM 637細胞、GM 637細胞 NIH/3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAPC2B細胞、MDA-MB 468細胞、MX-1細胞 HET-1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM3190細胞、Caco2-BBE細胞、LX-2細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 HCT 116 epithelioid cells人結(jié)腸癌細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié):細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下。【違規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤。【傳代細胞人多口雜,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當(dāng)風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢! Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1623細胞、H-719細胞、OVSAHO細胞 RKO_AS45細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCL-H548細胞、X63-Ag8.653細胞、Saos2細胞 FHL 124細胞系相關(guān)產(chǎn)品:38C13細胞、L-M[TK-]細胞、FRO 81-2細胞 NCI-H1155細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-146細胞、MDCK-II細胞、RSMC細胞 FL 62891細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL60細胞、NCI-SNU-216細胞、KPL-1細胞 L363細胞系相關(guān)產(chǎn)品:alpha-TC1-6細胞、H1568細胞、S180細胞 QGY-7701細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT 93細胞、CAL 12T細胞、U20S細胞 CATHa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMB17細胞、GM 637細胞、GM 637細胞 TK-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 03.27細胞、FLC-7細胞、Hep2細胞 RC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HR-1細胞、HPDE細胞、OKT3細胞 HCT 116 epithelioid cells人結(jié)腸癌細胞系 NG-108-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TC-1 [Mouse lung]細胞、CL11細胞、BNL CL.2細胞 WEHI-279細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P31FUJ細胞、LICCF細胞、PC14細胞 Hs 729細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK Hep1細胞、YES-2細胞、JB-6 Cl 30細胞 NCI-H28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nittby-Salford 1細胞、L929(NCTC)細胞、H774細胞 SW 1783細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL7404細胞、P-388細胞、LTPA細胞 SKNO1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-175VII細胞、HCC-1937細胞、CT26細胞 SKNO1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-175VII細胞、HCC-1937細胞、CT26細胞 Hs888 Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NE-4C細胞、NTERA-2 cl.D1細胞、Ca9-22細胞 HOP 92細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WiDr/S細胞、624mel細胞、DI-TNC1細胞 PC.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-NM-C細胞、AZ 521細胞、SK-NM-C細胞 Ej138細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hi5細胞、MB-49細胞、G422細胞 RC92A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1648細胞、CCC-HEH-2細胞、HUT 125細胞 Pt-K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0070細胞、Kasumi-6細胞、NCI-H1373細胞 YT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC細胞、HCEpiC細胞、SKNMC細胞 HEL92.1.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLMEC細胞、MDA157細胞、GM05372細胞 NCI-H1781細胞系相關(guān)產(chǎn)品:253JBV細胞、NHEK細胞、ESC-410細胞 HTR-8/SV-neo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T24細胞、Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞、H1666_DA細胞 ND7/23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BA/F3細胞、LN229細胞、P3X63 Ag8細胞 ACHN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCV 29細胞、BrCL18細胞、MDA-MB-468細胞 DanG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:207細胞、TGW細胞、T2(174 x CEM.T2)細胞 OVCAR-420細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LICR-HN-6細胞、MDA435細胞、SNU-216細胞 SK-N-BE(1)n細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NSC34細胞、H-2023細胞、EAHY-926細胞 MLTC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV3細胞、HemECs細胞、SK N SH細胞 HOP 92細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WiDr/S細胞、624mel細胞、DI-TNC1細胞 UMC-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Embryo Kidney-2細胞、TSCCa細胞、SNU-620細胞 OCI/AML5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACC3細胞、Panc 8.13細胞、B16 F10細胞 CCD-18Co細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TW 01細胞、NCI-157細胞、A2780 CP70細胞 TE-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE細胞、U2-OS細胞、SuDHL 1細胞 COLO-684細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS 273細胞、NCI-SNU-668細胞、Hs852細胞 C1R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293細胞、UMNSAH-DF1細胞、NOR 10細胞 HT-29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS578細胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞、HcerEpic細胞 HC-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hca-F細胞、BT-483細胞、KATO 3細胞 Jurkat clone A3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LL/2 (LLC1)細胞、RTMC細胞、RIN m5F細胞 COLO829細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-695T細胞、L-02細胞、H341細胞 T-HSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-119細胞、Leghorn Male Hepatoma cell line細胞、ROS17/2.8細胞 MOLM-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-643細胞、OCI-Ly07細胞、PANC0203細胞 H2108細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-13細胞、H-2405細胞、NCIH69細胞 Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SSP-25細胞、H6c7細胞、HANK細胞 BT 20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-HUT-460細胞、NE-4C細胞、NCI-H2122細胞 Hs 600.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B 95.8細胞、SuDHL 1細胞、H1963細胞 C4 I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Alexander cells細胞、CWR-22rv1細胞、CC-LP-I細胞 ECV304細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H82細胞、3T3L1細胞、GOS-3細胞 AN3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kasumi 1細胞、alpha TC1 clone 6細胞、MNNG/HOS Cl #5細胞 HEC1-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C33A細胞、hA549細胞、LAPC-4細胞 SK-Hep1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hepatoma 22細胞、YH細胞、Mink Lung細胞 NIE-115細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRASMC細胞、Hs852細胞、L5178Y細胞 MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCKII細胞、NCI-HUT-596細胞、SK-ES細胞 RPMI no. 8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHT-101細胞、G292細胞、Rat Basophilic Leukemia-1細胞 D283MED細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lu99A細胞、HEK293S細胞、DoTc2細胞 LTEP-sm 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mono-Mac-6細胞、UPCI-SCC-090細胞、SNU-475細胞 HEB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMS26細胞、H-847細胞、EB1細胞 HCT 116 epithelioid cells人結(jié)腸癌細胞系 AN3-CA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA-SO-M20細胞、GM16136細胞、SNK-1細胞 H-1930細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PaCa2細胞、HCC1428細胞、RT4-D6P2T細胞 OCI-Ly07細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-175細胞、Hi-5細胞、TOV-112細胞 FHL 124細胞系相關(guān)產(chǎn)品:38C13細胞、3T3細胞、MRC9細胞 "
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